PCR과 전기영동 결과레포트

목차

1. 도구 및 시약
2. 실험 과정
3. 실험 이론
4. 실험 결과
5. 고찰
6. 참고문헌

본문내용

1. 도구 및 시약
1) PCR
PCR tube, Template DNA 1µL, F-primer 1 µL, R-primer 1 µL, dNTP 2 µL, Buffer 2 µL, Taq polymerase 0.2 µL, 증류수 12.8 µL, 원심분리기

2) 전기영동
삼각플라스크, agarose, TAE buffer, 전자레인지, 증류수, Red-safe 용액, cast, PCR product DNA ladder, UV 조사기

2. 실험 과정
1) PCR
① PCR을 진행하기 위해 PCR 재료들을 준비한다.
② PCR tube에 재료들을 혼합하여 잘 섞어주고, 원심분리기를 이용하여 용액을 가라앉힌다.
③ PCR 기계에 아래의 조건을 설정한 후 PCR을 진행시킨다.
변성 결합 신장
94℃ - 94℃ - 62℃ - 72℃ - 72℃
2min 20sec 10sec 30sec 2min
⌞ 30 cycle ⌟

2) 전기영동
① 삼각플라스크에 2g의 Agarose와 100mL의 TAE buffer를 넣어준다.
② Agarose가 완전히 녹을 때까지 전자레인지를 이용해 가열한다 (2-3분)
③ 굳지 않을 정도로 식힌 후 Red Safe 5 µL를 넣고 잘 섞는다
④ Gel tray에 용액을 부은 후 comb를 꽂고 굳힌다 (약 20분)
⑤ 완전히 굳은 gel에서 comb를 제거하고, 전기영동 탱크에 넣은 후 TAE buffer를 붓는다.
⑥ PCR 결과물에 DNA loading dye 4 µL를 넣고 잘 섞어준다.
⑦ DNA marker와 PCR 결과물을 gel의 홈에 조심스럽게 넣어준다.
⑧ Voltage를 주어 20분간 전기영동을 한 후 gel을 꺼내 UV조사기를 통해 밴드를 확인한다.

3. 실험 이론
Ⅰ. 유전물질
① 유전물질
유전 형질과 비슷한 단어로, 유전 기능을 가진 물질로 부모의 형질을 자손에게 물려주는 것을 뜻한다. 유전 물질은 DNA와 염색체로 DNA는 머리카락, 소화 효소 등 우리 몸을 형성하고 있는 단백질을 만들 때 가장 근원이 되는 요인이다.

참고 자료

http://study.zum.com/book/15238#anchor2
https://www.cheric.org/files/education/cyberlecture/e200112/e200112-1001.pdf
https://www.ibric.org/myboard/read.php?Board=exp_qna&id=475346
https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=5568800&cid=61233&categoryId=61233
https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=5144868&cid=61232&categoryId=61232
https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=927698&cid=51007&categoryId=51007#TABLE_OF_CONTENT5
https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=296421&cid=60262&categoryId=60262
Lisa A. Urry, Michale L. Cain, Steven A. Wasserman, Peter V. Minorsky, Jane B. Reece/ 2017 / 캠벨 생명과학 포커스 / ㈜바이오사이언스출판 / 262~265p