[화학실험]아미노산의 적정-결과보고서

소개

미지시료가 스파르트산. 페닐알라닌. 라이신 중 무엇인지를 알아내는 실험이다!
실험결과를 깔끔한 표와 그래프로 나타내었고, 디스커션에서 심층 분석하였다.

목차

인트로덕션
결과
토의
참고문헌

본문내용

1. Abstract & Introduction
단백질을 분리하는 전기영동법의 하나로 Isoelectric focusing이 있다. Isoelectric focusing이란 단백질마다 전기적으로 중성이 되는 pH가 조금씩 다르다는 사실을 이용해서 단백질을 분리하는 전기영동 방법의 하나이다. Isoelectric focusing이 일어나는 방향으로는 gel의 pH가 산성에서 알칼리성까지 연속적으로 변하도록 되어있어서 단백질이 전기장에서 이동하다가 자신의 등전점(isoelectric point; 전기적으로 중성이 되는 점)과 같은 pH에 도달하면 이동을 멈춘다. 두 가지 단백질이 분자량과 등전점이 모두 같을 확률은 거의 없기 때문에 단백질의 분리가 가능하다.
아미노산의 pKa는 수용액 내의 짝산과 짝염기의 농도가 같을 때의 pH라는 것은 Henderson - Hasselbalch equation을 통해 알 수 있다. 적정곡선 상에서 보면 염기를 가하여도 pH가 그다지 변화하지 않는 변곡점에서의 pH가 아미노산의 pKa이다. 이렇게 아미노산 용액을 염기성 용액으로 적정하면 적정곡선을 통해서 당량점과 pKa를 찾을 수 있다.
오늘 실험에서는 aspartic acid, phenylalanine, lysine 세가지 아미노산에 대하여 NaOH 용액으로 적정한 그래프를 얻어, 각 아미노산의 pKa값과 당량점을 구하고 실험에 쓰인 아미노산을 알아낸다.

3. Discussion
이번 실험에서는 미지의 아미노산을 적정하여 그 그래프를 분석하여 아미노산의 정체를 알아보았다. 그래프를 놓고 봤을 때 우리가 실험한 미지시료A는 Aspartic acid로 보인다. Asp는 이론적으로 pKa1 = 1.99 (α-COOH), pKa2 = 3.90 (β-COOH), pKa3 = 10.0 값을 갖고 등전점은 (1.99 + 3.90)/2 = 2.95이다. 실제 실험결과를 토대로 나온 그래프에서는 사실상 변곡점을 찾아보기가 힘들었다. pH가 급격하게 증가하는 구간은 나타났지만 그 외의 구간에서는 기울기가 조금씩 변화할 뿐 변곡점을 찾을 수는 없었다. 그래서 이론적인 값을 가지고 추측을 할 수 밖에 없었다.

참고자료

· 핸드아웃
· 생화학, 실험-문제풀이; 김윤수 저; 의학문화사; p.218~227
· Principles of Modern Chemistry, 5th Ed., Oxtoby, Gillis, Nachtrieb; Chapter. 10
· http://web.kyunghee.ac.kr/%7Eahelixer/html/basic/pa0003.html