DNA Fragmentation Assay

소개

DNA Fragmentation Assay

목차

1.Object.
2.Intro.
-Apoptosis
-Apoptosis의 특징.
-왜 세포가 자살하는가?
3.DNA Fragmentation
4.Etoposide의 Apoptosis유도.
5.Materials
6.Methods

본문내용

DNA Fragmentation Assay
Object.
Apoptosis cell의 전형적인 특징 중 하나인 DNA의 Fragmentation을 관찰하는 것.
Apoptosis ?
Programmed Cell Death라 불려지는 세포 자살 시스템에
서 능동적인 세포고사 과정을 Apoptosis라고 한다.
Intro.
Intro.
왜 세포가 자살하는가?
apoptosis의 이유는 여러 가지로 꼽힌다.
성인의 경우, 세포 증식의 균형을 유지하며, 세포가 대체될 때 세포의 수를 일정하게 유지하는데 쓰인다.
예) 인체에서는 하루에 5x10¹¹개의 혈액세포가 apoptosis 로 제거된다.
그 외에도 DNA가 Repair할 수 없을 만큼 Damage를
입었을 경우, 잠재적인 돌연변이(예를 들어 암세포 같
은)의 예방차원에서 Cell Death Program이 일어나기도
한다.
Methods
1. 5x100.000/ml로 culture한 60m dish의 cell을 15ml tube로
옮기고 500g에서 5분간 centrifuge한다.
2. sup을 버린 다음 pellet을 얻는다 (4℃)
3. pellet + lysis buffer 20㎕를 넣어서 resuspending후에 tube
로 옮긴다.
4. 50℃에서 한 시간동안 incubating.
5. 10mg/ml Rnase A 1㎕ 첨가 후 50℃에서 한 시간동안 ....

참고자료

· 없음