PCR과 전기영동

소개

"PCR과 전기영동"에 대한 내용입니다.

목차

1. Inroduction

2. Methods and Materials
2-1. PCR의 Materials
2-2. PCR의 Methods
2-3. 전기영동의 Materials
2-4. 전기영동의 Methods

3. Results

4. Discussion

5. Conclusion

본문내용

1. Inroduction
PCR(polymerase Chain Reaction)은 질병을 진단하기 위한 수단으로 신속하도 감도와 특이성이 뛰어나 DNA를 측정하는데 이용되고 있다. 그래서 많은 연구가들이 통상적인 추출방법 즉, phenol추출 및 에탄올 침전에 의해 DNA를 추출 정제하여 PCR을 이용하고 있다.
5'뉴클레아제(Nuclease) PCR 분석은 증폭 반응 동안 하이브리드화(Hybridization) 및 이중 표지 형광 프로브(Probe)의 절단에 의해 특정 PCR 생성물의 축적을 검출한다. 프로브는 리포터 형광염료 및 퀀처염료가 부착된 올리고 뉴클레오타이드(Nucleotide)이다. 리포터 형광강도의 증가는 프로브가 표적 PCR 산물에 하이브리드화 되고 Taq DNA의 5 '→ 3' 핵산 분해 활성에 의해 절단되었음을 나타낸다.
프로브가 PCR 동안 주형 가닥에 유사성측정(Hybridization) 될 때 Taq DNA 중합 효소에 의한 절단의 가능성이 높아짐으로써 더 큰 신호가 야기된다는 것이 제안되었다. 3'- 말단 뉴클레오티드에 결합 된 소 광체염료를 갖는 프로브는 또한 상보적 가닥에 유사성 측정될 때 리포터 형광 강도의 증가를 나타냈다. 따라서, 반대편 말단에 부착된 리포터 및 켄처 염료를 갖는 올리고 뉴클레오타이드는 동종 혼성화 프로브로서 사용될 수 있다.
3'- 말단 뉴클레오티드에 부착 된 소 광체 염료를 갖는 프로브는 내부적으로 표지 된 프로브보다 5 '뉴 클레아 제 PCR 분석에서 더 큰 신호를 나타냈다. 프로브가 PCR 동안 주형 가닥에 유사성측정이 될 때 Taq DNA 중합 효소에 의한 절단의 가능성이 높아짐으로써 더 큰 신호가 야기된다는 것이 제안되었다.
3'- 말단 뉴클레오티드에 결합 된 소 광체염료를 갖는 프로브는 또한 상보적 가닥에 유사성을 측정될 때 리포터 형광 강도의 증가를 나타냈다.

참고자료

· 다중 피크의 영역 성장 기법에 의한 전기영동 젤의 영상분석 (정보과학회논문지: 소프트웨어 및 인용 제 20권 제 5호. 2003)
· 반대편에 형광염료를 갖는 올리고 뉴클레오타이드는 PCR 생성물 및 핵산 혼성화 검출에 유용한 켄칭 프로브 시스템을 제공한다. (Genome Research 1995. 4 - Cold Spring Harbor Laboratory)
· Agarose gel 전기영동 - lab of molecular Biology.
· 생명과학대사전