전기영동 Electrophoresis

목차

1. Subject
2. Introduction
3. Material &　Methods
4. Results
5. Discussion
6. Reference

본문내용

1. Subject
Sodium Dodecyl Sulfate - Polyacrylamide Gel Electrophoresis (SDS-PAGE)를 이용한 미지 단백질 정량

2. Introduction
1) 전기영동(Electrophoresis)
전기영동이란 하전된 입자가 전기장에서 양극 또는 음극 쪽으로 이동하는 현상을 말한다. 이때 이동하는 속도는 입자의 전하량, 크기와 모양, 용액의 pH와 점성도, 용액에 있는 다른 전해질의 농도와 전하량, 지지체의 종류 둥 여러 가지 요인에 의해 결정된다. 따라서 어떤 용액과 지지체에서 하전된 입자의 이동속도는 분자 자체의 성질에 따라서 결정된다. 그러므로 전기이동법은 아미노산, 단백질, 핵산들과 같은 하전된 물질들을 분리하는 데 매우 효과적인 수단으로 이용된다. 그러나 분리 뒤에 지지체에서 목적 단백질을 분리해 내는 만족할 만한 방법이 없고, 미량 밖에 처리할 수 없으며, 전기영동으로 실활되는 경우가 많아 대부분 분석에만 사용된다.

2)SDS-PAGE (Sodium Dodecyl Sulfate - Polyacrylamide Gel Electrophoresis)
황산도데실나트륨 폴리아크릴아미드 겔 전기이동법(SDS-PAGE)은 특히 단백질의 크기를 결정할 때와 단백질이 단위체(monomer)인지 그렇지 않으면 소중합체(oligomer)인지를 결정할 때 유용하게 사용한다. SDS-PAGE는 중성 pH에서 황산도데실나트륨(SDS)과 β-메르캅토에탄올이 존재하는 조건에서 수행된다. SDS는 단백질과 결합하여 단백질의 고유한 3차구조를 파괴하며 무작정한 코일(random coil) 구조를 가지게 하며, 단백질이 소중합체일 경우에는 구성
[SDS-PAGE의 구조]
소단위체들로 해리시킨다. 이러한 단백질의 변성은 소단위체 내에 또는 소단위체간에 생성된 이황화물 다리결합을 환원시키는 β-메르탑토에탄올에 의하여 촉진된다. 중성 pH에서는 단백질 자체의 전하가 극소화되며 SDS는 단백질의 두 아미노산 잔기당 1개씩 결합하여 단백질에 음전하를 부여한다.

참고자료

· http://nationaldiagnostics.com/article_info.php/articles_id/6
· 한국생화학회, 1999, 실험생화학, 탐구당, 서울, p.95~110
· David L. Nelson and Michael M. Cox(2000), Lehninger 생화학(3rd), p.136~137, 서울외국서적, 서울
· 안용근(2000), 효소 단백질 정제법(1st), p235, 241~244, 양서각, 서울