DNA fragmentation assay

소개글

세포생물학 실험 관련 레포트입니다.
만점받은 레포트예요.
참고하시고 좋은 점수 받으세요~

목차

1. 실험 목적
2. 실험 원리
-Apoptosis 란?
-Apoptosis의 과정
-Apoptosis의 관찰
-Caspase
-Lysisis buffer
-실험시 주의사항
3.실험 재료
4.실험방법
5.예상결과
6.참고문헌

본문내용

1. 실험 목적
Apoptosis cell 의 전형적인 특징 중 하나인 DNA 의 fragmentation을 관찰해 본다.

2. 실험 원리
세포 죽음은 necrosis 또는 apoptosis라는 2개의 별개의 기작에 의해 발생할 수 있다. 우리는 이 기작을 갖는 cell을 관찰함으로써 이들의 기작을 이해할
수 있을 것이다. 또한 우리는 이들을 DNA fragmentation assay를 통해 이들의 특징을 이해할 수 있을 것이다.
①necrosis(괴사) : 박테리아 등에 의한 감염이나 상처에 의한 세포의 죽음.
②apoprosis(세포자살) : 외부 신호나 내부 신호에 의해서 죽음이 유도되는 현상.

◀Apoptosis 와 Necrosis 의 비교
*Apoptosis 란?
Apoptosis는 불필요하거나 소용없는 세포가 성장이나 다른 보통의 생물학적 과정으로 제거되어지는 과정이다. 심한 상처를 입은 세포는 부풀어오르고 터져서 내용물을 사방에 흘리며, 결국에 염증을 일으킨다. 이것을 보통 cell necrosis라고 한다. 이와는 대조적으로, Apoptosis를 일으키는 세포는 주변 세포에 해를 끼치지 않으면서 깔끔하게 죽는다.
세포는 쭈그러들고 응축된다. 세포 골격이 붕괴되고 핵막이 손실되며, 핵 DNA가 조각으로 잘라진다. 가장 중요한 것은 세포표면이 변화하여 그 내용물이 새어 나가기 전에 주변 세포나 대식세포에 의해 즉시 잡아먹힐 수 있게 된다는 것이다. 이런 종류의 세포자살을 통제하는 기작은 모든 동물세포에서 비슷하다. 이 기작은 한 무리의 단백질분해효소를 포함하는데 이들 자신 또한 예정된 세포 죽음을 유도하는 신호에 의해 활성화된다. 활성화된 자살 단백질 분해효소는 같은 무리 내의 다른 효소를 자르고 활성화시킴으로써 단백질분해 연쇄작용을 증폭시킨다. 이렇게 활성화된 단...

참고 자료

1) Cell biology(A laboratory handbook) vol.1, Julio E. Celis, Academic press, 1998
2) Cohen,G.M., Sun,X., Snowden,R.T., Dinsdale,D. and Skilleter,D.N. (1992) Biochemical J. 286, 331-334.
3) Lis,J.T., and Schleif,R. (1975) Nucleic Acids Res. 2, 383-389.
4) Bortner,C.D., Oldenburg,N.B.E. and Cidlowski,J.A. (1995) Trends Cell Biol. 5, 21-26.
5) Sun,X., and Cohen,G.M. (1994) J. Biol. Chem. 269, 14857-14860. MEDLINE Abstract
6) Sambrook,J., Fritsch,E.F., and Maniatis,T. (1989) Molecular Cloning. A Laboratory manual. Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY.
http://www.celldeath.de/apometh/dnafragm.html