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식품미생물학 및 실험 / 배양배지와 실험도구의 이해

실험 제목고체배지의 제조실험 날짜2017.09.26.화요일실험 조 및 조원박**실험 원리 및 배경1. 배양 배지배지는 미생물을 인공적으로 배양하기 위한 적당한 영양소를 함유한 액체 또는 고체화시킨 것을 말한다. 미생물의 종류에 따라 배지의 필요한 조성과 영양성분이 다르다. 그러나 가장 중요한 것은 미생물이 발육하고 증식하는 데 필요한 기본적인 영양성분이 필요하다. 이런 기본성분을 모두 갖춘 것이 없기 때문에 일반적으로 천연유기화합물질을 혼합하여 사용한다.그리고 배지의 주요 성분과 배지의 영양·화학적 성상과 물리적 성상 그리고 사용하고자 하는 목적에 따라 분류할 수 있다.1) 배지에 필요한 주요성분(1) 펩톤: 우유, 카제인, 수육 및 대두단백질 등을 펩신, 트립신 등의 단백질 가수분해효소로 분해시켜 아미노산, 펩티드, 포로테아제 등의 가용성 질소화합물이 주성분을 이루고 있다.(2) 육추출물: 쇠고기의 근육부분에서 수용성 물질을 추출시켜 농축하여 만든 것으로 염류, 발육소, 핵산성분, 당분, 아미노산, 비응고성 단백질을 제공한다. 혐기성균의 배지에는 환원물질이 많이 들어있는 간, 뇌, 신장의 추출물이 많이 이용된다.(3) 맥아추출물: 맥아즙은 맥아를 당화시켜 여과시킨 것으로 maltose 등의 당을 많이 포함하고 있다. 이들 성분은 곰팡이와 효모의 배양에 적합하다.(4) 한천: 해조류, 조류 등에서 추출한 탄수화물의 일종이다. 녹는 온도는 100℃이고 1.5~2.0%의 용액은 43~45℃에서 응고되어 탄력성이 있는 고체가 된다. 유기용매에 용해되지 않으며, 한천은 세균의 영양원이라기보다는 배지를 고형화 시키는 중요한 성분이다.(5) 누룩즙: 누룩즙은 맥아즙 대신 널리 사용된다. 1kg의 누룩을 4L의 물에 담가 55~62℃에서 요오드 반응이 사라질 때까지 당화시켜 추출한다.(6) 감자추출물: 감자를 열수 추출물하여 glucose를 첨가한 것으로 곰팡이 및 효모 배양에 적합하다.(7) 효모 추출물: 효모에서 추출한 수용성 추출물로서 담황색 분말이다. 염류, 핵산성이 분명한 것을 합성하여 만든 배지로 미생물의 생화학적 성상검사, 균체 성분 및 미생물의 대사연구에 주로 사용된다.3) 물리적 성상에 따른 분류(1) 액체배지한천이 들어 있지 않는 액상의 배지이며, 이들은 미생물의 증식에 이용되고 세균의 생화학적 검사, 증식, 대사산물을 검출할 목적으로 사용된다.(2) 고체배지배지 내에 Agar성분이 약 1.3~1.5% 함유된 배지로 고체 상태이다.사용목적에 따라 다음과 같이 분류할 수 있다.① 평판배지(Plate media): Petri dish에 약 4mm 두께(15~20ML)정도 넣어 굳힌 것이 평판배지인데 주로 세균의 분리배양, 집락(colony)의 관찰, 용혈능 관찰 등에 이용된다.② 고층배지(Butt media): 시험관을 세운 채로 배지를 굳힌 것으로 반유동배지이며 주로 세균의 성상검사 균주의 보존, 세균의 운동성 등에 이용된다.③ 사면배지(Slant media): 시험관에 배지가 약 45°경사가 되도록 굳힌 것으로 세균의 증식, 보존 등에 쓰인다.④ 반사면배지(Semi-slant media):: 고층배지의 상부 1/2정도를 경사지게 만든 것으로 반고층 배지라고한다. 세균의 생물학적 성상 검사등에 쓰인다.(3) 반고체배지배지 내에 Agar의 농도가 0.3~0.5% 함유도니 배지로 반고체상태를 이룬다. 이 배지는 세균의 운동성 관찰과 세균의 보존 및 수송에 이용된다.4) 사용목적에 따른 분류(1) 증식용 배지: 여러 종류의 영양소를 함유한 배지로서 균종에 대한 선택성은 없다. 미생물의 증식, 순수 배양, 보존 등 특수한 목적이 아닌 일반적인 배양에 주로 사용한다.(2) 강화 배지: 많은 세균이 혼합된 경우 특정한 균종만을 다른 균종보다 빨리 증식시켜 분리 배양이 쉽게 되도록 만든 배지이다. 이런 배지들은 원하는 세균의 증식을 촉진하는 물질과 원하지 않는 세균을 억제시키는 물질이 포함되어 있다.(3) 선택 배지: 두 종 이상의 세균이 혼합되어 있는 검체에서 원하는 세균을 분리하는 데 사용하는 배지이다. 이 배지에는 색종류의 영양성분이 함유되어 있어 대부분의 세균이 잘 증식되는 배지이다. 흔히 일반균 영양배지와 특수균 영양배지로 분리된다.(7) 분리배지: 여러 균이 혼재된 세균으로부터 어떤 목표로 한 균만 순수 배양하려는 고체배지로서 특정 균의 효소반응을 이용하거나 증식억제물질을 첨가하여 사용한다.2. 분석용 전자저울전자저울은 무게를 달리는 물체에 작용하는 중력과 균형을 이루는 전자기 힘을 발생시키며 이에 따라 전류가 흐르게 된다. 이때 발생하는 전류는 무게를 달 물체의 질량에 비례하게 된다. 매우 예민한 전자저울의 경우 정확한 사용을 위해 항상 수평상태를 유지할 수 있도록 수평 확인용 기포로 점검하고 안전한 실험대 위에 올려놓아야 진동에 의한 오차를 최소화 할 수 있다.1) 사용방법(1) 시료의 무게를 달기 위해서는 먼저 저울의 접시 위에 깨끗이 처리된 담는 용기를 올려놓는다.※이때, 무게를 측정하는 동안 저울의 유리창문은 외부 공기흐름에 의한 영향을 방지하기 위하여 닫아주어야 한다.(2) 전자저울의 ‘tare’버튼을 눌러 빈 그릇무게를 ‘0’으로 조정한다.(3) 시료를 용기에 넣고 저울이 보여주는 무게의 수치를 읽는다.2) 주의사항: 분석용 전자저울은 매우 정교하고 예민하므로, 칭량접시 위에 물체를 올려놓을 때는 매우 조심스럽고 천천히 다루어야 하며, 팔이나 손 등에 의해 직접적인 힘이 가해지지 않도록 주의한다. 또한 시료를 직접 저울의 무게달기 접시 위에 올려놓아서는 안 된다. 이는 저울의 부식을 방지하고 무게를 단 시료를 손실 없이 모두 회수할 수 있도록 한다.3. 자기교반기(Magnetic Stirring)자기교반기 또는 자기혼합기는 회전 자기장을 사용하여 매우 신속하게 회전하여 액체를 교반하는 실험실 장치이다. 회전하는 자기장은 회전하는 자석 또는 고정된 전자석 세트에 의해 생성될 수 있으며, 액체와 함께 용기 아래에 배치되게 된다. 이때, 자기교반막대는 유리가 자기장에 상당한 영향을 주지 않기 때문에 화학 반응에 일반적으로 사용되는 유리 용기에서 잘 작동 한다.조?① Window shash: 외부 환경으로부터 클린벤치 내부를 격리시켜 내부에 오염 물질이 유입되지 않도록 하여 무균 상태를 유지시키는 역할을 한다. 실험자가 작업하는 동안은 열린 상태로 사용하지만, 그 외의 시간에는 닫은 상태로 유지시킨다.② ??Fan&Motor 클린벤치의 내부에는 fan과 motor가 존재한다. 외부의 공기를 빨아들인 후 클린벤치 내부를 순환시킨 뒤 작업하는 동안 열려있는 Window shash의 틈을 통하여 공기가 다시 외부로 나가게 하는 역할을 한다. 이로 인하여 외부의 공기가 Window? shash의 틈을 통하여 내부로 유입되지 못하게 된다.③ Pre-Filter: ?1차적으로 공기를 여과시키는 필터이다. 여과되는 Pore size는 HEPA Filter 보다 상대적으로 크다.④ ?HEPA-Filter: Clean bench에서 가장 큰 역할을 가진 장치이다. 1차적으로 여과된 공기를 최종적으로 여과시키는 역할을 한다. Pore size는 보통 0.5~2.0 um로 알려져 있다. 대부분의 먼지들은 이를 통과하지 못하기 때문에 결과적으로 무균 상태의 공기만 내부로 유입되게 된다.⑤ ??Difference Pressure Gauge: Clean bench 내부로 유입될 공기의 양을 조절할 수 있는 장치이다. 내부로 공기가 유입되어 순환함으로써 내부에서는 바람이 불게 되는데, 이 바람을 실험자가 작업하기 알맞게 조절하여 사용할 수 있도록 하는 장치이다.⑥ ?UV lamp&On/Off Switch: Clean bench 내부의 위쪽에는 UV lamp가 존재한다. 이 UV로 멸균이 가능하기 때문에 clean bench 내부를 멸균하고자 고안된 장치이다.?2) Clean bench의 사용방법① Clean bench 사용 전, UV lamp가 켜져 있는 상태이면 UV lamp를 끈다. 또한 내부가 어두울 경우,? clean bench내에 존재하는 형광들을 켜서 내부를 밝게 한 후 사용 한다.② ?Fan을 작동시키고 Pressure-gauge을 소독하고? window shash를 닫는다.⑦ Fan을 끄고, UV lamp를 켜서 내부를 멸균한다.이때, UV lamp 멸균을 15~20 분 정도 진행한 후 UV lamp를 끈다.4. 가압증기살균기(Auto-Clave)가압증기멸균은 가압증기살균기를 이용하여 수증기 아래에서 미생물 또는 배지를 살균하는 장치로서 고온·고압에 변질, 분해되지 않는 모든 배지류나 건열멸균이 곤란한 기구 등의 멸균에 이용되는 멸균법으로 밀폐상태의 가압증기살균기에서 121℃, 1.5㎏/㎠에서 15~20분간 처리한다. 이때 고온에서 파괴되거나 변성을 일으키기 쉬운 성분들은 간헐 멸균을 실시한다.??1) Auto-clave 사용 방법① 뚜껑을? 연후, 멸균할 기구를 넣는다.(이때, ??Auto-clave 내부의 증류수가 부족할 경우 증류수를 추가로 넣는다.)② 뚜껑을 닫는다.③ ?온도, 압력, 시간을 설정한다.④ '시작' 버튼을 누른다.2) Auto-clave 사용시 주의사항① ?휘발성 물질은 Auto-clave를 사용하여 멸균하지 않는다.??Autoclave는 121?℃이상의 고온에서 사용을 하기 때문에 휘발성 물질을 하게 되면 폭발의 위험성이 있다. ?② ?Autoclave를 마친 후, 압력이 떨어지기 전까지 뚜껑을 열지 않는다.③ Autoclave를 사용하여 멸균할 액체는 액체의 부피보다 큰 용기를 사용하여 멸균한다. 이러한 용기는 일반적으로 담을 액체부피보다 4~5배가 큰 부피의 용기를 사용한다.④ ?Autoclave의 수증기 발생을 위한 물은 꼭 증류수를 사용하도록 한다.실험 재료 및 기구삼각플라스크Mess cylinder전자 저울유산지배지용 시약시약스푼증류수Magnetic StirrerMagnetic BarAluminum foil고무줄살균테이프Auto ClaveDry OvenAlcohol lampPetri-dishClean Bench70% Ethanol방열장갑실험 방법1. 고체배지의 제조*고체배지의 제조시 계산식24.6g/1000ml#4.92g/200ml1)배지용 시약을 4분)

자연과학| 2022.10.20| 9페이지| 2,000원| 조회(305)

배양배지, 식품미생물학, 식품미생물학및실험, 식품미생물학실험도구

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식품미생물학 및 실험 / 멸균법의 종류

실험 제목Sterilization실험 날짜2017.09.12.화요일실험 조 및 조원-박**실험 원리 및 배경실험실에서 미생물을 동정하고 생화학적 검사를 하기 위한 세균의 배양은 필수적인데, 이때 미생물은 다양한 종류의 배지에 접종되거나 이식되어 증식하게 된다. 미생물을 접종하거나 이식할 때 원하지 않은 미생물이 증식할 수 있으며, 이것을 ‘Contamination‘이라고 한다. 이러한 오염을 방지하기 위하여 모든 배지와 기구 등은 사용 전에 철저히 멸균 처리되어야 한다.1.멸균법1) 화염멸균(Flame Sterilization): 화염멸균이란 알코올 램프, 토치 또는 분젠 버너 등의 화염을 통해 멸균하는 방법이다. 백금이나 백금선을 멸균하는 데는 먼저 선단을 외염 속으로 비스듬히 집어 넣어 붉게 달아 오를 때 까지 가열한 다음 서서히 손잡이 부분까지 서서히 불꽃에 통과시켜가며 살균한다. 주로 백금이, 백금선 또는 콘라디봉과 같은 접종기구나 시험관 입구, 면전 등을 램프의 불꽃에 직접 접촉하여 멸균하는 방법이다.2) 건열멸균(Dry heat Sterilization): 주로 유리초자 기구의 멸균에 이용되는 방법이다. 멸균하고자 하는 재료를 건조기에 넣어 150~160℃에서 30~60분간 유지한다. 멸균기 내의 온도가 100℃ 이하로 떨어질 때까지 기다려 멸균기의 문을 열어 내용물을 꺼낸다. 건열멸균시 멸균테이프를 이용하면 멸균 효과의 과정은 용이하지만, 솜 마개나 유리기구를 싼 종이의 색이 얇은 갈색으로 변하면 멸균된 상태라고 보아도 된다.고압 증기 멸균법보다 멸균시간은 많이 걸리나, 멸균 후 건조 단계를 생략할 수 있는 장점이 있다.※건열멸균 시 주의사항- 멸균하려는 물체를 건열멸균기에 넣을 때 내벽에 접촉하지 않도록 한다. 특히 종이나 솜마개 같은 것은 벽에 접촉하면 멸균 조작 중에 연소하는 경우가 있으므로 주의한다.- 건조기의 온도는 가급적 200℃ 이상 올리지 않는다.- 건조기의 문은 온도계가 100℃ 이하로 되었을 때 연다. 이보다 높은 온도에서 열면 급격한 온도변화로 인하여 유리기구 등이 파손되기 쉽다- 건조기 상단의 배기구는 휘발성 물질의 폭발 위험성이 있으므로 항상 개방되어 있어야 한다.3) 가압증기멸균(High pressure steam Strerilization): 가압증기멸균은 가압증기살균기를 이용하여 수증기 아래에서 미생물 또는 배지를 살균하는 장치로서 고온·고압에 변질, 분해되지 않는 모든 배지류나 건열멸균이 곤란한 기구 등의 멸균에 이용되는 멸균법으로 밀폐상태의 가압증기살균기에서 121℃, 1.5㎏/㎠에서 15~20분간 처리한다.이때 고온에서 파괴되거나 변성을 일으키기 쉬운 성분들은 간헐 멸균을 실시한다.4) 여과제균(Filtration): 가열에 의하여 영향을 받는 물질을 함유한 용액의 멸균을 하는 경우 사용하는 방법으로 세균의 크기보다 작은 필터를 이용하여 세균을 거르는 조작이다. 여과제균에 사용되는 여과기에는 규조토 여과기의 일종인 베르케필드 여과기, 도자기로 된 챔버랜드 여과기, 석면의 여과관을 가진 사이츠 여과기 등이 있으며 셀룰로오스, 아세테이트 막으로 된 막여과기 등이 있다.5) 화학제를 이용한 멸균(1)에틸렌옥사이드-가스멸균: 증기멸균을 할 수 없는 습기나 열에 약한 물품의 멸균에 사용되는 저온멸균방법이다. 에틸렌옥사이드-가스는 미생물의 단백질과 핵산에 침투하여 미생물을 사멸시킨다. 하지만 에틸렌옥사이드-가스 자체가 인간에 치명적인 영향을 줄 수 있으므로 멸균 후 장시간 동안 공기정화를 시행하여야 한다.(2)β-프로피오락톤 멸균: β-프로피오락톤은 20℃에서 투명한 액체로 온도가 상승하면 기화한다. 보통 냉장고에 보관하며 가연성은 없으나 매우 자극적이어서 피부 접촉 시 몇 분 안에 수포를 형성한다. 그러나 실온에서 쓸 수 있는 장점이 있으며 에틸렌옥사이드와 같은 침투력이 없기 때문에 수술실, 연구실 등의 건물과 기구, 냉장실 등을 훈연법으로 소독할 때 사용할 수 있다.6) 자외선 조사 멸균: 무균작업대의 멸균에 사용되는 대표적인 멸균 방법으로 자외선의 파장에 따라 멸균 정도가 다르다. 가장 살균력이 강항 파장은 260~280nm로 무균작업대 표면에 부착된 곰팡이 및 기타 미생물을 멸균하는 데 이용되며, 공기 중에 있는 미생물을 파괴시킬 목적으로 사용한다. 이때 자외선 전구를 사용할 경우 전구를 직접 보면 눈에 통증이 오거나 결막염 증상을 일으킬 수 있으므로 주의해야 한다.7) 화학적 소독법(1)승홍수: 보통 0.1%의 수용액으로 사용하며 영양 세포들은 수 분 내에 사멸한다. 주로 손 등의 소독에 쓰이며, 금속제와 고무류의 소독에는 쓰이지 않는다.(2)에탄올: 가장 일반적으로 많이 사용되고 있는 소독제로 70%의 수용액이 살균력이 가장 강하고, 미생물 실험 전 손의 소독이나 동물의 주사, 국소소독, 코르크 마개의 소독에 사용된다.(3)페놀 용액: 균체 단백질을 변성시켜 세포를 용해시키는 작용을 하며, 3~5%의 수용액으로 포자의 살균이 가능한 용액이다. 의류나 세균실험을 한 실험대 소독에 사용되며 피부에 흡수되어 지각신경을 마비시키는 작용을 하므로 손의 소독에 적합하지 않다.(4)양성 비누: 양성 비누는 보통 비누와는 반대로(+)로 하전된 계면활성제로서 손, 배양 초자기구, 조리대, 식기, 고무제품 등의 소독에 사용된다.2. 메스실린더1) 눈금 읽는 방법: 액체가 오목하게 들어갔을 때는 오목한 아래의 눈금을 읽고,(3)메스실린더를 안전한 수평진 곳에 놓고 스포이드&피펫으로 용량을 정확히 맞춘다.(4)30cm정도 떨어진 거리에서 액체의 기둥 높이와 같게 눈의 높이를 조절해서 눈금을 읽는다.실험 재료 및 기구Platinum loopAlcohol lampMess cylinderMess flaskEthanolBeaker분무기Test tubePetridishAluminum foilDry oven실험 방법1.Flame Sterilization1)알코올램프에 불을 붙였다2)Platinum Loop를 알코올램프의 불꽃 가운데서 붉은 색을 띌 때까지 가열하였다.2.Dry Heat Sterilization1)멸균할 기구들을 세척한 후 물기를 제거하였다.2)Petridish 3~5개를 알루미늄 호일로 포장하였다2-2)Test-tube 입구를 알루미늄 호일로 덮어씌웠다.※이때, 손 접촉에 의한 오염에 유의하였다.3)160℃ Dry oven에서 1~2시간 동안 멸균하였다.3.Chemical Sterilization(70% Ethanol 수용액 300ml)-70% Ethanol용액 300ml 제조 시Ethanol:300ml*70%=210ml#`증류수`=`90ml1)Ethanol 210ml를 메스실린더로 측정한 후 비커에 옮겨 담았다.2)증류수 90ml를 메스실린더로 측정한 후 1)의 비커에 옮겨 담았다.3)70% Ethanol 수용액 300ml를 분무기에 옮겨 담았다.4)만든 사람, 만든 날짜, 용액의 이름을 라벨링 하였다.결과 및 고찰준비한 Platinum Loop를 화염멸균, Petridish와 Test-tube를 건열멸균 하였다. 또한 화학적 소독에 필요한 70% Ethanol 수용액 300ml를 제조하였다.실험 중 화염멸균시 백금이가 붉게 될 때까지 가열하여 멸균하였는데, 이때 백금이를 태우지 않게 조심하여야 했다. 또한 균이 묻어있는 백금이의 멸균을 할 때 바로 불꽃 바깥쪽에서 멸균시키면 균이 밖으로 튀어 오염될 수 있기에 이에 대비하여 내염부터 접촉한 후 천천히 외염으로 진행하여 멸균한다고 하였다. 다음으로 건열멸균시 기구를 간단히 세척한 후 드라이오븐에 넣어 멸균하였는데, 멸균시간이 오래 걸려서 (드라이오븐이 160℃까지 올라가는 시간 및 내부온도가 내려가는 시간) 드라이오븐에 넣고 멸균을 진행한 상태에서 실험을 종료하였다.

자연과학| 2022.10.20| 5페이지| 2,000원| 조회(269)

멸균법, 식품미생물학, 화염멸균, 식품미생물학및실험

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심혈관계질환에 대한 이해

Ⅰ. 서론1Ⅱ. 심혈관계질환11. 정의Ⅲ. 심혈관계질환의 종류21. 뇌혈관질환2. 심혈관질환Ⅳ. 심혈관질환의 예방전략41. 고혈압2. 고지혈증3. 생활습관개선Ⅴ. 심혈관계질환의 진단91. 병력조사2. 비침습적조사3. 침습적조사Ⅵ. 심혈관계질환의 수술법121. 관상동맥우회술2. 혈관성형술＊동영상：https://youtu.be/lmHZPtYSMsY (0:20 or 1:02부터)Ⅰ. 서론서구화된 식습관과 운동부족, 고령화로 인해 우리나라 심장질환 환자들이 급증하므로, 그에 따른 사망률도 꾸준히 증가하고 있는 추세이다. 2011년도까지 우리나라의 사망원인은 암, 뇌혈관질환에 이어 심혈관질환이 사망원인 3위를 차지했지만, 심혈관질환으로 인한 사망률이 증가함에 따라 최근에는 2위를 차지하고 있어 심혈관질환에 대한 조기 진단 및 치료가 중요해지고 있다.Ⅱ. 심혈관계질환1. 정의심혈관질환이란 심장과 심근을 둘러싸고 있는 혈관계에 이상이 생긴 것을 말한다주요 혈관계 질환은 대동맥, 허파동맥, 목동맥, 뇌혈관, 신장동맥, 하지동맥 등) 주요 동맥이 막히거나 늘어나거나 터지는 출혈이 일어나는 질환이다.뇌혈관질환과 심장혈관질환을 합친 말로 뇌심혈관질환이라고도 부르기도 하며 이는 인체의 가장 중요한 장기에 분포하는 혈관에 발생하는 질병이며, 질병의 원인, 위험요인, 악화요인과 예방대책이 거의 유사하다.주된 원인으로 (죽상)동맥경화증, 고혈압, 퇴행성 변화, 유전 등을 들 수 있다.Ⅲ. 심혈관질환의 종류1. 뇌혈관질환뇌혈관의 순환장애로 인해, 뇌조직에 산소와 영양분을 공급하는 뇌혈관이 막히거나 파열되면서 언어장애, 의식장애, 마비 등을 일으키는 뇌혈관질환을 총칭하며 중풍이라고도 불린다. 이는 동맥경화성 질환과 출혈성 뇌혈관 질환으로 나뉘어진다.1) 위험요인(1)고혈압- 뇌출혈과 뇌경색의 가장 큰 위험인자로서 수축기 및 확장기 혈압의 정도와 뇌졸중 발생에 상관관계가 있다. 고혈압이 있는 환자는 뇌졸중 발생 위험이 정상인에 비해 5배 높다- 독립된 수축기 고혈압이 노령층 뇌졸중의 중요 위 이상이 있는 환자에게서 뇌졸중 위험이 2배 높다(3)나이- 나이가 들수록 뇌졸중 위험이 증가하며, 55세 이후 10년마다 뇌졸중 위험도가 2배 늘어난다.(4)흡연- 흡연 자체가 뇌졸중 위험요인이다- 15~45세 성인의 경우 흡연자의 뇌경색 발생 위험이 비흡연자보다 1.6배 더 높다- 흡연기간이 길수록 위험도 증가하나 담배를 끊으면 위험도가 2년내 상당히 감소하고 5년 후에는 비흡연자와 같아진다(5)기타- 뇌졸중이나 일과성 뇌허혈발작이 있었던 사람은 발생 위험이 증가한다- 당뇨환자는 정상 성인에 비해 뇌졸중 빈도가 2배 높다- 고지혈증은 뇌졸중보다는 관상동맥질환과 연관성이 더 크다2) 동맥경화성 질환과 출혈성 뇌혈관 질환(1)동맥경화성 질환(죽상경화증): 혈관에 만성 염증이 생겨 혈관의 결체조직이 증가하여 혈관벽의 탄력성이 없어지고 경화가 일어나는 것이다. 특히 동맥경화는 Fatty-streak 지방덩어리가 동맥내벽에 쌓이면서 시작된다. 즉, 이 지방덩어리는 점점 커지면서 다른 물질들과 합쳐져 플라그를 형성하고 플라그는 동맥벽을 단단하게 경화시켜 혈관 내경을 좁게 만들어 혈류장애를 일으키게 된다. 이는 비교적 젊은 사람에게서 발생한다.(2)출혈성 뇌혈관 질환: 뇌실질내 출혈과 지주막하 출혈로 구분된다. 기저핵, 시상, 뇌교 등의 부위에서 출혈이 주로 발생하고, 고혈압을 오래 앓은 경우나 흡연자이면서 고혈압약을 복용하지 않는 경우 특히 잘 발생한다-뇌실질내 출혈은 흥분, 정신적 긴장, 격무, 과로 등에 의해 유발 가능 하다-지주막하 출혈은 대부분 동맥류 파열이나 동정맥 기형에 기인한다2. 심혈관질환(관상동맥질환)관상동맥은 심장의 표면에서 심장에 혈액을 공급하는 혈관이다. 이 혈관 이 경화하여 좁아지는 병을 관상동맥질환 또는 허혈성 심질환이라 한다1)위험요인(1) 흡연- 관상동맥질환과 강력한 관계가 있다. 산화물을 증가시키고 HDL 콜레스테롤의 심장 보호 효과를 감소시켜서 일산화탄소, 니코틴과 함께 혈관 내피세포에 손상을 초래한다(2) 지질 이상- 총콜레스테롤과 DL 콜레스테롤과는 독립적 으로 작용하므로 HDL 콜레스테롤을 높이는 것이 중요하다(3) 고혈압- 관상동맥질환과 강한 상관관계가 있으며, 혈압이 높을수록 위험이 높다(4) 당뇨병- 관상동맥질환의 독립적 위험인자로 남자는 2~3배, 여자는 3~5배 정도 위험이 증가한다(5) 운동 부족- 운동 부족은 관상동맥질환의 위험을 2배 정도 높인다- 규칙적으로 운동하면 위험이 감소한다(6) 비만- 비만은 독립적인 위험인자보다는 비만에 의한 다른 위험인자들에 의해 관상동맥 질환이 증가한다.2)심근경색증과 협심증(1)심근경색증: 심근경색증이란 심장에 혈액을 공급하는 관상동맥(심장동맥)이 완전히 막혀 심근이 괴사하는 질환이다. 동맥경화에 의해 좁아진 심장동맥 벽에 늘어붙어 쌓여 있던 기름 찌꺼기가 터지면서 혈액과 만나 혈전(피떡)을 형성하고, 혈전은 혈액의 흐름을 완전히 막아 심장근육이 괴사되면서(썩으면서) 가슴 통증이 발생한다.(2)협심증: 협심증이란 관상동맥이 부분적으로 막히는 경우로 심장의 산소요구량이 증가할 때마다 혈액이 공급되지 않는 흉통을 느끼는 질환이다. 대개 운동을 할 때처럼 심장이 많은 영양분과 산소를 필요로 할 때 좁아진 혈관으로 충분한 혈액이 심장근육에 공급되지 못해서 심장 기능 이상이 발생한다. ‘가슴이 조여온다’ 등의 가슴 통증이 생기며 심장 기능이 저하될 수 있다.Ⅳ. 심혈관질환의 예방전략? 기초질환의 치료: 고혈압, 당뇨병, 고지혈증 등 기초질환등의 치료? 생활습관 위험요인관리: 생활습관 중 핵심 위험요인은 흡연.? 체중관리: 체중관리는 꼭 필요한 생활습관 개선 요건이다. 식이요법과 운동을 병행해 관리한다? 유산소운동: 유산소운동은 다른 유해요인을 개선하는 데 도움이 되므로 위험요인을 가진 사람은 빠뜨리지 않고 해야 한다1. 고혈압혈액이 혈관벽에 가하는 힘을 혈압이라고 하는데, 여러 번 측정한 혈압의 평균치에서 수축기 혈압 140mmHg 이상이거나 확장기 혈압 90mmHg 이상이면 고혈압으로 진단한다. 뚜렷한 증상없이 나타나 침묵의 살인자라고 불린다.차 목표는 140 / 90㎜Hg이다. 이 목표는 확실하게 도달해야 하고 더 낮추어도 좋을 수 있다(3)예방과 치료: 식이요법과 생활습관의 교정이 필요하다(약물치료 이전에 식사조절,운동,금연을 먼저 실천하도록 한다.)2)고혈압 환자의 생활습관 개선: 고혈압 환자의 생활치료 요법 중 가장 중요한 것은 운동과 체중 관리이고, 합병증 예방에 가장 중요한 금연은 반드시 수행해야 한다.2. 고지혈증혈액 내 지방질은 총콜레스테롤, 중성지방, 저밀도 및 고밀도 지단 백으로 구분하며, 이들 지방질이 비정상적으로 과다한 경우를 고지혈증이라 한다. 이때 혈중 콜레스테롤이 240㎎/㎗ 이상이면 고콜레스테롤혈증으로 진단한다.1)고지혈증의 진단 및 치료 지침: 고지혈증의 치료지침은 LDL 콜레스테롤을 낮추는 것이 목표이지만, 관상동맥질환의 위험요인에 따라 달리 적용한다(1)관상동맥질환 위험요인- 흡연- 고혈압 : 혈압 140/90㎜Hg 또는 고혈압약 복용- 낮은 HDL 콜레스테롤 : 40㎎/㎗ 미만- 조기 심장질환의 가족력 : 아버지 또는 남자 형제들 중 55세 미만에 심질환 발생, 어머니또는 여자 형제들 중 65세 미만에 심질환 발생- 나이 : 남자 45세 이상, 여자 55세 이상2)고지혈증의 치료- 식사요법: 지방 섭취량은 총열량의 20%, 포화지방은 총지방량의 3분 1미만을 권장한다- 체중 관리: 비만한 경우 표준체중으로 감량하는 것이 목표이나, 표준체중까지 감 량하기 어려우면 한 달에 1~2㎏씩 점차 감량해 적정체중을 유지한다- 운동: 운동은 보행, 등산, 조깅, 에어로빅 체조, 수영, 테니스, 골프 등을 30~40분 정도, 주 2~4회 하는 것이 좋다- 약물요법: 약물요법은 식이요법과 운동요법으로 혈중 지질이 교정되지 않거나 혈중 지질이 처음부터 아주 높은 경우에 전문의와 상의해서 한다3. 생활습관개선1)금연: 심혈관계질환은 흡연 질병의 42%를 차지하며, 흡연자는 비흡연자보다 위험률이 60~70% 정도 높다. 동맥경화증의 원인이 되는 LDL 콜레스테롤과 중성지방을 증가시키고,유지단계를 통한 금연을 하도록 한다.2)비만- 뇌심혈관계질환의 위험요인- 고혈압: 남자의 경우 체중이 10% 증가하면 혈압은 평균 6.6㎜Hg 상승한다. 그러나 고혈압 환자가 체중을 5㎏ 감량하면 수축기 혈압은 10㎜Hg, 확장기 혈압은 5㎜Hg 감소한다- 고지혈증 - 당뇨병 - 기타 질병비만의 치료를 위하여 운동요법, 식이요법, 행동수정요법을 통한 관리를 하도록 한다.3) 규칙적인 운동: 일주일에 3번이상, 30분 이상씩 하는 운동은 LDL 수치를 낮출 뿐 아니라 혈관 자체를 건강하게 유지시켜 대사기능 및 심혈관 기능의 개선에 도움을 줌4) 단순당(설탕,과당), 염분, 트랜스지방 섭취 자제-짜게 먹는 식습관은 고혈압 및 동맥경화증을 촉진-트랜스 지방은 혈중 LDL 콜레스테롤을 증가시키며 혈중 LDL 농도가 높아지면 혈관에 지방 침전물이 생겨 혈관이 점점 막히게 됨.5) 등푸른 생선, 견과류 섭취-등푸른 생선의 EPA, DHA와 견과류의 오메가3 다가불포화 지방산, 식이섬유소가 혈중 중성지방, LDL수치를 낮추고 항혈전효과를 가짐.-주 2회 등푸른 생선 섭취가 도움6) 충분한 수면-수면의 질이 떨어지거나 수면 시간이 지나치게 적으면 심혈관계와 대사에 악영향을 끼침7) 정기적인 건강검진-심혈관질환은 무증상의 잠복기를 거쳐서 발생하는 경우가 있음-정기 검진을 통해 조기발견 및 치료가 중요Ⅴ. 심혈관질환의 진단1. 병력조사-병력조사: 과거에 어떤 병을 앓았는지 조사하는 일. 질병간의 인과관계 파악에 이용.2. 비침습적 검사체내로 침입하거나 절개 없이 진행하는 검사1) 심전도 :-심장의 전기 활성도를 측정하여 환자의 심박동과 심박수를 평가하는 검사.-전극을 흉부에 부착하여 전기 충격을 기록. 심박동수가 분당 60~100회이고, 리듬이 규칙적이고, 심전도 파형의 크기나 모양이 정상인 경우 정상 심전도로 판정.-하지만, ‘심전도 결과 정상 = 심장병 없음‘ 을 의미하지 않음. 부정맥 환자도 심전도를 찍는 순간에 부정맥이 나타나지 않는다면 정상으로 나타날 수 있음. 2).

의/약학| 2022.10.20| 14페이지| 2,500원| 조회(336)

심혈관계질환, 영양과질병, 심혈관계질환원인

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식품미생물학 및 실험 / 균수의 측정_평판도말법

실험 제목생균수의 측정실험 날짜2017.10.17.화요일실험 조 및 조원A분반박**실험 원리 및 배경미생물에 의한 식품의 오염정도를 파악하기 위해서는 미지의 Sample에 존재하는 미생물의 수를 측정해야 한다. 식품은 사람의 건강뿐만 아니라 생명과도 연결될 수 있으므로 오염정도를 정확히 측정할 필요가 있다. 각 측정방법마다 장점과 단점이 있으므로 시료와 미생물의 종류 및 실험 목적에 따라 적절한 방법을 선택하여 사용해야 한다.1. 균수의 측정총균수(total cell number)측정법에는 현미경 측정법(microscopic count)과 입자계수기(electronic particle counter)사용법이 있으며, 생균수(viable cell number) 측정법에는 평판배지법(plate culture method), 박막여과법(membrane filtration), 최확수법(MPN, most probable number) 등이 있다.1) 현미경 측정법(microscopic count)현미경 측정법은 특별히 고안된 계수기(counting chamber)를 사용하여 일정 부피에 존재하는 모든 세포의 수를 세는 방법으로, 세균, 효모 등 단세포 미생물의 수를 세는데 적합하다. 액체 배양한 시료를 직접 사용하거나 세포를 염색한 후 균수를 측정하며, 세균의 계수에는 Petroff-Hausser 계수기를 사용하고, 효모의 계수에는 Thoma의 혈구계수기(hematocytometer)를 사용한다.현미경 측정법을 사용하면 신속하게 세포의 수를 셀 수 있으며, 세포의 크기와 형태에 관한 정보도 얻을 수 있다. 평판배양법으로는 특정한 조건에서 증식할 수 있는 미생물만 측정할 수 있으나, 현미경 계수법은 시료에 존재하는 모든 미생물을 측정할 수 있다. 그러나 배양액이 투명하고 세포로 오인할 수 있는 입자들이 없어야 하며, 측정하는 시료의 양이 매우 적으므로 세포 밀도가 낮을 때에는 사용할 수 없다. 산 세포와 죽은 세포를 구별하기 어려우나 0.1% 메틸렌 블루(methylen면 미생물이 증식하여 형성하는 집락(colony)의 수를 세는 방법으로 집락계수법(colony count)라고도 하며, 결과는 집락형성단위(CFU, colony-forming unit)로 표시한다. 살아있는 한 개의 미생물 세포가 한 개의 집락을 형성한다는 가정하에서 균수를 측정하나 실제는 한 개 이상의 생균이 하나의 집락을 형성하기도 하며, 사용하는 배지 및 배양조건에 따라 살아있는 세포 중에서도 일부가 집락을 형성하지 못하므로 시료에 있는 생균수보다 적은 결과를 얻게 된다.(1) 시료의 계열희석① 5개의 멸균한 나사형 시험관에 10-1～10-5로 희석배수를 표시한다.② 멸균 피펫을 사용하여 표시한 시험관에 멸균 생리식염수를 9㎖씩 넣는다.③ 마이크로 피펫을 사용하여 10-1 표시한 시험관에 토양 시료 1.0 g 또는 물 시료 1.0 ㎖를 넣고 균질기를 사용하여 잘 혼합한다.④ 마이크로 피펫의 팁을 교환하고, 혼합한 시료 1 ㎖를 취하여 10-2 표시한 시험관에 넣고 균질기를 사용하여 잘 혼합한다.⑤ 위의 과정을 10-5 까지 반복한다.평판계수법에는 도말평판법(spread plate method)과 주입평판법(pour plate method)이 있다. 도말평판법은 한천배지 표면에 시료 0.1 ㎖를 올려놓고 유리막대로 표면에 넓게 편 다음 배양하여 집락의 수를 측정하는 방법이다. 주입평판법은 시료 1.0 ㎖를 멸균 평판에 주입한 다음 45～55℃로 식힌 한천배지를 넣어 혼합하여 배양하여 집락의 수를 측정하는 방법이다.(2) 주입평판법과 평판도말법평판배양법의 결과가 통계적으로 신뢰성을 갖기 위해서는 한 평판에 형성된 집락의 수가 30～300 정도이어야 한다. 따라서 시료의 미생물 수가 많을 때에는 시료를 10배수 계열희석법(serial decimal dilution)으로 적절히 희석하여 집락의 수가 이 범위에 있도록 하여야 한다.시료의 미생물 밀도가 낮을 때에는 일정량의 액체 시료를 박막여과(membrane filtration)한 후 박막여과지를 한천평판배지 또하는데도 사용할 수 있다. 시료를 생균이 하나도 없을 때까지 10배수 계열희석한 후 각 단계별 희석액 일정량을 수 개의 적절한 액체배지에 접종하고 배양한다. 희석액에 최소 1 개 이상의 생균이 존재하면 배양액에 균의 증식을 나타내는 혼탁, 산의 생성, 가스의 생성 등의 현상이 나타나게 된다. 각 희석단계별로 양성/음성 반응을 나타내는 관의 수를 센 후 최확수표를 사용하여 시료의 미생물 밀도를 추정한다. 각 희석 단계별로 3, 5, 10개의 관을 사용했을 때의 최확수표가 있으며, 사용하는 관의 수가 많을수록 보다 정확한 밀도를 추정할 수 있다.2. 집락의 계수 및 계산① 배양이 끝난 평판배지를 희석배수별로 정리한다.② 확산 집락이 없고 한 평판에 30～300개의 집락이 있는 평판을 선택하여 집락수를 센다. 이 때 초자용 색연필 또는 마커펜을 사용하여 표시하면서 계수하여 중복측정을 피해야 한다.*집락의 크기가 적을 때에는 확대경이 붙어 있는 집락계수기(colony counter)나 실체현미경을 사용하여 계수한다.*모든 평판에 300개 이상의 집락이 형성되었을 때는 희석배수가 가장 높은 평판의 집락수를 센다. 모든 평판에 30개 이하의 집락이 형성되었을 때는 희석배수가 가장 낮은 평판의 집락수를 센다.③ 계수 결과를 표로 정리한다. 집락의 수가 셀 수 없을 정도로 많을 때에는 TNTC(Too Numerous To Count)로 표시한다. 집락의 수가 30개 이하로 적을 때에는 TFTC(Too Few To Count)로 표시할 수도 있다.④ 동일 희석배율의 평판배지에 형성된 집락수의 평균을 구하고 희석배율을 곱하여 시료의 미생물 밀도를 구한다. 결과는 CFU/g 또는 CFU/㎖로 표시하고, 지수함수 형태로 표시하며, 유효숫자는 두 자리 또는 세 자리를 사용한다(A.BC x 10dCFU/g 또는 CFU/㎖).시료의미생물밀도(CFU/g또는CFU/㎖)#=평균집락수x희석배율x1/사용한시료량(㎖) [계산의 예]어느 토양의 미생물 수를 평판배양법으로 측정한 결과는 다음과 같다. 평판당 평균 집락수를 계산한다.평균집락수 = (184 + 156 + 176) / 3 = 1723) 이 토양 시료의 미생물 밀도는 다음과 같다.미생물 밀도 = 평균 집락수 x 희석배율 x 10= 172 x 103 x 10= 1.72 x 106 (CFU/g)* 연속 희석단계에서 30～300개 집락이 있는 경우에는 각 희석배수 값의 산술평균을 집락수로 하여 계산할 수도 있다. 즉 10-3에서의 평균 집락수가 172, 10-4에서의 평균 집락수가 42이면 10-3에서의 평균 집락수가 (172 + 420)/2 = 296인 것으로 계산할 수 있다. 이 경우 두 희석단계의 집락수의 비가 너무 적거나 크면 반복 실험하여 정확한 값을 구해야 한다.3. 마이크로피펫 사용법마이크로피펫을 사용하여 액체를 취하는 방법은 총 4단계로 나뉘어지며, 각 단계는 아래와 같다.? Step 1 Preparation (준비)Pipette을 수직으로 잡고 첫 번째 정지지점까지 plunger button을 천천히 누른다.? Step 2. Aspiration (흡입)Tip을 액체에 담그고 원래의 위치까지 천천히 plunger button을 놓아준다. 모든 액체가 tip으로 충분히 올라올 수 있도록 1초 정도 기다린다.? Step 3. Distribution (분배)Tip을 분배할 용기의 안쪽 벽면에 10~45℃ 정도 기울여서 plunger button을 최초 정지지점까지 눌러서 액체를 분배한다.? Step 4. Purge (*마지막 방울까지 내보냄)1초 정도 기다린 후에 plunger button을 두 번째 정지지점까지 눌러서 tip에 남아있는 한 방울까지 밀어낸다. tip은 용기벽면을 올리면서 벽면에서 떼어낸다① Tip을 장착한 후 사용한다.Tip을 장착하지 않은 채 사용하면 용액이 마이크로피펫 내부로 들어와 모두 용액에 의해 오염될 것이고, 용액의 종류에 따라서 O-ring 및 스프링과 같은 부품에 손상을 주게 된다.② 마이크로피펫의 용량을 지켜서 사용한다.각 마이크로피펫은 사용할 수 있는 용량ft 부분에 손상이 오게 되므로, 이때 손상된 부분으로 공기가 유입되기 때문에 tip 안의 용액이 방울방울 떨어지는 현상이 발생한다.④ 첫 번째 정지지점과 두 번째 정지지점을 잘 지키며 사용한다.⑤ Plunger button은 천천히 놓는다.용액을 취할 시 Plunger button을 갑자기 확 놓는 경우, 용액이 갑작스럽게 빨려 들어와서 마이크로피펫 내부로 침범하는 현상이 나타난다. 이렇게 되면 마이크로피펫 내부 오염 및 내부 부품들에 손상을 주므로, 이러한 현상을 예방하기 위해서 시선은 tip 에 두고, Plunger button은 용액이 Tip 안으로 빨려 들어오는 정도에 맞추어 천천히 놓는다.⑥ Tip 끝을 용액에 충분히 잠기도록 하여 사용하고, 취하고자 하는 용량만큼 용액이 tip 안으로 유입될 때까지 충분한 시간을 주도록 한다.tip 끝을 용액의 표면과 가까이 잠기도록 하여 사용하면, tip 안으로 용액이 유입되다가 tip 끝이 용액의 표면 밖으로 노출되면서 공기가 함께 유입된다. 결국 원하는 용량만큼의 용액을 취하지 못하는 현상이 발생한다.⑦ 용액이 담긴 상태로 마이크로피펫을 눕히거나 뒤집지 않는다.실험 재료 및 기구Sample-요구르트증류수Test-tubeTest-tube RankPipette FilterMicro PipetteClean-bench70% Ethanol알코올램프메탄올평판고체배지도말봉랩Incubator실험 방법1. 희석액 준비1)준비된 Test-tube에 희석배수를 라벨링 하였다.1-2){10} ^{-1}배 희석액 제조: Test-tube에 시료(요구르트) 0.1ml를 취해 증류수 0.9ml와 섞어 피펫을 이용하여 균질화 하였다.2){10} ^{-2}배 희석액 제조: Test-tube에{10} ^{-1}배 희석액을 0.1ml 취해 증류수 0.9ml와 섞었다.3)위와 같은 과정을 반복하여{10} ^{-5}배까지 총 5개의 희석액을 만들었다.2. 평판고체배지 균 도말 (Clean-bench내)1)준비된 배지의 Petri-dish에 접종할)

생활/환경| 2022.10.20| 9페이지| 2,500원| 조회(521)

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