[분자생물학] DNA preparation

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많은 방법은 플라스미드 DNA를 고립시키기 위하여 이용되었다, 그러나 특히 많은 견본을 추출할 때 그중 몇몇은 시간이 걸린다. 여기에서, 우리는 플라스미드 준비 (PH 8.0에 적출)의 알칼리성 세포의 용해 방법에 근거한 플라스미드 DNA 적출을 위한 급속한 의정서를 개발했다. 이 새로운 방법을 사용하여, 좋은 플라스미드 준비는 대략 1 시간에서 할 수 있다. 플라스미드는 실험실에 있는 어떤 연속적인 분자 신청든지를 위해 적당하다. 오염을 피하고 적출 동안에 플라스미드 수확량 및 질을 확대하는 권고를 적용해서, 이 의정서는 특히 많은 견본을 분석할 때 귀중한 참고일 수 있었다.

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플라스미드의 강수를 위해 절대 에타놀은 자주 사용한다. 이 절차에서는 또한 플라스미드의 좋고 높은 수확량을 주는 이소프로판올은 (단계 7) 이용되었다. 가치있다 이소프로판올이 에타놀 보다는 매우 더 싸다는 것을 주의하기 위하여. 점성 플라스미드 준비에 마지막으로 지도하는 절차가 찬 조건 (8°C에 4) 하에서 실행되는 경우에 다당류 및 다른 이차 화합물 및 세포 파편은 플라스미드 DNA로 세포 붕괴 co-precipitate 후에 쉽게 풀어 놓았다.

참고자료

· 분자생물학회, 분자생물학, 아카데미서적, 1997
· 심웅섭, 분자생물학, 월드사이언스, 1999
· 한국생물공학회, 생물공학 실험서, 자유아카데미, 2000
· http://biochemistry.yonsei.ac.kr/biochem_molecular/