미생물학 transformation 형질전환 실험 레포트

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목차

1.실험제목(title)
2.실험날짜(date):
3.실험목적(purpose):
4.실험 준비물(material-reagent, instrument)
5.실험 방법(method)
6.실험 결과(result)
7.실험 고찰(discussion): 실험에 대한 고찰도 추가하기
8.참고문헌(reference)

본문내용

실험제목(title): Transformation
· 실험날짜(date):
· 실험목적(purpose): plasmid DNA를 competent cell에 도입하여 colony를 관찰함으로써 transformation과정을 이해한다.
· 실험 준비물(material-reagent, instrument)
피펫, LB agar 배지, spreader, DH5 alpha, 항온수조, 얼음수조, e-tube, dilution한 DNA

· 실험 방법(method)
① DH5 alpha를 얼음이 담긴 수조에 두고, e-tube를 얼음에 두어 차갑게 유지한다.
② 20μl의 DH5 alpha를 e-tube에 넣는다.
③ DNA 2μl을 DH5 alpha에 넣는다. (최대한 competent cell이 충격을 받지 않도록 주의한다.)
④ 얼음에서 30분간 incubation한다.
⑤ 42℃에서 90sec간 incubation한다.
⑥ 얼음에서 5분간 incubation한다.
⑦ 37℃에서 데운 항생제가 들어있는 LB agar 배지에 competent cell 20μl을 넣고 spreading한다.
(control group)
⑧ 37℃에서 데운 항생제가 들어있는 LB agar 배지에 transformation한 dna를 20μl 넣고 spreading한다.
⑨ 37℃에서 overnight으로 배양한다.

· 실험 결과(result)

· 실험 고찰(discussion): 실험에 대한 고찰도 추가하기
competent cell은 온도와 충격에 민감하므로 실험 시 주의해서 다뤄야한다. 또한 배지에 spreading시 배지가 파이지 않도록 조심해서 다뤄야 한다.

참고 자료

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https://en.wikipedia.org/wiki/PBR322