[효소학]효소의 활성과 반응속도론

목차

1.실험원리
2.실험방법
3.실험결과
4.느낀점

본문내용

<실험원리>
모든 화학 반응은 가역 반응으로서 정반응의 속도와 역반응의 속도를 갖는다. 반응이 평형에 도달하면 정반응의 속도와 역반응의 속도가 같아진다. 효소는 화학 반응의 속도를 증가시키는 방법으로 빨리 평형에 도달하게 촉매 작용을 한다. 효소의 초기 반응 속도란 역반응에 참가하는 생성물이 생기기 전 초기 단계에의 정반응만의 속도로 나타낸다. 일정한 효소의 농도에서 반응이 초기 속도는 기질의 양에 영향을 받는데 이를 다름의 식[미켈리스 - 멘텐 방정식(Michaelis-Menten equation)}으로 나타낼 수 있다.

여기서 Km을 미켈리스-멘텐 상수라 하며 기질과 효소의 친화도를 나타낸다. Vmax는 최대 반응 속도로 모든 효소가 기질과 결합한 상태의 반응 속도를 나타낸다. 또는 위의 식을 직선화시킨 라인웨버-버크(Lineweaver-Burk)식으로 나타내면 다음과 같다.

실험에서는 효소의 농도를 고정하고 기질의 농도([s])를 변화시키면서 초기 반응 속도(v)를 축정한다. 초기 반응 속도의 역수를 기질 농도의 역수의 함수로 표시하면 라이웨버-버크 도면을 그릴 수 있고, 이때 직선의 기울기(Km/Vmax),y-절편(1/Vmax) 또는 x-절편(-1/Kmax)으로부터 Km, Vmax값을 구한다.
Theory: Glucose-amylase reaction의 효소반응으로 substrate(Corn starch)를 이용,gelatin azation형태를 amylase로 분해함으로써 단편의 환원당을 만들 수 있다. (a-1,6 and a-1,4 bond break)
그 결과 환원당 증가에 따른 DNS의 결합(강알칼리-불활성화) 염색을 통해 흡광도 A(영향을 미치는 인자 :농도-변화, 길이-일정, 흡광계수-일정) 측정을 할 수 있다.

참고자료

· 없음