Cell Lysis

소개

Mammalian Cell Lysis실험을 수행한 뒤 작성한 실험 보고서.
논문 형식을 따랐으며, 다양한 Lysis 방법을 제시.

목차

Ⅰ. Introduction
Ⅲ. Procedure
Ⅳ. 배경지식
Ⅴ. Data & Results
Ⅴ. Discussion
Ⅵ. References

본문내용

Ⅰ. Introduction
앞선 실험에서 우리는 gene cloning 과정을 습득했다. cloning 한 gene은 그 자체로 이용되기도 하고, 발현시켜 호르몬과 같은 특정한 물질을 만드는데 이용되기도 한다.
이번 실험에서는 특히 mammalian cell을 lysis시켜보고 그 과정에 사용된 각종 생물학적 기법들을 이해하며 ,흡광 분석을 통해 mammalian cell로부터 추출한 protein을 정량해보는데 그 목적을 두었다.

Ⅱ. Materials
-Mammalian cell (293T)
-NETN buffer (NaCl, EDTA, Tris-Cl (pH 8.0), Protease inhibitors (pepstatinA, PMSF, leupeptin, Na3SO4, Aprotinin
-6X SDS
-Ice box
-Spectrophotometer
-1.5mL E-tube
-micro pipette

Ⅲ. Procedure
① NETN buffer를 ice상에서 제조한다. (이 때 buffer 제조에 이용되는 물질의 양은 위의 표1을 따른다.)
② 앞서 제조한 100의 NETN buffer를 imammalian cell pellet이 담긴 tube에 넣어 pellet을 resuspension시킨다. Resuspension이 끝나면 30분간 ice incubation한다.
③spectrophotometer로 595nm에서의 흡광도를 통해 OD값을 측정했다. 농도(c)는 OD값(x)과 다음의 관계식을 만족했다.

참고자료

· - Campbell, Reece, Urry, Cain, Wasserman, Minorsky, Jackson 전상학 역 <<생명과학 8th edition>> 바이오사이언스
· - 정병균 <<진단 분자 생물학>> 현문사
· - 강전아인, 김승호 역 <<단백질 실험노트-상>> 월드사이언스