[미생물] Gram staining

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2016.03.01
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목차

1. Introduction
2. Materials
3. Methods
4. Discussion

본문내용

Ⅰ. Introduction
▶ 염색법
미생물 균체는 크기가 미세하고, 액체배지에 현탁되어 있으면 투명하거나 색깔이 없기 때문에 살아 있는 상태로 관찰하기는 대단히 어렵다. 따라서 이들의 형태와 특징을 관찰하기 위해서는 염색하여 현미경으로 관찰하여야 한다. 이때 사용되는 염색시약은 벤젠고리를 함유한 유기화합물과 발새단인 Chromophore가 결합되어 형성된 Chromogen에 이를 이온화시켜 착색기능을 부여하는 Auxochrome group을 결합시킨 물질로 구성되어 있다. 즉 이 염색시약이 이온화되면 그 특성에 따라 Chromogen 부분이 음이온을 띠거나 양이온을 띠게 되며 전자를 산성 염색시약(Acidic dyes), 후자를 염기성 염색시약(Basic dyes)이라 한다.

<중 략>

Ⅱ. Material
Streptococcus thermophilus , E. coli
1% crystal violet, 1% methylene blue solution, Sodium bicarbonate(NaHCO3),
2.5% Safranin, Gram's(Lugol's) iodine, 95% Ethanol
백금이, alcohol lamp, slide glass, filter paper, microscope, ×100 lens, immersion oil,
xylene, 증류수, lens paper

Ⅲ. Method
1. 세균의 도말(smear)
① 백금이로 균체를 따서 물 한 방울을 떨어뜨린 슬라이드에 접종시킨다.
※ 물을 많이 떨어뜨리면 건조시키는데 많은 시간이 걸리므로 주의한다. 또 균을 너무 많이 취하면 관찰시에 균이 겹쳐서 어려우므로 매우 소량을 사용하도록 한다.
② 백금이로 희석된 균체를 넓게 분산시킨다.
③ 실온에서 수분을 증발시키고 alcohol lamp로 살균, 고정시킨다.
(불꽃의 중간 지점을 약 2~3초가량 통과시킨다.)
※ 수분을 증발시킬 때 계속적으로 백금이로 분산시켜 주어야 균체가 한 곳으로 몰리지 않는다. Alcohol lamp 불꽃을 통과할 때는 너무 오래하여 균이 타버리지 않도록 한다.

참고 자료

박석기, 미생물학실험, 신광문화사, 1995,
미생물학편찬위원회, 미생물학실험, 월드사이언스, 2000,
한국미생물학회, 미생물학실험서, 을유문화사, 1998,
하대유, 미생물학, 신일상사, 1997,
Madigan, 대학미생물학, 탐구당, 2000,

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