일반세균 검사1. 문제(1) 미생물을 다루는 클린벤치 환경으로 가정하여 실험을 하시오.(2) 실험에 사용하는 피펫 등 기구는 멸균된 상태로 가정하여 실험을 하시오.(3) 수험생을 2개 조로 구분하여 조별로 실험진행과 답안지 작성으로 구분하여 시행하며, 감독위원의 지시에 따라 작업하시오.(4) 제시된 결과에 따라 최종 결과를 계산하시오.1) 시료의 희석: 시료를 준비된 시험관에 10, 102, 103, 104배로 희석하시오.2) 시료의 분주: 각 희석 시료액 1 mL를 각각 2매의 petri dish에 분주하시오.3) 배지의 분주 및 혼합, 응고: 용해, 멸균 후 굳지 않게 보관된 배지를 각 petri dish에 15 mL 정도 분주하고 시료와 잘 혼합한 후 배지를 응고시키시오.4) 배양기에 넣고 배양5) 감독위원이 제시하는 실험결과에 따라 세균수를 계산하시오.2. 기구 및 지급재료? 액체시료(액상 유산균 음료) 10 mL? 표준한천배지 100 mL (가루 25g 정도/10인용의 배지가 제조)* 250 mL 삼각플라스크에 용해시켜 멸균한 배지를 100 mL씩 담고 알루미늄호일로 입구를 막아 43~45℃이상의 water bath에 굳지 않게 지급? Cap tube 5개?1회용 petri dish 6매? 멸균 생리식염수 10 mL? 70% 에탄올 100 mL? 킴와이프스3. 분석원리표준한천배지에 검체를 혼합 응고시켜 배양 후 발생한 세균 집락수를 계수하여 검체 중의 생균수를 산출하는 방법이다.4. 실험방법? 실험 시작 전 70% 알코올로 손소독, 작업대 소독을 실시한다.? 알코올 램프를 켠다.1) 시료 전처리? 멸균증류수 입구를 화염멸균한다.? 테스트튜브 입구 및 뚜껑을 화염멸균한다.? 피펫을 화염멸균한다.? 피펫과 피펫필러를 이용하여 각 테스트튜브에 멸균증류수를 9mL씩 넣는다. 5개 튜브 반복테스트튜브를 약간 기울여 낙하균으로 인한 오염을 막는다.2) 시료 희석액 조제 (10배 희석법)? 5개의 테스트튜브에 네임펜으로 라벨링 한다. 10 ~ 10⁴? 화염멸균한 피펫으로 시료군 1mL을 딴다.? 10배를 희석하고 순차적으로 10⁴배까지 희석한다. (10배 희석법) 각 과정마다 흔들어서 균질화 해준다.각 희석시 마다 새로운 피펫 화염멸균하여 사용. 각 과정마다 테스트 튜브입구와 뚜껑 화염멸균.희석 시, 테스트튜브를 든 손에서 뚜껑 내려놓지 않기.희석 후, 테스트튜브 입구 및 뚜껑 한 번 더 화염멸균 후 닫아주기.3) 배지 분주 및 접종? 과제로 제시된 희석배수 용액을 화염멸균한 피펫으로 1mL취한다.⑪ 각각 2매의 페트리디쉬에 분주한다.⑫ 용해, 살균한 표준한천배지를 각 패트리디쉬에 15mL정도 분주한다.고체배지의 응고 원래는 Agar 1.5%패트리디쉬의 뚜껑을 반쯤 기울여 들고 있는다.4) 배양⑬ 바닥에서 8자로 흔들어서 혼합한다.⑭ 알코올램프 옆에서 페트리디쉬 뚜껑을 약간 연채로 응고한다.⑮ 이름, 희석배수, 날짜 순으로 라벨링한다.? 거꾸로 뒤집어서 배양기에 넣고 35℃에서 2일 배양한다.뒤집어서 배양하는 이유는, 온도가 높은 배지에서 발생하는 수증기가 응축수가 되어 배지를 오염시키는 것을 방지하기 위해서.35℃ 2일 배양은 중온균의 배양조건5. 계산방법① 15 - 300CFU/ plate인 경우N =∑C{(1×n1)+(0.1×n2)}×(d)N= 식육 g 또는 mL 당 세균 집락수∑C = 모든 평판에 계산된 집락수의 합n1 = 첫 번째 희석배수에서 계산된 평판수(2개)n2 = 두 번째 희석배수에서 계산된 평판수(2개)d = 첫 번째 희석배수에서 계산된 평판의 희석배수(더 농도가 짙은 쪽, 희석 배수 의미)0.1은 한번 더 희석했다는 것을 의미구 분희 석 배 수CFU/g(mL)1:1001:1,000집 락 수232244332824,000N =(232+244+33+28){(1×2) + (0.1×2)} × 10-2= 537/0.022 = 24,409 = 24,000 = 2.4x10⁴예시)구 분희 석 배 수CFU/g(mL)1:10001:10,000집 락 수*************220,000(단위 확인필수)N =(300+200+150+30+20){(1×3) + (0.1×2)} × 10-3= 700/0.0032 = 218,750 ≒ 220,000(세번째 자리에서 반올림)② 15 CFU / plate 미만인 경우최소 희석액으로만 계산구 분희 석 배 수CFU/g(mL)1:101:100집 락 수141021120N =(14+10)(1×2) × 10-1= 24/0.2 = 120구분 없이 농도가 짙은 쪽을 더한 후, 평판수로 나눈 뒤, 희석배수로 나눈다.예시)구 분희 석 배 수CFU/g(mL)1:1001:1000집 락 수15105311,000(단위 확인필수)N =(15+10+5)(1×3) × 10-2= 30/0.03 = 1,000숫자는 높은단위로부터 3단계에서 반올림하여 유효숫자를 2단계로 끊어 이하를 0으로한다.
알칼리용액 조제 및 표정1. 문제(1) 표준용액 0.1 N 수산화나트륨용액 250 mL를 조제하는데 필요한 수산화나트륨 양을 계산하여 칭량한 후 증류수에 녹이고 250 mL 메스플라스크에 옮겨 증류수를 가해 정용하시오.(2) 0.1 N 염산용액(또는 황산용액) 25 mL를 정확히 취해 삼각플라스크에 넣고 제시된 3가지 지시약 중 적절한 것을 선택하여 가하시오.(3) 조제한 0.1N 수산화나트륨용액으로 적정하시오.(4) 측정값을 이용하여 0.1 N 수산화나트륨용액의 factor를 계산하시오(단, 계산결과는 소숫점 넷째자리에서 반올림하여 셋째자리까지 나타내시오)2. 기구 및 지급재료① 메스플라스크(500mL)② 뷰렛③ 삼각플라스크(200mL)④ 비커 두 개, 스포이드⑤ 고무필러, 피펫⑥ 깔대기⑦ 유산지⑧ 0.1N NaOH 시료(분말)⑨ 0.1N HCl⑩ 0.1% 페놀프탈레인용액3. 실험방법1) 0.1N NaOH 표준용액 500mL 조제① 유산지를 올려놓고 미세저울 영점을 맞춘다.1.0N NaOH 1000ml = 40g0.1N NaOH 1000ml = 4g0.1N NaOH 500ml = 2g0.1N NaOH 250ml = 1g② 과제에 맞춰 필요한 양 만큼 NaOH 분말을 당량한다.조해성¹을 고려하여 10%를 추가 당량한다.2g->2.2g 1g->1.1g③ 비커에 분말을 넣고 유산지에 증류수를 가하여 세척한다. 유리막대로 비커에 용해해준다.④ 메스플라스크에 옮긴 후 비커 벽면과 유리막대까지 증류수로 세척하며 메스플라스크 용량을 맞춘다. 마지막은 스포이드를 사용한다.⑤ 메스플라스크 입구를 파라필름으로 감싸고 섞어준다.⑥ 비커에 0.1N NaOH 라벨링을 하고 메스플라스크의 NaOH용액을 옮겨담는다.2) 0.1N HCl을 이용한 표정① 뷰렛의 콕을 잠그고, 0.1N NaOH로 뷰렛을 전처리 한다. 뷰렛의 투입구부터 끝부분까지 NaOH를 처리하는 것.② 깔대기를 이용하여 비커에 담긴 NaOH를 넣어주고 기포가 들어갔을 경우 기포를 빼내고 눈금을 확인한다. (HCl 과제량 + 5mL양, 25mL)③ 비커에 소분한 0.1N HCl 20mL를 피펫으로 고무필러를 이용하여 삼각플라스크에 옮겨담는다.④ 페놀프탈레인 2~3방울을 가한다.3)적정① 흰종이를 깔고 무색에서 분홍색이 될 때까지 0.1 NaOH용액을 뷰렛으로부터 한방울씩 가하여 적정한다. 분홍색이 30초간 유지되어야 한다.② 종말점 도달 시 사용량을 확인한다.4. 계산방법F= {V`` prime TIMES F`` prime } over {V}V = 0.1 N NaOH 적정 소비량(mL)V’ = 0.1 N HCl 채취량(mL)F’ = 0.1 N HCl 역가 (시약병에 있음)F = 0.1 N NaOH 역가5. 빈칸문제① 적정에서 사용되는 농도가 정확하게 알려진 용액, 정량분석의 기준 용액으로 사용되는 용액을 (표준용액)이라고 하고, 표준용액의 실제 농도를 결정하는 조작이 (표정)이다. 실제 노르말 농도를 원하는 소정의 노르말 농도로 나누어준 값을 (역가)라고 한다.② (표준용액)이 정확히 제조되어있는지 확인하는 것을 (표정)이라고 하고 노르말 농도로 원하는 소정의 노르말 농도로 나눈 값을 (역가, Factor)라고 한다.③ 반응식 작성a) NaOH + HCl → NaCl + H2Ob) 2NaOH + H2SO4 → Na2SO4 + 2H2O④ 목적 농도에 근사한 노르말 농도로 조제한 적적용 표준용액으로 노르말의 표준물질 용액을 적정하여 표준용액의 정확한 실제 농도를 구하고, 그 결과로부터 역가를 산출한다.⑤ 1N은 1L에 녹아있는 용질의 당량수를 의미한다.몰농도 x 당량수 = 노르말 농도⑥ 적정분석 : 정량하고자 하는 목적 성분이 용해되어있는 시료 용액에 적정하여 반응의 당량점에 도달하였을 때 그 표준용액의 소비량으로부터 계산에 의하여 시료중의 목적성분의 함량을 구하는 것.
식염정량1. 문제(1) 식염 정량을 하고, 답안지를 작성하여 제출하시오.(2) 계산결과는 소숫점 둘째자리에서 반올림하여 첫째자리까지 답하시오.식염 1 g을 함유하는 양의 검체를 취하여 필요한 경우 수욕상에서 증발건조한 후 회화시켜 이를 물에 녹이고 다시 물을 가하여 500 mL로 한 후 여과하고 여액 10 mL에 지시약 2~3방울을 가하고 0.02 N 질산은액으로 적정한다.2. 기구 및 지급재료① 간장② 0.02 N AgNO3 용액③ 크롬산칼륨 용액④ 500mL 메스플라스크⑤ 삼각플라스크 2개⑥ 피펫, 피펫 필러⑦ 유리깔대기, 여과지⑧ 스포이드⑨ 도가니, 텅3. 분석원리전처리한 검체용액을 비커에 넣고 크롬산칼륨(K2CrO4)시액 몇방울 가한 후 뷰렛 등으로 질산은(AgNO3) 표준용액을 적하하면 CI-은 전부 AgCl의 백색침전으로 되고 또 K2CrO4와 반응하여 크롬산은(Ag2CrO4)의 적갈색침전이 생기기 시작하므로 완전히 적갈색으로 변하는데 소비되는 AgNO3액의 양으로 정량하는 방법.4. 실험방법① 도가니의 항량을 구한다. 회화-방냉-칭량을 함량이 구해질 때까지 반복② 일회용 스포이드를 사용해 간장 5g을 도가니에 넣는다.③ 항온수조에서 85℃, 15분동안 뚜껑을 열고 증발 건조(수욕건조)한다. (간장의 수분 증발)④ 가열판 또는 전기곤로 위에서 300℃로 연기가 나지 않을 때까지 뚜껑을 열고 예비탄화 한다. (시료의 팽창 방지)⑤ 회화로 550℃ ~ 600℃로 2~3시간 뚜껑을 열고 회화한다. (유기물 회화, 간장색 제거)⑥ 도가니를 밧트로 옮겨 예비 방냉 후 데시케이터로 옮겨 30분 100℃로 방냉한다.(↑생략. 구두로)⑦ 시료를 500mL 매스플라스크에 넣고 도가니를 증류수로 씻어가며 메스플라스크 표선까지 증류수를 채운다.⑧ 삼각플라스크 위에 깔때기와 여과지를 설치하고 매스플라스크에 담긴 시료를 여과한다. (녹지 않는 불순물을 거르기 위함)⑨ 여과가 끝난 용액 10mL를 피펫과 고무필러를 이용하여 다른 삼각플라스크에 담는다. (50배 희석)⑩10% K₂CrO₄(크롬산칼륨) 2~3방울 넣는다.⑪ 뷰렛의 콕을 잠그고 깔대기를 이용해 0.02N AgNO₃ 표준용액으로 뷰렛을 전처리 한다. 기포가 들어갔을 경우 빼준다.⑫ 눈금을 확인하고 흰 종이를 깐 후, 한방울씩 적정한다.⑬ 무색(황백색)에서 적갈색이 될 때까지 적정한다. 적갈색을 30초 이상 유지했을 때까지 한다. 종말점 도달 시 사용량을 확인한다.5. 계산방법NaCl(mL%)= {0.00117 TIMES 0.02N``AgNO _{3} `소비량 TIMES 0.02N``AgNO _{3} `역가 TIMES 희석배수} over {시료량(mL)`} TIMES 100여기서 희석배수는 500.1N AgNO3 질산은 용액을 사용할 경우 0.000585를 대신 곱해준다.6. 빈칸문제? AgNO3 + NaCl → AgCl↓(백색 침전) + NaNO3? 2AgNO3 + K2CrO4 → Ag2CrO4↓(적갈색 침전) + 2KNO3? 본 실험은 회화를 통해 유기물을 휘발시킨 후 적정을 실시하는 회화법인 Mohr법을 통해 식염을 정량하는 방법이다. 이 방법은 용액의 pH가 6.5~10.5범위가 아니면 오차가 큰 단점.
수분정량1. 문제(1) 수분정량시험을 하고, 실험결과에 따른 수분함량을 계산하여 구하시오.(건조기 실제 사용, 방랭 등의 작업은 실제 실험을 생략하여 감독위원의 지시에 따라 가상으로 작업하고, 제시된 실험결과에 따라 수분량을 계산한다.)(2) 계산결과는 소숫점 둘째자리에서 반올림하여 첫째자리까지 나타내시오.검체 3~5 g을 정밀히 달아, 규정된 온도의 건조기에 넣어 3~5시간 건조한 후 수분량을 측정한다.2. 기구 및 지급 재료① 건조기② 천칭③ 데시게이터④ 도가니 집게⑤ 막자사발⑥ 유산지 8장⑦ 라면 20g⑧ 칭량접시3. 분석원리검체를 105℃ 에서 상압건조시켜 감소되는 양을 수분량으로 한다. 동물성 식품과 단백질 함량이 많은 식품(98~100℃), 자당과 당분을 많이 함유한 식품(100~103℃), 식물성 식품(105℃), 곡류(110℃) 등의 신속법으로 쓰인다.건조시료는 분쇄, 액체시료는 해사와 함께 증발건조(물엿, 올리고당), 수분함량이 많은 시료는 40~60℃ 예비건조하여 시료를 전처리한다.4. 실험방법1) 칭량접시 함량① 칭량접시 무게 측정② 도가니 집게를 사용하여 105℃의 건조기에 넣기③ 이때 칭량접시 뚜껑을 반쯤 열고 2시간 건조한다.④ 칭량접시 뚜껑을 닫고 데시케이터에서 30분동안 방냉한다.⑤ 칭량접시 무게를 측정한다.항량(건조 전후 무게 차이가 0.1% 미만-0.0003g미만의 차이) 도달 시까지 3반복온도가 105℃인 이유는 수분의 건조 온도가 100℃이기 때문. 그 이상으로 설정하면 기타 성분들까지 건조된다.뚜껑을 반쯤 열고 건조시켜야 내부에 있는 수분까지 완전히 건조된다.2) 시료의 전처리 작업① 시료를 막자사발에 분쇄한다.② 천칭에 유산지를 올려놓고 영점을 맞춘다.③시료 3g을 측정한다.시료를 분쇄할 때 한 손으로 막자사발 입구를 가려서 분쇄시료가 바깥으로 튀지 않도록 주의.3) 시료의 건조 및 항량 작업① 시료가 담긴 칭량접시를 도가니집게를 사용하여 건조기에 넣는다.② 뚜껑을 반쯤 열고 105℃의 건조기에서 4시간 동안 건조한다.③ 건조기에서 칭량접시를 꺼낸 후 뚜껑을 닫고 데시케이터에서 30분 동안 방냉한다.④ 데시케이터에서 꺼내어 무게를 측정한다.항량이 될 때까지 2시간 건조, 30분 방냉, 칭량을 반복한다.5. 계산방법수분함량(%)= {수분중량} over {시료의`무게} TIMES 100= {건조전`시료와`칭량접시의`무게-건조후`시료와`칭량접시의`무게} over {건조전`시료와`칭량접시의`무게-칭량접시의`무게} TIMES 1006. 빈칸문제① 검체를 물의 (끓는점) 보다 약간 높은 온도 105℃에서 (상압건조)시켜 그 감소되는 양을 (수분량)으로 하는 방법② 식품에 존재하는 수분을 드라이오븐에서 105℃로 가열하여 수분을 제거 후 그 함량을 측정하는 법을 상압건조법이라 한다.③ 건조 또는 강열할 때 (항량)이라고 기재한 것은 다시 계속하여 1시간 더 건조 혹은 가열할 때 전후의 칭량 차가 (이전에 측정한 무게)의 (0.1% 이하)임을 말한다.
라인형안전 조직 장.단점을 각각 1가지씩 쓰시오1) 장점안전에 대한 지시 및 전달이 신속.용이하다명령계통이 간단.명료하다2) 단점안전에 관한 전문지식이 부족하고 기술의 축적이 미흡하다안전정보 및 기술 개발이 어렵다★2 다음의 특징을 갖는 안전관리조직은 무엇인가?1) 안전지식과 기술축적이 용이2) 권한다툼이나 조정 때문에 통제수속이 복잡해지며,시간과 노력이 소모3) 생산부문은 안전에 대한 책임과 권한이 없다.- 스태프형(staff) 안전관리조직라인-스태프 조직 장,단점을 각각1가지씩 쓰시오1) 장점안전에 대한 지시 및 전달이 신속.용이하다안전지식 및 기술 축적 가능하다2) 단점명령개통과 지도,조언 및 권고적 참여가 혼동되기 쉽다스태프의 힘이 커지면 라인이 무력해진다2 하인리히가 제시한 재해예방대책 4가지를 쓰시오.1) 예방가능2) 원인연계3) 손실우연4) 대책선정★3 하인리히의 재해예방 대책 5단계를 순서대로 나열하시오.1단계 : 안전관리조직2단계 : 사실의 발견3단계 : 분석평가4단계 : 시정책 선정5단계 : 시정책의 적용하인리히와 버드의 재해구성비율을 설명하시오 (11년)- 하인리히 : 1:29:300 =중상 또는 사망 : 1회경상 : 29회무상해 사고 : 300회- 버드 : 1:10:30:600 =중상 또는 폐질 : 1회경상,물적,인적상해 : 10회무상해 사고 : 30회무상해, 무사고 : 600회 하인리히 사고발생 5단계 (도미노 이론)1단계: 사회적 환경,유전적 요소(선척적 결함)2단계: 개인적인 결함3단계: 불안전한 행동 및 상태4단계: 사고발생5단계: 재해★2 사고예방대책의 기본원리 5단계 중 “시정책의 적용”단계에서 적용할 3E는?1) 기술(Engineering)2) 규제(Enforcement)3) 교육(Education)