* 본 문서(hwp)가 작성된 한글 프로그램 버전보다 낮은 한글 프로그램에서 열람할 경우 문서가 올바르게 표시되지 않을 수 있습니다. 이 경우에는 최신패치가 되어 있는 2010 이상 버전이나 한글뷰어에서 확인해 주시기 바랍니다.
소개글
"전기영동"에 대한 내용입니다.목차
1. Title2. Purpose
3. Materials
4. Methods
5. Results
6. Discussion
1) 전기영동법의 원리
2) DNA 전기영동 결과 분석 및 비교 & 밴드의 끌림이 일어난 원인 파악
3) 플라스미드 DNA
7. Projects
1) Serial dilution에 대해 조사하시오.
2) 본 실험에서는 사용하지 않았지만, EtBr이 무엇인지 조사하시오 (전기 영동에서의 역할, toxic한 이유)
본문내용
4. Purpose : Agarose gel의 구성과 전기영동의 의미를 이해하고 DNA의 크기 및 구조에 따른 결과 차이를 이해한다.5. Materials : PCR product, 6X loading dye, micro pipette, tip, tank, agarose, EtBr, stirrer, magnetic bar, 플라스크, DW, 1X TAE buffer, size marker
6. Methods
< 1% Agarose gel 만들기 >
① 1× TAE 용액 100㎖에 Agar를 1g을 섞어서 1%로 만든다.
② 전자레인지를 사용하여 열을 가해서 완전 용해시킨다(또는 magnetic bar와 stirrer를 이용하여 녹일 수 있으나, 전자레인지를 활용하는 것이 제일 용이하다).
③ EtBr를 Agarose gel 용액에 1X만큼 넣어준다(EtBr는 Sample, Gel, 별도 염색하는 경우가 있으나, 가장 효과적인 방법은 gel에 넣어주는 것으로 본다).
④ 뜨거운 것을 약간 식힌 후 틀에 부어준다.
⑤ comb을 끼워준다.
⑥ 완전하게 굳으면 틀에서 떼어내고 1× TAE 용액에 담가 보관한다.
<중 략>
<전기영동>
① Well의 가장 왼편에 size marker를 건다.
② well의 가장 왼편에 loading dye와 DNA를 섞어서 주입한다.
(6X loading dye 1 ㎕ 와 DNA 6 ㎕를 혼합)
③ 전기를 50mV-100mV를 걸어준 후 20분 정도 기다린다.
④ DNA를 UV를 통해 확인한다.
※ DNA loading dye
Agarose의 well에 DNA를 넣어줄 때 DNA를 무겁게 하여 agarose의 홈으로 이동하여 하며 푸른빛을 띠면서 DNA가 전기영동 된 정도를 알 수 있다.
ⓐ DNA 분자의 크기가 클수록 느리게 이동한다.
ⓑ Agarose의 농도가 높을수록 느리게 이동한다.
참고 자료
네이버 지식백과, 연속희석(법) serial dilution (생명과학대사전, 초판 2008, 개정판 2014.강영희) (2021.05.10.) https://terms.naver.com/entry.naver?docId=2693098&cid=60261&categoryId=60261Anupama Sapkota, Microbe Notes, Basic Microbiology » Serial dilution- definition, formula, calculator, procedure, uses, (May 27, 2020)
『전기영동 최신 프로토콜』, 편집부(강호일 역), 월드사이언스, 2006, p.14-25
네이버 지식백과, 두산백과, 브로민화 에티듐 (2021.05.10.) https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=4357380&cid=40942&categoryId=32308
네이버 지식백과, 두산백과, 겔전기영동 (2021.05.10.) https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=1261192&cid=40942&categoryId=32251
네이버 지식백과, 미생물학백과, 겔 전기영동 (2021.05.10.)
https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=5144700&cid=61232&categoryId=61232
네이버 지식백과, 분자 세포생물학백과, 젤 전기영동 (2021.05.10.) https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=5751214&cid=61233&categoryId=61233
이복주 (한국기술교육대학교 컴퓨터공학과 ) ; 문혁 ( 한국기술교육대학교 컴퓨터공학과 ) ; 박종훈 ( (주)넷코덱 ) ; 최영규 ( 한국기술교육대학교 컴퓨터공학과), “PCR Gel 전기영동 이미지 분석을 위한 레인검출 및 추적 알고리즘”, 한국정보처리학회 2017년도 춘계학술발표대회 2017 Apr. 27 , 2017년, pp.577 - 580