[예방약학실험1] Cell death assay

목차

1. 예비보고서
2. 결과보고서

본문내용

Q: 세포사멸을 측정하는 여러가지 방법 및 그 원리에 대해 설명하시오.

세포사멸의 측정이 필요한 이유는 암세포 사멸 정도를 통해 항암제의 치료 효과를 측정하거나 독성물질의 독성을 측정하는 일에 활용되는 등등 다양하다. 세포사멸 측정법은 여럿 존재하고 연구목적에 따라 최적의 방법을 선택할 수 있다. 측정 원리는 세포사멸 시 발생하는 현상을 관찰하는 것이다.

1) TUNEL assay: TUNEL이란 terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling의 약자이다. 세포사멸 후반부에 DNA 분절화가 나타나면 분절화된 DNA의 자유 3'-OH 말단을 형광표지하여 형광현미경 또는 ELISA으로 검출한다. 형광표지를 위해서는 terminal deoxynucleotidyl transferase(TdT)라는 발색효소를 사용하는데, double strand DNA break가 생기면 3’ 말단에 붙는 성질이 있다.

2) Annexin V staining: 세포사멸 초반부에 인지질의 일종인 포스파티딜세린이 세포막 외부로 노출되는 현상이 있다. Annexin V는 포스파티딜세린에 결합하는 단백질이며 결합 현상을 검출하기 위해 flow cytometry를 진행한다.

참고 자료

한국약학교육협의회 약물학분과회, 약물학, 범문에듀케이션, 2018
한국약학교육협의회 예방약학분과회, 예방약학 제8판, 신일북스, 2017