Polymerase Chain Reaction

소개

PCR (Polymerase Chain Reaction)의 기본 원리를 이해하여 적은 양의 DNA를 많은 양으로 증폭하고 electrophoresis를 통해 이를 확인하는 실험보고서

목차

1. abstract
2. introduction
3. material & method
4. result
5. discussion
6. reference

본문내용

Abstract
이번 실험은 PCR (Polymerase Chain Reaction)의 기본 원리를 이해하여 적은 양의 DNA를 많은 양으로 증폭하고 electrophoresis를 통해 이를 확인하는 것이었다. Template는 앞 실험에서 얻은 cDNA를 사용하였고 합성재료인 dNTP와 합성을 개시하는 한 쌍의 primer와 polymerase의 활성에 적합한 10X buffer와 부피를 맞추기 위하여 DW를 넣어주었으며 높은 온도에서도 안정한 Taq polymerase를 사용하였다. Cycle은 Denaturation(95℃, 30초), Annealing(55℃, 30초), extension(72℃, 1분)을 한 cycle로 30 cycle을 돌렸다. PCR product를 electrophoresis 한 결과 control인 1kb 와는 다르게 band가 나오지 않았다.

Introduction
PCR은 Polymerase Chain Reaction의 약자로서 DNA polymerase를 이용하여 DNA의 양을 증폭시키는 기술이다. DNA가 평상시에는 Compliment double helix구조로 되어 있다는 것과 열을 가하면 이러한 double helix 구조가 풀려서 single strand DNA가 되며 이 상태에서 냉각시키면 DNA가 다시 double helix를 이룬다는 특성을 이용한 기술이다.
PCR법을 활용하면 DNA가 아주 적은 양이더라도 우리가 원하는 부분을 엄청난 양과 높은 정확도로 크게 늘릴 수 있다. 또한 장비가 단순하여 현재는 책상 위에 놓을 수 있는 장비로도 간단히 사용할 수 있으며 증폭에 걸리는 시간 역시 2시간 정도로 짧다는 장점을 가지고 있어 현대 생물학의 모든 분야에서 가장 중요한 기반 기술로 이용되고 있다. 때문에 PCR법은 현재 생물학에서 쓰이지 않는 곳이 없을 정도로 현대 생물학에서 없어서는 안 될 가장 중요한 기술에 속한다. 근래 과학 수사나 친자 감별 등에 자주 이용되는 DNA fingerprinting 역시 PCR법을 이용해서 이루어진다.

참고자료

· Watson, Molecular biology of the gene, 6th ed, pearson, 2008, pp.127~130
· 지성길, PCR 실험 노트, 월드 사이언스, 2002, pp.12~26
· 심웅섭, 분자생물학, 월드사이언스, 1999, pp.390~392