[A+ 리포트] - 아가로스 겔 전기영동 Agarose Gel Electrophoresis (분자생물학실험)

소개글

본 리포트는 아가로스 겔 전기영동에 관한 실험 리포트입니다.

아가로스 겔 전기영동의 이론적 배경에 관한 내용은 제 페이지에서 을 찾아주시면 되겠습니다.

토의란에는 LB agar의 제작에 관한 내용이 탑재되어 있습니다.

목차

1. 제목

2. 목적

3. 재료

4. 방법
가. 아가로스 겔 만들기
나. 아가로스 겔 전기영동
다. Gel Doc을 이용한 PCR 산물의 증폭 여부 확인 및 gel cutting

5. 결과

6. 토의
가. LB agar
1) LB agar의 개념 및 사용
2) LB agar plate의 구성 및 제작
3) 항생제를 포함하는 LB agar plate 제조

7. 고찰

8. 참고문헌

본문내용

1. 제목(Title) : Agarose Gel Electrophoresis 아가로스 겔 전기영동

2. 목적(Purpose)
- 아가로스 겔 전기영동의 개념과 원리 그리고 구성을 알 수 있다.
- 겔 전기영동에 사용되는 아가로스 겔을 제작할 수 있다.
- 아가로스 겔 전기영동 후 Gel Doc을 통해 PCR 산물의 증폭 여부를 확인할 수 있다.

3. 재료(Materials)
- 실험용 라텍스장갑, 마이크로피펫(P10, P20), 피펫팁, 50X TAE 용액, 증류수(D.W), 메스실린더(500ml, 50ml), para film, 삼각플라스크, 전자저울, weighing paper, 시약스푼, 아가로스(파우더), 전자레인지, NEOgreen(20,000X), gel maker stand, gel tray, comb, PCR 산물(product), DNA ladder, ep tube, Rack, 네임펜, 6X sample buffer(loading dye), vortexer, centrifuge, 변압기, 전기영동장치(MupidⓇ-2plus), 타이머(휴대폰), 스트레치 필름(비닐랩), Gel Doc(NaBI), 면도날, 70% Ethanol.

4. 방법(Method)
가. 아가로스 겔 만들기
1) 실험 시작 전 양측 손에 실험용 라텍스 장갑을 착용한다.
2) 실험이 진행될 테이블을 70% Ethanol로 소독한다.
3) 500ml 메스실린더에 증류수 490ml를 취하고 미리 준비된 50X TAE 용액으로 나머지 10ml를 채워 1X TAE buffer 500ml를 만든다.
4) 과정 3)에서 제작한 1X TAE buffer 25ml를 멸균된 삼각플라스크에 가한다.
5) 500ml 메스실린더의 입구는 para film으로 감싼다.
6) 전자저울과 weighing paper 그리고 시약스푼을 이용하여 agarose 0.25g을 취하여 과정 4)의 삼각플라스크에 가한다.
7) 삼각플라스크를 전자레인지에 넣고 1분 가량 돌린다.

참고 자료

“전기영동의 표준 MupidⓇ”, TaKaRa CMS, http://cms.takara.co.kr/file/brochure/Mupid_New.pdf, www.takara.co.kr.
“LB Broth with agar(Miller) L3147”, MERCK Sigma-Aldrich, https://www.sigmaaldrich.com/KR/ko/product/sigma/l3147?gclid=CjwKCAjw4c-ZBhAEEiwAZ105RbnHUX1ChBKm9faoQn_9rXBRvHD3CZb7AMQqgAfPtlQ1K_BZQMoK4BoCKvYQAvD_BwE&gclsrc=aw.ds, www.sigmaaldrich.com.
“Stock Solution(100mg/ml Ampicillin Stock Solution)”, Gold Biotechnology, https://www.goldbio.com/documents/1021/Ampicillin+Stock+Solution.pdf, 2022.07, www.goldbio.com.
“Production Information_AMPICILLIN”, MERCK Sigma-Aldrich, a9518pis.doc, www.sigmaaldrich.com.
“Principles and Practice of Agarose Gel Electrophoresis”, KOREASCIENTIFICS, ED101.pdf, www.koreasci.com.