[미생물학실험]Gram-Stain

목차

1. 실험 목적
2. 실험 이론 및 원리
3. 실험 기구 및 시약
4. 실험 방법
5. 실험 결과
6. 토의 사항
7. 참고 문헌

본문내용

1. 실험 목적
가. 여러 미생물을 가지고 그람염색을 해본 후 그람음성도에 따라 분류 해 보자.

2. 실험 이론 및 원리
가. Gram-Stain
세균이나 효모를 동정하고 분류하는 염색 방법으로 1884년 덴마크의 의사 한스 크리스찬 그람이 고안했다. 세균은 그 고정 표본을 Crystal violet, gention violet으로 염색하고, lugol solution으로 처리 한 후 순 에틸 알코올로 탈색조작 하였을 때 탈색되지 않는 균군(gram양성균)과 탈색되는 균군(gram음성균)으로 구별된다. 계속하여 옅은 safaradine sol또는 fuchisin sol로 대비염색하면 전자는 그대로 자색, 후자는 후염색에 의해 적색으로 염색된다.
이것은 세포표면 특히, 세포벽의 화학구조의 차이에 의한 것이다. 그람양성균과 그람 음성균 사이에서 화학적, 생물학적 여러 가지 차이가 인정된다. 그람음성균의 세포벽은 양성균보다 지질함럄이 많고, peptidoglycan층이 엷다. 따라서 peptidoglycan층에 침투하는 crystal violet/요오드 복합체는 쉽게 추출되는 결과 탈색된다. 지질이 없고 peptidoglycan층이 두꺼운 그람 양성균에서는 alcohol에 의한 탈수로 세포벽이 더욱 치말하게 됨으로써, 투과성이 저하되어 crystal violet/요오드 복합체가 쉽게 탈색되지 않는다. 따라서 그람음성균은 항상 음성으로 염색되지만 그람양성균은 장기간 배양으로 세포벽이 변질 되거나, lysozyme으로 peptidoglycan층을 제거하면 음성으로 나타난다.

참고자료

· 최신 수의미생물학, 면역학, 최원필 외
· 식품미생물학 실험편, 지구문화사
· 微生物學, Roger Y. Stamer, John L. Ingraham, Mark L. Wheelis, Page R. Painter
· 미생물학 제5판, 라이프 사이언스, 김경민, 서영훈, 신주옥, 이혜영, 정인실, 조은희, 하영미
· 미생물의 생물학 개정 6판 - Brock ․ Madigan (공저), 김병홍, 민경희, 이평우, 최영길, 김치경, 윤권상, 전순배 (공역)