수산식품 화학 및 실험1. 실험제목 : VBN(Volatile Base Nitrosen 휘발성 염기질소) 측정2. 실험일시 : 2015년 3월 24일(화)3. 실험목적 : 어패류의 선도 판정법 중 화학적 판정법의 하나로 VBN은 암모니아를 주로하여 TMA, DMA 등으로 된 휘발성 염기는 어획 직후의 근육 중에는 극히 적으나 선도의 저하와 더불어 증가하므로 이들 휘발성 염기 질소량을 측정하여 선도를 판정하는 방법이 널리 이용되고 있다. 즉, 식품이 부패할 때 그 지표가 되는 휘발성 질소의 정량으로 휘발성 질소의 생성량, 존재량과 식품의 가식 한계를 알 수 있으므로 중요한 실험법의 하나가 되고 있다. 그러나, 상어, 가오리 등의 어육에는 다량의 요소가 함유되어 암모니아 생성이 많아서 이 판정에서는 제외된다.※ 식품 부패의 판정기준5 ~ 10 mg% : 신성한 어육15 ~ 25 mg% : 보통 어육30 ~ 40 mg% : 부패 초기50mg% 이상 : 부패 어육VBN 선도 한계점 : 20mg%※암모니아 (mg%) : (a-b) × 0.14 × 희석배수/시료무게 × 100 = 0.98%4. 실험원리 : 휘발성 염기 질소를 함유한 용액을 conway unit의 외실에 넣고 내실에 이것을 흡수하는 용액을 넣어 뚜껑을 닫아 두면 일정 시간 내에 시료의 증발, 확산 및 흡수가 된다. 시료에서 TMA, NH3, 1차 아민류 및 2차 아민류를 유출시켜 HCI로 적정하여 휘발성 염기 질소를 정량하는 방법이다.5. 시료1) 각 2%, 20% TCA(Trichloroacetic acid)용액2) 0.1N HCI 용액3) K2BO3(Potassium Carbonate) 포화용액4) H3BO3(붕산)흡수제5) Methyl Red6) Bromocresol green7) Methyl alcohol8) 초산용액9) 붕산10) 탄산칼륨11) 염산12) 암모니아13) 유동파라핀14) 여과지15) 원료유지16) 에테르17) 메탄올18) 1% 페놀프탈레인지 시약19) 0.1N 수산화칼륨용액6. 준비물1) Conway 미량확산용기(접시, 뚜껑, 클립)2) 항온기3) 전자저울4) 유동파라핀5) 미량 수평 뷰렛6) 균질기(브랜더)7) 콘라드봉8) 피펫필러9) 피펫10) 비커11) 시약스푼7. 실험방법1) 0.1N H2SO4와 0.1N NaOH를 물 50ml와 섞어서 0.01N H2SO4와 0.01N NaOH를 만든 다.2) 시료(청어) 10g을 재어 stomacher bag에 넣습니다.3) 물을 90g을 넣어준 후 stomacher에 넣고 작동시켜줍니다.(10배 희석시키기 위해서 공식 때 필요한 값입니다. - 희석배수)4) 다 석였다고 싶을 쯤에 stomacher에서 꺼내어 줍니다.5) 시료들이 가라앉고 위에 뜨는 혼합액시료 50ml를 비커에 넣고 5% H2SO4를 첨가하고 고루 섞습니다.6) 증류수에 H2SO4를 3방을 넣어준 후 고르게 섞습니다.7) 외실에 혼합액시료를 1ml, Blank시료를 1ml 넣어줍니다.8) 내실에는 0.01N H2SO4를 1ml 넣어줍니다.※ Conway 확산기는 내실과 외실이 분리되어 있습니다.※ 서로 섞이면 안된다. 섞이면 처음부터 실험을 다시 해야합니다.9) 외실에 한번 더 K2CO3 용액을 1ml 넣어 줍니다.10) K2CO3 넣어 준 후에 덮개에 바셀린을 바른 후(떨어지지 않게 하기 위해서) 클립으로 고정시켜 줍니다.11) 살살 흔들어서 외실의 시료들이 섞이게 해준다.12) 이름표를 붙여주어서 시료와 Blank를 구별 한다.13) 건조기에서 30분 동안 정치합니다.14) 꺼낸 후에 내실에 브렌스위크 지시약을 1~2방울 넣고 지시약 넣고 섞고 넣고 섞는 과정을 반복해서 보라색으로 완전히 변하면 과정을 멈추어 준다.15) 0.01N NaOH를 넣어준다 그런 다음에 두 가지를 측정한다.1. Blank에 사용한 0.01N NaOH 양2. 시료에 사용한 0.01N NaOH 양※ Blank실험(공실험)을 하는 이유 : 시료의 효과를 조사하기 위해서 한다.※ 가장 중요한 점 : 외실과 내실이 섞이지 않게 하는 것(섞이면 파란색이 나옴)※ 계산- 휘발성 염기질소량(mg%) = × f × 100
Protein contents measurement2017년 11월 30일 오후 3시 날씨 : 맑음실험원리Lowry method는 널리 쓰이는 방법으로 알칼리 조건에서 구리 ion이 peptide bond에 결합하는 biuret method에 기초를 두고 있다. 생성된 구리가 inorganic salt mixture인 Folin reagent와 Folin-Ciocalteu반응을 하는데 phosphomolybdotungstate가 구리에 의한 aromatic amino acid의 산화에 의해 heteropolybdenum blue로 환원되는 반응에 의해 진환 푸른색을 발색한다.장점0.01mg/mL정도의 양까지 감지할 수 있을 정도로 민감하고 단백질이 침전되어 있더라도 측정할 수 있고 측정범위는 0.01-1.0mg/mL임.단점Biuret method에 기초를 두고 있기 때문에 단백질의 종류에 따라 그 값이 변할 수 있고 Folin-Ciocalteu반응을 방해하는 물질들이 많기 때문에 단백질 용액에 그러한 물질이 있는 경우, 제거를 하거나 보정을 해주어야 함.실험재료Reagent A 용액, Reagent B 용액, BSA(Bovine Serum Albumin), 준비한 샘플 용액, 증류수, 분광기, plastic tube, pipets, cuvettes, Voltex mixer, standard 용액실험 방법standard 용액에는BSA DW200ul 0ul160ul 40ul120ul 80ul80ul 120ul40ul 160ul0ul 200ul 을 넣고Sample에는 sample용액을 200ul 6개를 200ug넣는다.Reagent A 용액을 100ul씩 standard 와 sample에 넣어준다.Reagent B 용액을 800ul씩 standard 와 sample에 넣어준다.용액들을 큐벳에넣어 분광기에 넣고 750nm로 흡광도를 측정한다.standard측정한 값으로 그래프를 그린다.그래프의 기울기를 이용하여 sample 의 단백질 함량을 측정한다.실험 결과Standard00ml400.034ml800.063ml1200.96ml1600.124ml2000.140mlSample0.2300.2320.233Sample 농도8.8538.9238.958Sample농도 평균8.911그러므로 sample의 농도는 8.911이다.고찰단백질 측정을 할 때 pipet을 잘 조절하여 사용해야는 것을 알게 되었고,이 실험은 미량의 단백질 측정에 적당하다는 것을 알게 되었습니다.
유기가공식품이란?(1) 유기농의 정의Organic, 즉 유기농이란 화학비료, 살충제, 살균제, 제초제, 성장호르몬제 등 이른바 환경박물제(Envirometal suicides)라 불리는 일체의 합성 화학물질을 사용하지 않고, 자연물질과 미생물 등 자연 그대로의 재료를 사용하는 농법을 말한다. 유기농법은 자연환경의 인과관계를 연구하는 환경생태학적 관점에서 야생상태와 같은 자연 그대로의 성장조건으로 재배하여 자연의 생태학적 균형을 유지하는 환경 친화적인 농법이다.유기농은 식물의 생장에 필요한 양분을 화학비료 대신 퇴비 등의 유기질 비료를 사용하고 간작과 윤작을 통해 토양 산성화 등 토양오염을 방지하여, 균형잡인 유기질 영양공급으로 내성이 생겨 병충해에 강하고 천적과 기피식물로 병충을 퇴치함으로써 일체의 합성화학물질을 사용하지 않고도 농작물을 재배할 수 있다.(2) 유기가공식품의 개념유기농산물을 주원료로 하여 제조,가공된 식품을 말하며, [친환경농업육성법]에 의해 유기재배 인증을 받은 국산 유기농산물 뿐만 아니라 외국의 인증기관으로부터 인증받은 수입 유기농산물로 제조, 가공원 식품도 포함된다.유기농산물의 인증이 의무화되어 있는 것과는 달리 유기가공식품에 대한 인증제도는 시행되고 있지 않으며, 식품에 함유된 유기농산물의 함량에 따라 “유기가공식품” 또는 “유기” 등의 표시를 할 수 있다.녹즙 등 일부 품목의 경우 [국립농산물품질관리원]으로부터 ‘유기농산물가공품 품질인증’을 받아 이를 제품에 표시할 수 있으나, 이는 의무사항은 아니다.- 관련법규 : 식품등의 표시기준(식품의약품안전청고시 제2003-27호)- 농산물가공산업육성법- 유기농상물가공품 품질인증에 관한 규정(국립농산물품질관리원 고시 제 2002-4호)- 관련기관 : 보건복지부, 식품의약품안정청, 농림부(3) 유기가공식품의 종류유기가공식품두부, 콩나물, 묵, 당면, 된장, 고추장, 간장, 참기름, 들기름, 고춧가루, 쨈, 주스, 빵, 국수, 조청, 강정, 유과, 차, 떡, 보리차, 엿기름, 미숫가루, 김치, 식초 등(4) 유기가공식품의 시장현황- 유기가공식품 등 친환경식품의 시장규모는 지난 2001년 3000억원에서 2002년에 3600억원으로 20% 성장한데 이어, 2003년에는 4,070억대가 될 것으로 예상되며 2006년에는 6,700억원대에 달할 것으로 전망된다.- 유기가공식품은 중소업체를 중심으로 주로 백화점의 수입식품 코너나 전문매장 등에서 유통되어 왔으나, 최근에는 그 수요가 늘면서 백화점, 할인점 등 대부분의 유통업체에서 판매 되고 있으며 대형 식품업체들이 시장에 진출하고 있다.(풀무원, 삼양, 동원 등과 같은 대형식품업체들과 롯데, 신세계 등 백화점들이 전문매장 및 인터넷쇼핑물을 개설하여 시장이 점차 확대되는 추세이다)2. 유기가공식품의 가격현황(1) 유기농산물과 일반농산물의 가격 비교- 유기농산물은 일반농산물에 비해 투입되는 지원이 많고 조달면에서 제약성을 갖기 때문에 생산비가 증가하게 된다.- 화학비료와 농약을 적게 쓰는 반면 유기질 비료인 퇴비, 산야초나 유기물을 발효하는 효소비료를 많이 사용하는데, 물량확보에 애로점이 많고 장기효과를 보여 주기 때문에 증산효과가 상대적으로 작다. 또한 제초제,농약,성장촉진제 등과 대체하는 노동력이 많아짐에 따라 인건비 부담이 증가하고, 무농약농법에 의한 병충해 피해가 크기 때문에 보관비가 많이 소요된다.- 이에 따라 유기농산물이 일반농산물에 비해 다소 비싼 것이 일반적인데, 주요 백화점에서 판매되는 국산 유기농산물과 일반농산물 10개 품목의 가격을 비교해 본 결과, 유기농산물 가격이 일반농산물 가격의 최저 1.3배 ~ 최고 3.3배(평균 2배)에 이르는 것으로 나타났다.< 유기농산물과 일반농산물의 가격 비교>구분단위유기농산물일반농산물비율(A/B)가격범위평균가격(A)가격범위평균가격(B)호박100g300~900724170~290219331%고추100g1,600~2,5001,831480~780647283%3. 유기농업 식품의 미래 지향성.유기농업은 당장 전세계 사람들을 먹을 만한 양을 대처 할 수는 없다. 하지만 유기농업은 지속가능성이라는 특징으로 인해서 시간을 지나고 나면 사람들의 먹을 양을 대처 할 것으로 본다.1) 사회적 지속가능성지속가능성은 세대 사이의 공정성에 관한 것이기도 한다. 유기농업은 경작할 수 있는 토양의 소멸과 수질오염, 생물다양성상실, 온실가스 배출, 먹을거리 손실, 농약중독 등을 줄임으로써 사회복지에 기여한다. 유기농업은 전통지식과 문화에 기초한다. 그 농법은 독특한 생물물리학적, 사회경제적 제약과 기회에 대응하여 지역의 환경에 어울리도록 진화한다. 지역의 자원과 지식을 활용하고, 농민과 소비자 및 그 시장을 연결함으로써 농촌의 경제 조건과 개발을 향상시킬 수 있다.
1. 실험제목 : 배지만들기2. 실험일시 : 4월13일 (예정)3. 실험이론 : 배지라는 것은 미생물 배양을 위해서 만드는 것이다. 배지를 만들고 그 위에 도말을 함으로써 도말방법도 익힐 수 있는 실험이다.미생물이 자라려면 먹이가 필요한데 배지가 바로 그런 역할을 하는 것이다. 도말이라는 것 도 먹이에 균체를 깔아 줌으로써 먹고 자랄 수 잇게 해주는 것을 말한다. 그렇다면 이러한 간단한 원리를 알고 실험에 임해야겠다.배지는 이용되는 재료, 사용 형태, 사용 목적 등에 따라 분류 할 수 있다. 재료에 따라 분 류된 배지의 종류를 간단히 나열해 보겠다.ⓐ 천연배지 : 배지 재료가 천연물로서 그 화학 조성이 확실히 알려져 있지 않은 배지다. 미생물의 정확한 생육소를 모를 때, 생육소의 요구량이 많을 때 사용한다. Oat meal 배지, 볏짚 배지, Nutrient broth 배지 등이 있다.㉮ 육즙 및 대용 육즙 : 일반 세균에 많이 사용한다. 육즙은 수육의 침출액을 농축한 것이기 때문에 육중의 가용성 질소화합물과 비타민 등의 생육촉진 인자, 무기염류가 풍부하여 미생물의 배양에 광범위한 세균 배양에 사용되고 있다.㉯ 효모즙 (Yeast extract) : 아미노산, 비타민류, 무기염류를 풍부하게 함유하고 미생물 배양에 광범위하게 사용한다.㉰ 맥주 : 초산균, 유산균, 산막효모 등의 배양에 이용한다.ⓑ 합성배지 : 화학 조성이 알려져 있는 재료만으로 만들어진 배지로서 Czapek- Dox 배지 등이 있다ⓒ 반합성배지 : 합성배지의 성분의 일부를 peptone, Yeast extract 등 화학 조성이 밝혀지지 않은 천연물로 바꾸어 놓은 배지이다.2) 사용형태의 의한 분류1. 고체배지 : 액체배지에 agar, 젤라틴, 실라카켈 등을 첨가하여 굳힌 것으로 고체배지는 미생물의 보존 배양, 순수 분리 등에 사용된다. 고체배지는 평판배지, 고층배지, 사면배지 등이 있으며 목적에 따라 사용 방법이 다르다. agar 등의 고형제의 함량은 사용목적에 따라 바뀐다.다음과 같이 배지는 이용되는 재료, 사용 형태, 목적 등에 따라 분류 될 수 있으므로 사용 하는 목적에 따라서 사용하는 배지를 선택하면 올바른 실험 결과를 얻을 수 있을 것이다.4. 실험 기구 및 재료⑴ LB broth⑵ Bacto agar⑶ DW⑷ 매스실린더⑸ 압력밥솥⑹ 면봉⑺ 100ml 플라스크⑻ 버너⑼ 부탄 가스⑽ Weighing boat⑾ 약수저⑿ 알코올 램프5. 실험방법 및 구상① 고체배지1. MRS Broth 16.6g Agar powder 4.5g을 삼각플라스크에 넣고 증류수를 넣어 300ml을 만든 후 자석교반기에 올려 끓을 때까지 가열하면서 교반한다.2. 만들어진 배지를 잘 봉한 다음 autoclave에 15분 돌린다.3. 클랜벤치 안에서 페트리디쉬에 배지를 얇게 깐 후 굳힌다.4. 캡튜브에 배지를 1/3~2/5정도 채운다음 1개는 세워서 굽혀 고충배지를 만들고 1개는 눕혀서 굳혀 사면배지를 만든다.② 액체배지1. MRS Broth 5.5g을 삼각플라스크에 넣고 증류수를 넣어 100ml를 만든 다음 잘 흔들어 준다.2. 만들어진 배지를 잘 봉한 다음 autoclave에 15분 돌린다.액체배지에 피펫으로 균 1ml을 취하여 접종한다.① 평판배양1. 백금이를 소독한 후 식힌다.2. 균을 백금이로 긇어서 뜬다.3. 페트리디쉬를 살짝 열고 백금이로 처음에 촘촘하게 하다가 점점 넓게 하여접종한다.② 사면배양1. 백금이르 소독한 후 식힌다.2. 백금이로 균을 뜬다3. 사면배지의 두껑을 열고 균을 접종한다.③ 천자배양1. 백금선을 소독한 후 식힌다.2. 백금선으로 균을 뜬다.3. 고체배지의 뚜껑을 열고 백금선을 수직으로 찔러 접종한다.6. 참고문헌∴ 식품미생물학실험서, 안병용,김동한,김인규,김주영 공저, 석학당 2003년∴ 최신환경미생물학, 송홍규,오계헌 편저, 동화기술 1994년∴ 최신미생물학, 박성기외 5명, 신광문화사1. 실험제목 : 공중낙하균 측정2. 실험일시 : 4월 13일(예정)3. 실험이론 : 대기 중에는 여러 가지 미생물이 먼지와 함께 부유하고 있다. 이러한 먼지와 미생물은 물이나 환경에 오염을 일으키고 그 미생물이 병원체일 경우 질병의 원인이 될 수 있습니다. 따라서 대기 중에 존재하는 세균이나 진균의 종류 및 그 수치를 측정함으로써 미생물에 의한 대기 외 오염을 알 수 있으며, 대기 중에서 존재하는 미생물이 어떠한 미생물의 분포를 이루는지 알 수 있는 것입니다. 미생물을 측정하는 방법 중에서 지면으로 낙하하는 미생물을 계수하는 방법은 그 실험방법이 간단하고 측정이 쉽기 때문에 널리 쓰이고 있는 방법입니다. 따라서 미생물을 측정하는 방법 중 쉬운 공중낙하균 측정을 통해서 우리가 살아가고 있는 대기 중에 어떤 미생물이 살고 있는지 측정할 수 있는 것입니다.4. 준비물1. Incubator2. 미생물 집락 계수기(Colony counter)3. NA(Nutrient Agar)배지4. PDA(Potato Dextrose Agar) 배지5. Slide glass6. Cover glass7. 메틸렌블루8. 바셀린5. 실험 방법1. LURIA ? Bertani media (LB 배지)- Tryptone : 5 gram- Yeast Extract : 2.5 gram- NaCl : 5 gram- Bacto-Agar : 10 gram- Total ddH₂ : 500 ml2. Potato Dextrose Agar 배지(PDA 배지)- 감자 200 gram을 증류수 1,000ml에 넣고 30분간 끓인다.- 증발된 물의 양만큼 물을 채워 1,000 ml을 만든다.- Dextrose 20 gram을 첨가한다.- Agar 20 gram을 첨가한다.- 증류수 1,000 ml을 첨가한다.3. 제조된 배지를 멸균한 후 clean bench에서 petri-dish에 planting4. LB 배지와 PDA 배지를 실험 장소인 예를 들어 식당, 화장실, 정원 등에 뚜껑을 열어 15분간 방치한다.5. LB Plate는 37도 incubator에서 48시간 배양하고, Potato Dextrose Agar 배지는 25도에서 72시간 배양하여 관찰한다.※ 주의사항 : LB배지와 PDA 배지를 동시에 만들기 때문에 만들 때 헷갈리지 않아야 하며, 서로 섞이지 않게 조심한다. 미생물을 채집할 장소를 선택해야 하는데, 환경 차이가 많이 나는 곳으로 선택하는 것이 좋다. 예를 들면, 지하와 정원, 식당과 화장실 등등 많은 수의 dish를 쓰기 때문에 헷갈리지 않도록 Naming을 잘 해야 한다.6. 참고문헌- 미생물학 실험 , 월드사이언스- 미생물학 실험서 김종협 외 2명, 대광문화사- 최신 미생물학 박석기 외 5명, 신광문화사- 미생물의 생물학 Brock, Madigan, Prentice-Hall1. 실험제목 : 우리주변의 미생물2. 실험일시 : 4월 13일(예정)3. 실험이론 : 우리 주변에는 수많은 미생물이 존재 하고 있다 그러므로 우리 주변에 있는 여러 가지 대상물(손수건, 행주, 걸레, 손, 책장)등에 있는 세균을 직접 배양하여 관찰함으로서 미생물의 실체를 확인하고 미생물을 다룰 때의 여러 가지 주의 사항을 터득할 것이다일단 우리 주변에 있는 미생물을 간단히 알아 보도록 하자.① 토양 미생물(Soil microorganism)토양미생물은 토양에 생존하는 미생물로써, 알려져 있는 몇 만종의 미생물 중 대부분이 토양에서 유래합니다. 세균, 방선균, 사상균, 조류, 원생동물 등으로 나뉘며, 여러 항생물질이나, 생산균. 유용효소생산균 등들도 거의 토영에서 유래한다고 볼 수 있다. 토양 미생물은 토양내의 식물 및 미소동물의 유체 등 유기물의 분해에 매우 중요한 역할을 수행한다. 보통 중성, 알칼리성 토양에는 세균이 많고 강산성 토영에는 균류가 우세하다. 대표적 예로는 불완전균류(Deuteromycotina), 털곰팡이목(Mucorales), 질소고정세균(Azotobacter, Azospirillum, Klebsiella, 탈질소세균; Pseudomonas가 있다.
1. 실험제목 : 배지만들기2. 실험일시 : 4월13일 (목) 온도 18℃, 습도 46%3. 실험이론 : 미생물이 생존하기 위해서는 몇 가지 필수적인 요소가 있는데, 온도, PH, 삼투압, 호·혐기, 영양분 등이 잇다. 따라서 실험실에서 인위적으로 미생물을 배양하고자 할 때는 이 조건들을 다 갖추어주어야 하는데 영양분을 제공해 주는 것이 바로 배지이다. 배지라는 것은 미생물 배양을 위해서 만드는 것이다. 배지를 만들고 그 위에 도말을 함으로써 도말방법도 익힐 수 있는 실험이다. 미생물이 자라려면 먹이가 필ㅇ한데 배지가 바로 그런 역할을 하게 되는 것이다. 도말이라는 것도 먹이에 균체를 깔아 줌으로써 먹고 자랄 수 있게 해주는 것을 말한다. 이러한 간단한 원리를 알고 실험에 임하면 좋겠다.배지는 이용되는 재료, 사용 형태, 사용 목적 등에 따라 분류 할 수 있다. 재료에 따라 분 류된 배지의 종류를 간단히 나열해 보도록 하겠습니다.ⓐ 천연배지 : 배지 재료가 천연물로서 그 화학 조성이 확실히 알려져 있지 않은 배지다. 미생물의 정확한 생육소를 모를 때, 생육소의 요구량이 많을 때 사용한다. Oat meal 배지, 볏짚 배지, Nutrient broth 배지 등이 있다.㉮ 육즙 및 대용 육즙 : 일반 세균에 많이 사용한다. 육즙은 수육의 침출액을 농축한 것이기 때문에 육중의 가용성 질소화합물과 비타민 등의 생육촉진 인자, 무기염류가 풍부하여 미생물의 배양에 광범위한 세균 배양에 사용되고 있다.㉯ 효모즙 (Yeast extract) : 아미노산, 비타민류, 무기염류를 풍부하게 함유하고 미생물 배양에 광범위하게 사용한다.㉰ 맥주 : 초산균, 유산균, 산막효모 등의 배양에 이용한다.ⓑ 합성배지 : 화학 조성이 알려져 있는 재료만으로 만들어진 배지로서 Czapek- Dox 배지 등이 있다ⓒ 반합성배지 : 합성배지의 성분의 일부를 peptone, Yeast extract 등 화학 조성이 밝혀지지 않은 천연물로 바꾸어 놓은 배지이다.2) 사용형태의 의한 분류1. 고체배지 :분리 배양, 집락의 관찰, 용혈능 관찰 등에 이용된다.㉯ 고층 배지(Butt media)시험관을 세운 배지를 굳힌 것으로 주로 세균의 성상 검사, 통성 혐기성 세균의 보존, 세균의 운동성 검사 등에 이용된다.㉰ 사면 배지(Slant media)시험관에 배지가 약 45도 경사가 되도록 굳힌 것으로 호기성 미생물의 증식, 보존 등에 주 로 쓰인다.4. 실험기구 및 재료- BBL Trypticase Soy Broth(Soybean-Casein Digest Broth)- 증류수- 전자거울- 교반기- 전자레인지- Autoclave- Waterbate- Clean bench- 인큐베이터- 시험관- 삼각 플라스크- 마그네틱 스틱- 멸균 테이프- 패트리 디쉬- 알콤 램프 -사용된 agar-- 백금이- Natural media(천연배지) - Milk, Lemon즙, 각종식품- Artifical media(합성배지) - Mixture of chemicals- Carbohydrates : glucose, galactose 등- Proteins : amino acids, peptides- Lipid : fatty acid- Minerals : Nacl- Vitamins5. 실험방법① 고체배지a. MRS Broth 16.5g Agar powder 4.5g을 삼각플라스크에 넣고 증류수를 넣어 300ml을 만든 후 자석교반기에 올려 끓을 때까지 가열하면서 교반한다.b. 만들어진 배지를 잘 봉한 다음 autoclave에 15분 돌린다.c. 클린벤치 안에서 페트리디쉬에 배지를 얇게 깐 후 굳힌다.d. 캡튜드에 배지를 1/3~2/5정도 채운다음 1개는 세워서 굳혀 고층배지를 만들고 1개는 눕혀서 굳혀 사면배지를 만든다.② 액체배지a. MRS Broth 5.5g을 삼각플라스크에 넣고 증류수를 넣어 100ml를 만든 다음 잘 흔들어 준다.b. 만들어진 배지를 잘 봉한다음 autoclave에 15분 돌린다.액체배지에 피펫으로 균 1ml을 취하여 접종한다.①평판배양a. 백금이를 소독한 후 식힌다. , 박성기외 5명, 신광문화사1. 실험제목 : 공중낙하균 측정하기2. 실험일시 : 4월13일 (목) 온도 18℃, 습도 46%3. 실험이론 : 대기 중에는 여러 가지 미생물이 먼지와 함께 부유하고 있다. 이러한 먼지와 미생물은 물이나 환경에 오염을 일으키고 그 미생물이 병원체일 경우 질병의 원인이 될 수 있습니다. 따라서 대기 중에 존재하는 세균이나 진균의 종류 및 그 수치를 측정함으로써 미생물에 의한 대기 외 오염을 알 수 있으며, 대기 중에서 존재하는 미생물이 어떠한 미생물의 분포를 이루는지 알 수 있는 것입니다. 미생물을 측정하는 방법 중에서 지면으로 낙하하는 미생물을 계수하는 방법은 그 실험방법이 간단하고 측정이 쉽기 때문에 널리 쓰이고 있는 방법입니다. 따라서 미생물을 측정하는 방법 중 쉬운 공중낙하균 측정을 통해서 우리가 살아가고 있는 대기 중에 어떤 미생물이 살고 있는지 측정할 수 있는 것입니다.4. 준비물- Incubator- 미생물 집락 계수기(Colony counter)- NA(Nutrient Agar)배지- PDA(Potato Dextrose Agar) 배지- Slide glass- Cover glass- 메틸렌블루- 바셀린5. 실험방법1. LURIA ? Bertani media (LB 배지)- Tryptone : 5 gram- Yeast Extract : 2.5 gram- NaCl : 5 gram- Bacto-Agar : 10 gram- Total ddH₂ : 500 ml2. Potato Dextrose Agar 배지(PDA 배지)- 감자 200 gram을 증류수 1,000ml에 넣고 30분간 끓인다.- 증발된 물의 양만큼 물을 채워 1,000 ml을 만든다.- Dextrose 20 gram을 첨가한다.- Agar 20 gram을 첨가한다.- 증류수 1,000 ml을 첨가한다.3. 제조된 배지를 멸균한 후 clean bench에서 petri-dish에 planting4. LB 배지와 PDA 배지를 실험 장소인 3층 복도, 식당에서 뚜껑을 도록 하기 위해서 Naming을 한다-6. 실험결과- 식당에서는 2개의 미생물이 발견 되었습니다 -- 2층로비에서는 0개의 미생물이 발견 되었습니다-실험장소미생물 수식당22층로비07. 고찰우리 조는 공중낙하균을 측정하는 장소로 2층로비와 식당을 선택하여 공중낙하균을 실험을 실시 하였다. 위에서 나온 표와 같이 결과로는 식당에서는 2개의 미생물이 발견되었고 그리고 2층로비에서는 0개의 미생물이 발견 되었다. 개인적인 생각으로는 요즘 미세먼지와 황사 같은 대기 오염에 관한 영향을 우리나라가 많이 받기 때문에 대기 중에 떠다니는 미생물이 굉장히 많은 거 같았는데 결과는 생각과는 다르게 미생물의 수는 매우 적게 나왔다. 미생물이 적게 관찰 된 이유로는 식당과 2층로비 둘 공간 다 실외공간이 아니라 실내공간에서 측정해서 그랬다고 생각이 된다. 아마 2층로비와 식당과는 다르게 실외공간에서 공중낙하균을 실시 했으면 요즘과 같이 미세먼지가 심한 날씨에는 미생물이 아주 많이 관찰 될 것이라고 생각된다. 그리고 2층로비와 식당에 미생물이 많이 발견 되지 않은 것은 2층로비와 식다의 위생상태가 좋다고 판단 될 수 있겠다.8. 참고문헌- 미생물학 실험 , 월드사이언스- 미생물학 실험서 김종협 외 2명, 대광문화사- 최신 미생물학 박석기 외 5명, 신광문화사- 미생물의 생물학 Brock, Madigan, Prentice-Hall1. 실험제목 : 우리주변의 미생물2. 실험일시 : 4월13일 (목) 온도 18℃, 습도 46%3. 실험이론 : 우리 주변에는 수많은 미생물이 존재 하고 있다 그러므로 우리 주변에 있는 여러 가지 대상물(손수건, 행주, 걸레, 손, 책장)등에 있는 세균을 직접 배양하여 관찰함으로서 미생물의 실체를 확인하고 미생물을 다룰 때의 여러 가지 주의 사항을 터득할 것이다일단 우리 주변에 있는 미생물을 간단히 알아 보도록 하자.① 토양 미생물(Soil microorganism)토양미생물은 토양에 생존하는 미생물로써, 알려져 있는 몇 만종의 미생물 중 대부분이 토양에서 유microorganisms)수중에서 생활하는 미생물로써 대게 녹조, 규조, 날조, 광합성세균, 화학합성 무기영양세균, 유기영양세균, 원생생물 등이 많이 발견된다. 물이 빈영양에서 부영양화 상태가 되는 것도 다 미생물의 활동으로 인하여 진행되는 것이다. 수중미생물 중 특히 해양미생물은 대체로 호염성이며 바다의 물질순환에 상응하는 종류가 있다. 대표적 예로는 Pseudomonas, Chromo-bacterium, Flavobacterium, Micrococus, Proteus 대장균, Streptococcus faecalls, 웰치균, beggiatoa, 황산염 환원세균 등이 있다.4. 준비물- Nutrient Agar 평판배지- alcohol lamp- Slide glass- Cover glass- 현미경- Gram 염색약※ 실험상의 유의점미생물을 다룰 때의 유의사항을 철저히 주의시켜야 하며, 일단 배양된 미생물도 세심하게 다루도록 하여야 한다. 실험 용구의 사용 전, 후 멸균을 소홀히 하지 않도록 하자.5. 실험방법우리 주변 미생물을 측정하는 것은 공중낙하균 측정을 통해서 할 것이므로 실험방법은 공중 낙하균의 방법과 동일하다고 볼 수 있습니다.- 식당 , 3층 복도에서 15분간 배지 놓아두기6. 실험결과- 머리끈 ? 미생물 발견 개수 0- 열쇠 ? 미생물 발견 개수 8- 손가락 ? 미생물 발견 개수 73- 이어폰 ? 미생물 발견 개수 45- 전체 미생물 발견 된 것을 표를 정리하며 다음과 같다.용품미생물 발견 수머리끈0열쇠8손가락73이어폰457. 고찰우리 조는 주변에 관찰 되는 미생물을 측정하기 위해서 머리끈, 열쇠, 손가락, 이어폰 등을 사용해서 주변에 있는 미생물을 관찰해 보았다.위에 표에서 보이는 것처럼 머리끈에서는 0개 열쇠에서는 8개 손가락에서는 73개 이어폰에서는 45개의 미생물이 발견 되었다.이것을 보고 좀 의아한 것이 있었다. 머리끈이 머리를 자주 묶는 사람이면 장시간 머리끈이 머리에 접촉해 있어서 미생물이 많을 것이라고 생각을 했다. 왜냐하면 .