분자생명

목차

1. 서 론- 개발 목적

2. 본 론
i. DNA 분리 및 정제
ii. Genomic DNA library
iii. Screening
iv. restriction mapping
v. subcloning
vi. transformation
vii. 유전자 발현 방법
viii. 재조합 E. coli 와 재조합 Saccharomyces cerevisiae 비교

3. 결 론

본문내용

화석연료의 과도한 소비에 따른 지구온난화 및 계속되고 있는 고유가에 따라 세계 각국은 석유를 대체 할 수 있는 새로운 에너지 개발에 앞장서고 있다. 그러한 대체에너지 개발의 일환으로 식물성 바이오매스(biomass) 자원으로부터 에탄올을 생산하기 위한 기술이 다시 주목받고 있다. 이러한 식물성 바이오매스는 태양이 존재하는 한 지구상에서 무한정 생산이 가능한 지속가능한 자원으로서 그 핵심에는 리그노셀룰로스.(lignocellulose)가 있으며 이는 포도당으로 전환이 가능한 셀룰로스(cellulose)를 포함하고 있기 때문이다. 셀룰로스는 지구상에서 가장 풍부한 자원으로서 포도당으로 가수분해 될 경우 많은 미생물에 의해 발효 및 생물 공학적 전환이 가능한 기질이기 때문에 대체에너지원으로서 주목받고 있다.
그래서 우리는 바이오매스를 경제적으로 활용하기 위해서 바이오매스의 주성분인 cellulose와 lignocellulose를 가수 분해 시키는 새로운 효소를 찾아 알콜 발효 균주인 효모(yeast)에 형질 전환시켜 새로운 균주를 개발하게 되었다.

(1) Total cell DNA의 분리

: 다음 4 단계 과정을 거쳐 배양물로부터 total DNA를 분리하였다.

① 세포배양액 - 증식, 수확(원심분리 이용)
② 세포파괴(cell lysis) - 내용물 방출
③ DNA만 분리 - 단백질 제거(페놀 처리), RNA제거(Rnase 처리)
④ DNA 농축 - 2 vol.의 에탄올(EtOH) 처리

⑵ 세포 추출물의 분리

: DNA 추출하는 모든 과정은 세포질 함유물을 용액으로부터 유리시켜야 한다. 동물이나 식물의 시료는 과정에 들어가기 전에 아주 작은 절편으로 갈아야 한다. 견고한 세포벽을 가지고 있기 때문에 믹서기와 같은 기계로 세포를 파괴하거나, 세포벽 구성성분을 소화할 수 있는 특정 소화효소를 첨가한다. 이어지는 SDS(Sodium Dodecyl Sulphate) 처리는 세포막의 지질 분자를 제거한다.

참고자료

· 없음