아미노산과 단백질의 정성, 정량 분석

소개

생화학 실험 레포트 입니다.

목차

실험목적
1. 이론
2. 실험기구 및 시약
2.1. Ninhydrin test
2.2. Biuret test
3. 실험방법
3.1. Ninhydrin test
3.2. Biuret test
3.2.1. 정성분석;
3.2.2. 정량분석;
4. 실험결과
4.1. Ninhydrin test
4.2. Biuret test
4.2.1. 정성 분석;
4.2.2. 정량 분석;
5. 고찰
참고문헌

본문내용

3.1. Ninhydrin test
정성분석;
1. 아미노산- glycine , tyrosine , tryptophan , proline 0.1% 수용액
2. 단백질 - 알부민 1% 수용액
3. glucose 0.1% 수용액
4. 1% 암모니아수
5. ninhydrin 0.2% 수용액(쓰기 바로 전에 만들 것)
시험관에 1ml 시료 용액을 취하여 (한 시험관에 한 가지 용액만 선택하여서 넣을 것) 암모니아수 1-2 방울을 넣어 그 pH를 대햑 중성으로 조절한 후 ninhydrin용액을 5방울 정도 가하여 2분간 끓이면서 색의 변화를 관찰한다.

3.2. Biuret test
3.2.1. 정성분석;
2% 알부민 용액 2ml와 10% NaOH용액 2ml를 잘 섞은 후 0.1% 용액 1방울을 가하여 혼합한다. 이 때 핑크색이나 보라색은 나타나지 않는다. 계속해서 황산구리 용액 몇 방울을 가하여 핑크색에서 보라색이 될 때까지 (최고 20방울) 가한다. casein과 pepton용액으로 실험을 반복해 본다.
3.2.2. 정량분석;
단백질 표준용액; 3.0 mg/ml Bovine serum albumin 10 ml
뷰렛 시약 (총 500ml) - ․ 5 1.5g, 타르타르산 나트륨칼륨 4.5g을 250ml의 0.2N NaOH 용액에 용해시키고 여기에 KI 2.5g을 추가한 후에 0.2N NaOH용액으로 총 500ml의 부피로 만듬
시료- 탈지우유 50배 희석

단백질의 정량
준비한 시료에 뷰렛 시약 3ml를 가한 후 (총6ml), 30분간 방치하였다가 540nm에서 흡광도 측정

4. 실험결과
4.1. Ninhydrin test

glycine
tyrosine
tryptophan
proline
알부민
glucose
보라색
보라색
보라색
살구색
보라색
변화 없음

참고자료

· 장현기외, 「식품분석」, 형설출판사, 2003.
· 채기수외, 「생화학」, 지구문화사, 1999.
· 채수규외, 「표준 식품분석학」, 지구문화사, 2006.
· 한명규, 「최신 식품화학」, 형설출판사, 2002.
· Trudy McKee & James R. McKee, 박인국역, 『생화학 길라잡이(3판)』, 라이프 사이언스, 2006.