형질전환 (Transformation)

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목차

1. 서론
1) Transformation이란
2) Transformation의 종류

2. 재료 및 방법
1) Transformation에 사용되는 시약과 반응액
2) Transformation 실험 방법

3. 결과 및 고찰
1) 실험결과
2) 고찰

본문내용

1. 서론
-Transformation 이란
외부로부터 주어진 DNA에 의하여 생물의 유전적인 성질이 변하는 일을 말한다. 1928년 영국의 그리피스가 폐렴쌍구균을 이용하여 실시한 실험이 계기가 되어 발견되었으며, 폐렴쌍구균, 대장균 등의 박테리아에서 볼 수 있는 현상이다. 최근에는 많은 실험을 통해 식물이나 동물등에 새로운 유전자를 이식한 형질전환 생물이 탄생 되고 있다.

-Transformation의 종류

형질전환 실험에 의하여 유전자의 본체가 DNA라는 것이 밝혀졌으며 고등생물과 같은 경우에는 자연적으로 형질전환이 일어나는 경우가 드물지만, 인공적으로 외부DNA를 삽입하여 형질전환 식물이나 동물을 만들 수 있다. 형질전환될 세포를 형질전환 수용세포 라고 하며, 이세포는 접합과 형질 도입을 통해 새로운 유전형질을 확산시킬 수 있다. 형질전환을 선별하는 방법에는 흔히 쓰이는 항체저항성이나, 영양요구를 사용하는 방법이 있다. 복제기술에서 선별할때에는 베타-galactosidase를 암호화 하는 lacZ유전자를 사용하는 blue white screen의 방법이 쓰인다. 또 다른 방법으로는 녹색형광 단백질(GFP)을 사용하는 방법이 있다.

2. 재료 및 방법
-Transformation 에 사용되는 시약과 반응액

IPTG (isopropyl-1-thio-β-D-galactopyranoside)
대장균 락토오스 오페론의 효소합성을 유도하는 강력한 유도물질로써 배지에 10¯⁴M정도 넣으면 대장균의 세포막에 존재하는 미량의 갈락토시드 투과효소에 의해 균체 내로 들어가게 된다. 그렇게 되면 락토오스 억제제와 결합해 억제제의 입체구조를 바꾸어 작동인자와의 결합을 저지시킨다, 따라서 대장균의 베타-갈락토시다아제의 합성을 강력히 유도하게 된다.
X-gal (5-bromo-4-Chloro-3-indolyl-beta-D-galactopyranoside)
베타-galactosidase에 의해 lactose처럼 인식이 되며 분해된다. 또한 분해 되었을시에 푸른색을 나타나게 된다.

참고 자료

Terms.naver.com
http://en.m.wikipedia.org/
scienceall.com
http://academic.pg.cc.edu/~kroberts/Lecture