제한효소 처리 및 Ligation 원리

소개

제한효소의 원리 및 처리방법, 제한효소의 특징에 대해 설명했고, 이러한 제한효소를 이용하여
ligation하는방법과 원리에 대해서 그림을 첨부하여 설명하였습니다.

목차

1) 제한 효소란?
2) 제한 효소의 명명법
3) 제한 효소의 종류
4) 제한효소 mechanism?
5) 제한효소의 장점
6) 제한 효소가 자신을 자르지 않는 이유?
7) 제한효소에 의한 DNA의 절단법
1) Ligation 이란?
2) DNA 리가아제(DNA ligase, 연결 효소)
3) Ligation reaction에 영향을 주는 factor들
4)제한효소와 DNA연결효소를 이용한 재조합 DNA 제조

본문내용

제한효소
1) 제한 효소란?
DNA에 존재하는 특정한 염기서열을 인식하고 인식한 서열부위 또는 그 근처에 존재하는 특정부위를 절단하는 enzyme으로 nucleotides가 연결되어 있는 phosphodiester 결합의 안쪽을 끊어내는 endonuclease의 대표이다

2) 제한 효소의 명명법
모든 제한효소는 그것들을 생산한 미생물의 Latin 이름으로부터 그들의 이름들의 첫 세글자들을 딴 것이다. 첫 글자는 gene의 첫철자이고, 다음 두 철자들은 species의 첫 두 철자들이다. 게다가, strain명이 때때로 포함되어진다. 마지막으로 만약 미생물의 strain가 단지 하나의 제한효소를 생산한다면, 이름은 Roman numeral Ⅰ 으로 끝난다. 만약 한 개보다 더 많은 효소가 생산되어진다면, 발견된 순서에 따라 Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ 등으로 수가 매겨진다

3) 제한 효소의 종류
제한효소는 3가지로 나눌 수 있으며, 실험실에서 사용되는 것은 대부분 type Ⅱ이다.
(1) TypeⅠrestriction enzyme
DNA의 특정 부위를 인식하기는 하지만 인식된 부위가 아닌 다른 부위를 절단한다.
(2) TypeⅡrestriction enzyme
인식부위와 절단부위가 모두 특이성이 있어서 분자생물학 연구에 아주 유용하게 이용되고 있다.
(3) TypeⅢ restriction enzyme
인식한 DNA부위에서 어느 정도 떨어진 부위를 절단한다

4) 제한효소 mechanism?
제한효소는 그 효소가 유래하는 균주의 DNA나 자주(自株)형에 수식된 DNA (DNA 분자내의 특정의 염기가 methylation된 DNA의 cytosine, adenine 등에는 작용하지 않고 외래의 DNA를 그 분자내의 phosphodiester 결합을 가수 분해하여 자른다

5) 제한효소의 장점
(1) 재현성이 높다.
: 같은 자리만 잘라내므로 유전자 분석,
유전자 발현 기술의 기초가 된다.

참고자료

· 없음