DNA cloning

최초 등록일
2020.01.22
최종 저작일
2017.09
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소개글

"DNA cloning"에 대한 내용입니다.

목차

I. 서론

II. 이론적 배경
1) DNA
2) Central Dogma
3) 제한효소
4) ligation
5) PCR (polymerase chain reaction, 중합효소연쇄반응)
6) 전기영동
7) Transformation (형질변환)

III. 실험과정
1) PCR용액 제조
2) PCR공정
3) 전기영동

IV. 실험결과
1) 전기염동 결과

V. 실험 후 느낀 점

VI. 소감문

본문내용

I. 서론

연구 등의 목적으로 동일하고 무수히 많은 DNA를 얻는 일을 DNA 클로닝(cloning)이라 한다. 관심이 있는 DNA 조각을 얻어서 벡터(vector)라고 부르는 운반 DNA 분자에 연결시킨 후에 세포에 도입하면 새로 도입된 DNA를 지닌 세포가 분열을 거듭하여 클론(clone)을 생성한다. 도입된 DNA는 세균이 세포분열을 할 때마다 함께 복제된다. 어떠한 DNA의 절편도 벡터 DNA의 적절한 위치에 삽입시켜 클로닝 할 수 있다. 가장 널리 사용되는 벡터는 재조합DNA의 생산을 쉽게 하기 위해 조작된 세균성 플라스미드(plasmid)와 바이러스(virus)이다. 클론 내의 세포들은 모두 동일하며 도입된 DNA 사본을 포함하고 있다. 얻은 세포를 대량으로 키워서 클론을 얻고 거기에서 플라스미드 DNA를 추출하면 연구하거나 조작하기에 충분한 만큼의 같은 종류의 DNA를 얻을 수 있다.

이렇게 원하는 DNA의 양을 증폭시키기 위해 꼭 필요한 것이 PCR이다. 이번 수업에서는 PCR을 이용해 우리가 얻고자 하는 유전자를 증폭하고 증폭된 유전자에 정제 및 제한효소 처리를 하여 끊어진 DNA를 Ligation을 통해 재조합 DNA를 만들어 이를 가지고 형질전환(Transformation) 과정을 거쳐 형질 전환된 유전자를 만들고 증폭된 유전자를 전기영동으로 관찰해 보았다.

II. 이론적 배경

1) DNA

DNA는 인산, 디옥시리보스, 질소를 함유하는 염기 세 가지가 결합한 형태가 하나의 단위가 되는데, 여기에서 염기 부분이 크게 4가지로 구성되어 있다. 아데닌(A), 구아닌(G), 타이민(T), 사이토신(C)이 여기에 해당한다. 이 4가지 염기가 긴 DNA 사슬에 배열되어 있는 순서, 즉 서열이 특정한 단백질을 만들게 된다. 특히 4가지의 염기는 A와 T가 서로 결합할 수 있으며, G와 C가 서로 결합할 수 있다는 특성을 가진다.

참고 자료

없음

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