< 데미안 독후감 >목차0. 내용 요약1. 서론작품 소개와 배경작가 헤르만 헤세 소개2. 데미안의 성장과정주인공 데미안의 캐릭터 소개청년기의 내면 갈망과 동경3. 내면의 갈등과 탐색데미안의 사회와의 갈등예술과 우정을 통한 자아탐구의 시작4. 유혹과의 싸움과 깨달음데미안의 세속적 유혹과 갈등내면의 깊은 고뇌와 탐색5. 성장과 진리의 발견데미안의 자아 탐구와 내면의 성장진리를 향한 여정과 그에 대한 깨달음6. 현대 사회와의 연결작품의 주제와 현대 사회의 공감점데미안의 이야기와 현대 독자들의 고민7. 결론과 메시지작품이 전달하는 메시지와 의미독자들에게 남기고 싶은 메시지와 용기 부여내용 요약데미안은 평범한 도시에서 자라는 젊은 청년으로, 내면에서 다른 감정과 갈망을 느끼고 있습니다. 그는 예술과 음악, 우정을 통해 자아를 발견하려는 갈망을 품고 있습니다. 그의 내면은 언제나 더 큰 의미와 탐구로 가득 차 있어 일상에서 벗어나 자아의 깊은 곳을 찾고자 합니다.데미안은 친구 게르트와 함께 자주 모여 철학적인 대화를 나누며 세상의 의미와 인생의 목적을 고민합니다. 게르트의 현실적인 시각과 사이볼드의 깊은 내면 탐구와의 상반된 영향을 받으면서 자신만의 길을 찾아가는 과정에서 성장하게 됩니다.데미안은 사이볼드와의 교류를 통해 새로운 시야를 얻게 되며 이상과 현실 사이에서 갈등하게 됩니다. 그의 영감적인 이야기와 철학적인 생각은 데미안에게 새로운 시야를 제공하며, 함께하면서 내면의 성장과 깨달음을 추구합니다.그러나 데미안은 세속적인 유혹과도 마주하게 됩니다. 여성 소피와의 만남을 통해 데미안은 세상의 유혹과 미묘한 갈등을 경험하며 더 큰 깨달음을 얻게 됩니다. 소피는 그의 내면에서 새로운 차원을 열어주는 역할을 하며, 데미안은 그녀를 통해 내면의 진리와 의미를 발견하고자 합니다.데미안의 여정은 세계와의 갈등과 내면의 탐구, 성장과 깨달음을 거쳐 완성됩니다. 작품은 데미안의 이야기를 통해 우리에게 인생의 의미와 자아 발견의 중요성을 고찰하게 하며, 데미안의 여정을 통해 자아를 이해하고 받아들이며 성장하는 과정에 대한 메시지를 전달합니다.서론헤르만 헤세의 '데미안'은 내면 성장과 자아탐구를 다룬 작품으로, 주인공 데미안의 내면 세계와 성장 과정을 통해 현대 사회의 문제와 개인의 성장에 대한 심도 있는 논의를 제시합니다. 작품은 독자들에게 데미안의 여정을 통해 우리가 자아를 찾는 과정에서 어떤 고민과 힘든 결정을 하는지에 대해 생각해보게 합니다.데미안의 성장과정데미안은 작품 초반에는 다른 사람들과는 조금 다른 감정과 동경을 가지면서 성장합니다. 그는 예술과 음악, 우정을 통해 내면을 탐구하고 자아를 발견하려는 노력을 시작합니다. 이는 데미안의 성장의 출발점으로, 독자들에게 자아 발견과 성장의 중요성을 알리는 열쇠입니다.내면의 갈등과 탐색작품은 데미안이 내면의 갈등을 경험하며 어떻게 성장해 나가는지를 다양한 측면에서 묘사합니다. 데미안은 자기 자신을 이해하려는 욕망과 사회적인 기대와의 갈등을 경험하며 어려움을 겪습니다. 이런 내면의 갈등은 현대 사회에서도 끊임없이 다가오는 주제이며, 데미안의 고민과 선택은 독자들에게 큰 공감과 고찰을 불러일으킵니다.유혹과의 싸움과 깨달음데미안은 세속적인 유혹과도 마주칩니다. 이는 그의 내면적인 갈등을 더욱 풀어내며, 데미안이 진정한 자아를 발견하고 성장해 나가는 과정을 풍부하게 그려냅니다. 그의 고민과 유혹 속에서의 갈등은 독자들에게 인생의 복잡함과 선택의 어려움을 생생하게 전달합니다.성장과 진리의 발견데미안은 어려움을 무릅쓰며 자아를 탐구하고 진리를 찾아가는 여정을 이어갑니다. 그의 성장은 데미안의 내면의 깊은 고뇌와 탐색을 통해 더욱 풍부하게 묘사됩니다. 작품은 데미안이 자신만의 진리를 찾아가는 과정에서 무엇이 중요한지를 독자들에게 묻고 있습니다.현대 사회와의 연결작품은 데미안의 여정을 현대 사회와 연결시켜 봅니다. 데미안의 갈등과 고민은 현대 사회에서도 여전히 유효한 주제입니다. 작품은 데미안의 경험을 통해 현대 사회의 가치와 규범을 도전하고, 독자들에게 더 나은 방향으로 나아가는데 대한 고민을 유발합니다.결론과 메시지'데미안'은 데미안의 성장과 자아탐구를 통해 현대 사회의 문제와 개인의 성장에 대한 심도 있는 메시지를 전달합니다. 데미안의 이야기는 우리에게 자아를 이해하고 받아들이며, 더 나은 방향으로 나아가는 용기와 희망을 줍니다. 작품은 데미안의 여정을 통해 우리에게 어떻게 하면 자아를 발견하고 풍요로운 삶을 살아갈 수 있는지를 깊이 생각해보게 하는 소중한 계기를 제공합니다.마무리'데미안'은 주인공의 내면 성장과 탐구를 통해 우리에게 삶의 의미와 자아 발견의 중요성에 대해 다시 한번 생각해보게 하는 작품입니다. 데미안의 여정은 우리 모두에게 자아탐구와 성장의 과정에 대한 깊은 고민을 유발하며, 그의 이야기를 통해 우리도 더 나은 삶을 위한 영감을 얻을 수 있을 것입니다.
실 험 보 고 서학과: 학번: 학년: 이름:실험일자실험실(호)담당교수평가2019. 11. 26C3-0223실험제목: 지질의 정량 - 산분해법1. 원리 및 목적식품 중의 지질이란 물에는 녹지 않으나, ether, acetone, alcohol, chloroform, 사염화탄소(CCl)등의 유기용매에 용해하는 일군의 화합물입니다. 이를 정량하기 위하여는 건조된 시료를 유기용매, 특히 ether로 추출하고 그 추출액으로부터 ether만을 증발시킨 잔유물의 중량을 칭량하여 지방량으로 합니다. 그러나 ether에 추출된 것 중에는 순수한 중성지방 외에도 lecithin과 같은 인지질, chlorophyll, carotenoid 등과 같은 색소, 비타민 A, D 등도 함유되기 때문에, 이 방법으로 측정된 값은 중성지방만을 나타낸 것이 아니므로 조지방(粗脂肪, crude fat) 또는 ether 추출물(ether extract)이라고 한다. 가장 널리 사용되어지고 있는 이 ether에 의하여 추출하는 방법을 Soxhlet 법이라고 하는데, 복합지질의 경우는 Soxhlet법으로는 전지방이 추출되어지지 않기 때문에 다른 방법을 이용합니다. 즉 곡류, 서류, 전분류, 버섯류 등과 같이 지질이 조직성분과 강하게 결합하여 ether로 추출되지 않는 부분이 많을 경우는 미리 산성하에서 분해를 하여 유리시켜서 정량하는 방법인 산분해법이 이용되어지고 있습니다.지질(%)= {W _{1} -W _{0}} over {S} TIMES 100##W _{0} :`수기의`항량(g)#W _{1} :`지질`추출후의`수기의`중량(g)#S:`시료`채취량(g)2. 재료 및 시약- 염산(HCl 수용액)- ethyl ether- 석유 ether- ethyl alcohol- 증류수- 시료(프림, coffee whitener)- mojonier tube- 전기정온건조기(dry oven)- desiccator- beaker- pipette- 인덕션- 여과지3. 실험 방법① 지방수기로 사용할 비커를 항량합니다.ⅰ)ⅱ)② ⅰ) 250ml 비커에 시료 3g + 증류수 6ml를 넣고 충분히 혼화시킵니다.ⅱ) 250ml 비커에 시료 3g + ethyl alcohol 2ml를 넣고 충분히 혼화시킵니다.ⅰ)ⅱ)③ 염산 10ml를 ?의 비커의 시료에 가하고 혼화시킨 후 70~80℃에서 30~40분간 산분해 후 실온에서 방냉합니다.※ 염산: 35% HCl 25ml + 증류수 11mlⅰ)ⅱ)④ 산분해한 시료를 ether 25ml로 완전히 mojonier tube로 이행시킵니다.⑤ mojonier tube의 뚜껑을 닫고 30초간 격렬히 흔들어 혼합한 후 정치시킵니다.※ 혼합시키는 중에 때때로 뚜껑을 열어 배기시킵니다.※ 이 조작으로 지질은 ether층으로 이행됩니다.ⅰ)ⅱ)⑥ 석유 ether 25ml를 가하고 ⑤와같이 조작하여 ether층이 투명해질 때까지 정치합니다.⑦ mojonier tube를 조심스레 기울여 ether층만을 여과지로 여과하면서 ①에서 항량한 비커로 이행시켜줍니다.⑧ mojonier tube에 ether 10ml 와 석유ether 10ml를 가하고 ⑦에서처럼 ether층만을 분리, 여과합니다.⑨ ⑧의 과정을 4회 반복합니다.ⅰ)ⅱ)⑩ 여과한 것을 60~70℃로 끓여 수기(비커)내의 ether를 제거합니다.⑪ ether를 제거한 후 dry oven에 항량을 구해줍니다.ⅰ)ⅱ)4. 결과 및 고찰ⅰ)ⅱ)수기의 항량(g)54.8960.44지질 추출후의 수기의 중량(g)5561.22시료 채취량(g)33지질(%)3.6626ⅰ의 결과는 ?과정에서 물을 넣은 것이고 ⅱ의 결과는 ?과정에서 alcohol을 넣은 것입니다. 프림(프리마)의 조지방량이 약 40%인 것과는 많은 차이의 실험결과를 얻었습니다. 식품공전 일반실험법을 후에 참고하였는데 mojonier tube에 남은 액을 세척하여 추출하는 과정을 생략한 것을 알았습니다. ⅰ과 ⅱ의 실험값 차이의 이유는 시료에 증류수를 사용한 것은 알코올에 비해 시료가 제대로 녹지 않은 것으로 추측됩니다. 그리고 비커에 시료가 굳은 것을 제대로 세척하여 정확히 측정하지 못한 점 또한 실험값에 영향을 주었을 것으로 추측됩니다. 실험 중에 남은 액에 조지방이 들어 있을 것으로 예상되어 ether를 더 추가하여 전부 조지방량 측정에 대해 사용하려 하였으나 초반 작성한 예비 실험 보고서를 따라 그 과정을 생략하였습니다. 이번 실험을 통해 실험 과정 중 의문점이 들면 반드시 제대로 숙지하여 다시 작성하고 진행해야 한다는 점을 얻었습니다.
실 험 보 고 서학과: 학번: 학년: 이름:실험일자실험실(호)담당교수평가실험제목: 과산화물가(peroxide value, POV)의 측정1. 원리 및 목적과산화물가(peroxide value, POV)는 유지 중에 존재하는 과산화물의 함량을 측정하는 것으로 유지 1kg에 함유된 과산화물의 밀리몰 수 또는 밀리 당량수로써 표시합니다. 이 방법은 유지 중에 존재하는 과산화물의 함량을 측정함으로써 유지의 산패정도의 검출이나 유도기간을 측정할 수 있습니다. 산화정도를 측정하고자 하는 유지에 아세트산과 클로로포름 혼합액의 용매에 용해시킨 후 포화 요오드화칼륨(KI)을 첨가하여 형성되는 요오드 이온(I ^{``-})을 유지 중의 과산화물과 반응시켜 요오드(I _{2})로 산화시킵니다. 이때 생성된 요오드를 티오황산나트륨(sodium thiosulfate,Na _{2} S _{2} O _{3}) 용액으로 적정하여 소비량으로부터 과산화물의 함량을 구할 수 있습니다.ROOH`+`2I ^{`-} `+`2H ^{`+} ``````` -> ``````ROH``+`I _{2} `+`H _{2} O#(과산화물)#I _{2} `+`2Na _{2} S _{2} O _{3} ```````` -> `````2NaI``+``NaI``+`Na _{2} S _{4} O _{6}※ 계산 => 시료 1kg에 대한 mg 당량수로 표시.과산화물가= {(S-B) TIMES F} over {시료채취량(g)} TIMES 10S: 시료의 0.01NNa _{2} S _{2} O _{3} 사용량(ml)B: 공시험의 0.01NNa _{2} S _{2} O _{3} 사용량(ml)F: 0.01NNa _{2} S _{2} O _{3}의 역가(factor)일반적으로 식물성 유지는 과산화물가가 60~100 meq/kg에 도달하는 데 소요되는 시간을 유도기간으로 하고 있으며 동물성 유지에서는 과산화물가가 20~40meq/kg에 도달하는데 소요되는 시간을 유도기간으로 하고 있습니다.이 방법은 재현성이 우수하고 쉽게 측정할 수 있기 때문에 유도기간 측정에 많이 사용되지만, 생성되는 hydroperoxide가 산패가 진행됨에 따라 카르보닐 화합물로 변화되기 때문에 과산화물가는 최고값에 도달 한 후 감소하므로 산패된 유지일지라도 과산화물가가 낮게 나올 수 있다는 단점을 가지고 있습니다. 따라서 다른 화학적 방법과 함께 측정함으로써 보다 신뢰성을 가진 결과를 얻을 수 있습니다.※ 유지의 자동산화 mechanism? 초기반응: 유지분자 또는 불순물들이 가열, 빛, 산소 등에 의해 활성화되어 자유라디칼(free radical)이 형성됩니다.RH -> R? + H?(free radical)? 연쇄반응: free radical이 산소와 결합하여 peroxide radical을 형성하고 peroxide radical은 다른 유지분자의 수소를 받아 과산화물(hydroperoxide)를 형성합니다.R? +O _{2} -> ROO? (peroxide radical)ROO? + RH -> ROOH + R?(hydroperoxide)? ?? ?? ?(계속해서 radical이 생기는 연쇄반응이 지속)? Hydroperoxide 분해반응: 생성된 과산화물은 다시 알데하이드, 케톤, 알코올로 분해되어 산패를 일으킵니다.ROOH -> RO? + ?OH -> ROH, RCOOH, RCOR’(alcoho) (aldehyde) (ketone)? 종결반응: 연쇄반응 결과 생성된 라디칼들이 서로 중합체를 형성하여 점도나 비중이 증가하게 됩니다.R? + R’? -> R-R’ROO? + R’? -> ROOR’ROO? + R’OO? -> ROOR’ +O _{2}2. 재료 및 시약- chloroform(99.5%)- acetic acid(빙초산)- 포화 KI용액- 1% 전분용액- 0.01N 티오황산나트륨 용액- 콩기름(시료)- beaker- 메스실린더- burette- 깔대기- 스포이드- 삼각 flask- pipette- 스포이드3. 실험 방법? 공전 삼각플라스크에 스포이드로 콩기름(시료)을 취합니다.(그림1)? 메스플라스크에 chloroform과 빙초산 혼합액(2:3) 준비합니다.(그림2)※ 이번 실험에서는 chloroform 120ml와 빙초산 180ml 혼합액을 준비하였습니다.? 시료가 담긴 삼각플라스크 ?에 chloroform과 빙초산 혼합액(2:3) 25ml를 피펫을 사용하여 가하고 진탕 혼합하여 용해합니다.(그림3)? KI용액 1ml를 삼각플라스크에 가하고 진탕 후, 어두운 곳(암소)에 10분간 방치(암반응)합니다.(그림4,5,6)※ KI포화용액은 KI 35g + 증류수 15ml를 혼합 후 여과액을 사용하였습니다.⑤ 암소에서 10분간 방치한 삼각플라스크에 증류수 50ml를 넣고 진탕합니다.(그림7)⑥ 1% 전분용액 1ml를 지시약으로써 첨가합니다.(그림8,9)※ 1% 전분용액은 starch 1g + 증류수 100ml를 혼합하여 끓인 후 사용하였습니다.※ 1% 전분용액 첨가 시 어두운 흑갈색을 나타냅니다.⑦ 0.01N 티오황산나트륨 용액을 뷰렛을 사용하여 적정합니다.(그림10,11,12,13,14)※ 0.01N 티오황산나트륨은Na _{2} S _{2} O _{3}1.25g + 증류수500ml 혼합액을 사용하였습니다.⑧ 혼합용액이 무색을 유지할 경우 이 점을 종말점으로 정하고Na _{2} S _{2} O _{3}의 소비량을 기록합니다.(그림15->16->17 변화과정)적정 전적정 중적정 후 종말점? 공시험에서는 콩기름(시료)를 넣지 않고 동일한 방법으로 진행합니다.(그림18)4. 결과 및 고찰시료 채취량(g)3시료의 0.01NNa _{2} S _{2} O _{3} 사용량(ml)36공시험 사용량(ml)0.4과산화물가(meq/kg)118.6식물성 유지는 과산화물가가 60~100 meq/kg에 도달하면 산패가 일어났음을 알 수 있는데 이번 실험에서 과산화물가가 118.6 meq/kg라는 결과 값을 얻어 실험 전 예상했던 수치보다 훨씬 높게 측정되었습니다. 이를 통해 실험에 사용한 유지의 산패가 많이 일어났음을 알 수 있었습니다. 실험전 과산화물가가 기준치에 못 미쳤다면 산패가 시작되기 전이거나 hydroperoxide 생성곡선에서 감소하는 과정으로 예측했을 것입니다.KI 용액을 가한 후 암소에 방치하는 이유는 과산화물 및 KI는 빛에 의해 분해되기 때문인 것을 이번 실험을 통해 알았습니다. KI가 빛에 의해I _{2}를 생성하여 과산화물이 실제보다 더 많다는 결과가 나올 수 있기 때문입니다. 그래서 실험에서 과산화물가가 118.6 meq/kg으로 높게 측정된 또 하나의 이유로 KI용액을 암소에 넣기 전 빛이 있는 곳에 오랫동안 방치해두어서 실험값이 높게 측정되었을 것으로 추측합니다.
실험 제목미생물 배양실험 날짜실험장소미생물 실험실이름학과학번1. 원리 및 목적미생물을 배양하는데 있어서 목적에 따라 여러 가지 배양방법이 있으며 그 중에서 크게 고체배양과 액체배양으로 구분됩니다.? 고체배양: 종균의 보존, 형태 및 생리의 관찰에 이용.- 사면배양(slant culture, streak culture): 호기성균 배양에 이용되며 백금선으로 종균을 따서 사면 위에 아래쪽에서 위로 가볍게 직선 또는 지그재그로 선을 긋습니다.※ 세균, 효모는 백금이, 곰팡이, 버섯은 백금구를 사용하는 것이 편리.- 천자배양(stab culture): 혐기성균 배양에 이용되며 백금선 끝에 종균을 묻혀 한천고층배지의 시험관 주둥이를 아래로 하여 배지의 표면 중앙에서 내부를 향하여 찌릅니다.- 평판배양(plate culture): 호기성 및 혐기성 미생물 배양에 이용되며 미생물의 증식, 콜로니 분리를 통한 순수분리에 사용됩니다.? 액체배양: 미생물의 생태 및 생리의 관찰, 발효 생산물의 시험, 균체를 대량으로 얻고자 하는 경우 또는 배양액 중에 통기할 필요가 있을 경우 등에 이용됩니다.- 정치배양(stationary culture):호기성균은 배양용기의 크기에 비하여 내부의 배지량은 적게 하고 액층을 얕게 하여 산소공급이 잘 되도록 한다. / Fernbach flask나 Loo flask와 같이 액면이 넓게 되는 용기들이 편리하며 시험관을 사용할 때는 한천사면배지처럼 눕혀서 표면적을 넓게 만드는 것이 효과적이다. / 젖산균이나 낙산균 등의 혐기성균은 액층을 깊게 하고 일단 끓여서 사용하면 특별히 혐기적 상태로 하지 않아도 왕성하게 증식한다. 이 때 종균은 많은 양을 접종하는 것이 좋다.- 진탕배양(shaking culture):호기성균을 보다 활발하게 증식시키기 위하여 액내에 많은 공기가 용해되도록 하는 배양법입니다. / 배지에의 산소용존속도는 진탕기의 회전속도, 진탕방법, 플라스크의 용적에 대한 배지량의 비율, 플라스크의 형태에 따라 달라진다.- Jar fermentor에 의한 통기교반배양실험실에서 대량의 배지에 배양하려면 jar fermentor를 이용하여 통기교반배양을 한다. / Jar fermentor는 미생물의 배양조건을 연구 검토하는데 적합한 장치 / 공업용 발효조와 구조, 통기 및 교반방법이 거의 같으므로 산업적인 생산을 위한 기술적인 자료를 얻는데 이용.? 미생물 운반 기구백금구(白金鉤) : 곰팡이의 포자 채취 및 이식용백금이(白金耳) : 액체, 사면, 평판배지 등의 이식 및 도말용백금선(白金線) : 고층배지 천자용, 곰팡이의 spot 배양용※ 백금이의 끝 부분에는 균체 덩어리가 있는 경우가 있으며, 이것을 바로 가열하면 균체가 주변으로 비산되어 오염될 우려가 있으므로 끝 부분을 속불꽃에서 가열하여 수분을 증발시킨 다음 전체를 바깥 불꽃에서 화염 멸균합니다.? 실험용 기기- 건조기(dry oven)멸균이나 초자기구의 건조에 사용. / 내부온도 150∼160℃에서 1∼2시간 두면 각종 미생물은 사멸. / 페트리접시, 피페트 등은 종이에 싸거나 금속제의 뚜껑이 있는 용기에 넣어서 멸균하고 사용시에 끄집어 낸다. / 멸균은 솜마개나 포장지가 연한 밤색으로 타는 정도로 충분하다.- 항온기(incubator, thermostat)미생물을 일정한 온도로 유지하여 배양하는 상자, 부란기라고도 한다. / 실온부터 60℃ 사이의 일정한 온도로 조절 유지. / 실온보다 저온으로도 온도조절이 가능한 냉각장치가 있는 저온항온기도 있다.- 항온수조(water bath)한천배지의 용융상태 유지, 효소반응 등 미생물생리시험, 미생물 배양 등에 사용 / 전열에 의해 물을 일정한 온도로 유지. / 효소반응이나 미생물 배양을 촉진하기 위해 일정한 속도로 진탕 할 수 있는 진탕항온수조도 있다.- 고압증기멸균기(autoclave)고압증기로 100℃ 이상 온도를 올려 내열성 포자도 사멸시킬 수 있는 고압에 견디도록 견고하게 만들어진 철제의 솥.※ 고압증기 멸균기의 취급법1) 고압증기멸균기 아래 부분에 물이 있는가를 확인한다.2) 멸균하려는 배지가 든 용기를 알미늄박 등으로 씌우고 금속제 망에 넣어서 고압증기멸균기에 넣는다. 뚜껑을 잘 잠그고 배기밸브를 연 다음 온도를 121℃로 맞추고 전원스위치를 ON 한다.3) 내부의 물이 끓어 온도가 100℃에 도달하면 배기밸브를 닫고 타임스위치를 목적으로 하는 시간(약 15∼20분)으로 맞춘다.4) 시간이 되어 전원스위치가 OFF 된 다음 압력계가 0을 나타낼 때까지 기다린다. 압력이 내려갈 때는 절대로 뚜껑을 열어서는 안된다.(수증기의 분출, 용기 마개의 이탈 등의 위험이 있음)(5) Clean bench: 무균의 실험대 역할을 하는 곳? 배양장치- 항온기(incubator, thermostat)미생물을 일정한 온도로 유지하여 배양하는 상자, 부란기라고도 한다. / 실온부터 60℃ 사이의 일정한 온도로 조절 유지. / 실온보다 저온으로도 온도조절이 가능한 냉각장치가 있는 저온항온기도 있다.- 진탕배양기(shaking incubator)호기적인 배양에 이용되며 회전식 진탕배양기(rotary shaker, 150∼300rpm)와 왕복식 진탕배양기(reciprocating shaker, 120∼140rpm)로 구분. / 배양용기를 진탕대 위에 고정시켜 진탕하면 배양액은 교반되면서 공기가 잘 섞이게 된다. / 진탕에 의해서 솜마개가 배양액에 젖어서 공기 등의 기체가 잘 통과할 수 없게 되고 잡균이 오염되기 쉬우므로 주의하여야 한다. / 회전식에는 삼각플라스크, 왕복식에는 Sakaguchi 플라스크 사용.(3) Jar fermentor소형 발효조, 통기교반하면서 미생물을 배양하는 장치 / 진탕배양기보다 대량으로 배양할 때 사용 / 발효조(jar)는 내부를 쉽게 볼 수 있도록 원통 유리로 된 것이 많다.
실험 제목배지 조제실험 날짜실험장소미생물 실험실이름학과바이오융합(식품전공)학번1. 원리 및 목적생물계는 ?고세균, ?진정세균 그리고 ?진핵생물로서 세 가지 영역으로 나눠집니다. 이들 중에서 고세균, 진정세균, 진핵생물의 효모, 곰팡이, 버섯, 조류 등을 일반적으로 미생물이라고 합니다. 미생물을 실험에 이용하기 위해 인위적으로 증식하는 것을 ‘배양‘이라고 하며 미생물을 배양하기 위해서는 최적의 환경과 최적의 배지가 필요합니다. 최적의 환경이란 pH, 온도 그리고 산소의 양 등을 뜻하며 최적의 배지란 미생물의 증식을 위한 영양분의 조성을 뜻합니다.■ 배지(culture medium)의 특징 및 사용방법- 미생물이 필요로 하는 각종 영양소를 골고루 함유하는 물질- 미생물의 영양소에는 탄소원, 질소원, 비타민류, 무기염 등※ 단백질과 탄수화물의 경우 미생물들이 효소를 이용하여 쪼개 사용하지만지방은 영양분으로서 이용하지 않음.- 미생물의 종류와 성질에 따라 사용하는 배지의 조성은 각각 다름- 곰팡이와 효모용 배지는 pH 5.0~6.0, 세균용 배지는 pH 7.0~8.0으로 조절- 조제된 배지는 건조나 변질을 막기 위하여 항상 빛이 들지 않는 찬 곳에 보존- 미생물은 생리적 성질과 이용 목적에 알맞은 조건에서 배양또한 배지는 조성과 상태에 따라 두 가지로 구분이 됩니다.■ 배지 성분- 천연배지(natural medium): 배지 중의 영양분이 모두 천연물인 동식물체에서 얻어진 것으로 만든 배지의 화학조성이 복잡하고 명확하지 않음.ex. Nutrient Broth(NB) => beef extract(소고기 추출물), peptone(단백질 가수분해물)- 합성배지(synthetic medium): 모든 영양분의 화학조성이 명확한 것으로 만든 배지로서 미생물 영양 요구성 검토, 미생물 정량법(bioassay) 등에 사용- 반합성배지(semi-synthetic medium): 천연배지와 합성배지의 중간■ 물리적 성상- 액체배지(liquid medium): 미생물 생리실험, 대사산물 생산, 균체세포 생산 등의 목적에 사용- 고체배지(solid medium): 미생물의 보존 및 증식(colony 형성)에 사용하며, 액체배지에 한천(2%, agar), gelatine 등의 고화제를 첨가하여 응고시킨 것으로서 멸균 후 냉각, 고화시킬 때 사용목적에 따라 사면배지, 고층배지, 평판배지 등으로 만듦.NU trientBroth(NB)+Agar2%```` -> ```NB2A(solid)※ 한천(agar)은 주로 1.5~2.0% 사용/ 한천(agar)의 용해되는 온도: 95~100℃/ 멸균시 autoclave에서 121℃, 15분/ 한천은 40℃ 이하에서 굳으므로 water bath에서 45℃? 사면배지(slant): 호기성세균의 배양 및 보존(2~6달)에 사용? 고층배지(stab): 젖산균 등의 미호기성균(혐기성균)의 천자배양(stab culture), 성상검사, 통성혐기성 세균의 보존,세균의 운동성 검사에 사용? 평판배지(plate): 호기섬, 통성혐기성 미생물 colony를 형성시켜 미생물의 분리배양, 집락의 관찰 등에 이용 / 보존(1~2주)■ 사용목적- 증식배지(growth medium): 여러 종류의 영양소를 적당량 함유한 배지로 미생물의 증식, 순수배양, 보존 등 일반적인 배양에 사용.- 증균배지(enrichment medium): 많은 미생물이 혼합된 경우 특정한 균종만을 다른 균종보다 빨리 증식시켜 분리 배양이 쉽게 되도록 한 배지. / 배지 내에 원하는 미생물의 증식을 촉진하는 물질과 원하지 않는 미생물을 억제시키는 물질이 포함.- 선택배지(selective medium): 두 종류 이상의 미생물이 혼합되어 있는 검체에서 원하는 미생물만을 선택적으로 분리 배양하는 데 사용하는 배지로 색소, 중금속, 화학 약품, 항균제 등 원하지 않는 미생물의 증식을 억제하는 물질을 함유.- 감별배지(differential medium): 순수배양된 미생물의 특정한 효소 반응을 정성적으로 확인하여 균종의 감별과 동정을 하기 위한 배지로 감별이 용이하도록 지시약 등의 화학 물질을 첨가.- 수송배지(transport medium)또는 보존배지(preservative medium): 분리 배양하기 전까지 시간이 늦어지거나 검사 재료를 수송할 때 사용하는 배지로 검사 재료 중의 미생물이 너무 많이 증식하거나 사멸되지 않도록 만든 배지.오늘 실험에서는 미생물의 증식을 위한 영양분의 조성 배지들 중 평판배지, 고층배지 그리고 사면배지를 만들어보겠습니다. 다만, 이번 실험에서는 배지가 미리 준비되어 있고 분주만 시행하는 실험이 되겠습니다.2. 재료 및 시약- 70% ethanol- 배지분말- 증류수- petri dish- 알코올램프- test tube- pipette- rack- flask- autoclave- water bath- 저울3. 실험 방법? 70% ethanol을 테이블에 뿌리고 킴테크로 닦아내고 손에도 뿌린 뒤 흡수시켜 소독합니다.? 미생물에 종류, 필요한 양에 따라 배지분말을 저울 등으로 달아 용기에 담고 증류수를 가하여 혼합 후 용해시킵니다.※ 배지분말 통에 1L기준 g수(g/L)가 표기 되어 있으므로 확인 후 사용량에 따라 제조하면 됩니다.? 실리스토퍼를 이용하여 용기 입구를 살짝 막은 뒤 autoclave에서 121℃, 15분 멸균 시킵니다.? 제조할 배지에 네임펜으로 배지이름, 시험날짜, 실험명 등 정보를 기입합니다.※ 평판배지의 경우 plate 뒷면 가장자리에 기입합니다.