Cell lysis & Protein assay

소개글

"Cell lysis & Protein assay"에 대한 내용입니다.

목차

1. 서론
2. 재료 및 방법
3. 결과
4. 고찰
5. 참고문헌

본문내용

cell lysis란 세포의 표면막이 기능을 상실하여 세포 내용물이 수중에 분산 또는 용해하는 현상을 말한다. 이 방법은 cell에서 생산되는 protein등의 생산물을 얻어내려고 할 때 많이 쓰이는 방법이다. 세포내의 원하는 생성물을 얻기 위해서는 먼저 세포의 cell membrane을 파쇄 해야 한다. 이때 세포파쇄방법으로는 크게 기계적 방법과 비기계적방법으로 나눌 수 있다. 기계적 방법으로는 sonication, french press, bead milling 등이 있다. Sonication은 초음파분쇄기를 말하며 16 kHz 이상의 음파를 발생시켜 압력의 변동으로 세포벽과 세포막을 파쇄 한다. 초음파 분쇄는 열에 민감한 효소를 변성(denaturation)시키는 경우가 있다. Press(압착기)는 실험실 규모에서 많이 사용되는 스테인리스 스틸로 된 속이 빈 실린더 모양이다. 여기에 세포 덩어리(cell paste)를 채운 후세포를 고압하에서 실린더 바닥에 있는 니들 밸브(needle valve)를 통해 대기압 상태로 압출하면 파쇄 된다. Bead milling은 고속구슬 분쇄기를 이용하는 방법인데 작은 유리 또는 쇠구슬(20 ~ 50mesh)로 채워진 분쇄실(grinding chamber) 형태인 고속구슬 분쇄기 모터에 의해 구동축에 부착된 원판 또는 임펠러를 회전시켜 구슬을 교반하여 높은 전단력(shearing force)과 충격력(impact force)에 의해 분쇄한다. 구슬분쇄기는 압착기 보다 온도조절이 더 잘 된다는 장점이 있다. 비계적인 방법으로는 freezing-thawing과 alkali, organic solvents, detergent 처리 등의 chemical lysis와 lysozyme, gulacanases, chitinase 등을 이용한 enzymatic lysis 등이 있다.

참고 자료

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