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분자생물학 실험 보고서-DNA재조합

분자생물학 실험 보고서1. 서론재조합 DNA를 만들고 세균에 transformation 시켜서 삽입여부를 확인한다.①②③④amp 배지(insert)(vector)① 제한효소로 절단 후 purification1) insert는 NheⅠ,XmaⅠ을 이용, vector 는 XbaⅠ, XmaⅠ을 이용해서 절단한다. 다른 제한효소를 사용해서 self ligation을 방지할 수 있다. (directional cloning)insert(4731bp)800bp 사용NheⅠvector7100bp 사용XmaⅠXmaⅠXbaⅠNheⅠ과 XbaⅠ는 절단 부위가 다르지만 hangover가 같아서 ligation이 가능하다.2) 1% agarose gel에서 전기영동 후 필요한 부분을 잘라 purification을 통해 분리한다.◎ 전기영동위쪽에는 (-)전극, 아래쪽에는 (+)전극을 연결해서 (-)하전된 DNA 가 (+)극으로 이동하는 현상을 이용해서 크기에 따라 분리한다.같은 모양 DNA일 경우 크기가 작을수록 빠르게 이동한다.◎ silica columnchaotropic salt가 존재할 경우 DNA가 silica column과 강하게 결합하는 성질 을 이용한다.column에 결합한 DNA는 pH를 높여주 면 분리시킬 수 있다.② ligase를 이용해서 연결시킨다.self ligation을 방지하기 위해서 vector에 phosphatase를 처리한 후에ligation을 시킨다.③ ligation을 한 DNA를 competent cell에 transformation 한다.◎ transformation먼저, competent cell을 만들기 위해ca ^{2+}과 같은 multivalent ion 존재 하에 incuvation 한다.그 다음, competent cell과 DNA를 37-42℃에서 heat shock을 주면 DNA가 세포 안으로 들어가게 된다.④ transformation 한 세균을 암피실린배지에서 배양 후 colony에서 DNA를 얻고 제한효소로 잘라서 제대로 ligation이 되었는지 확인한다.◎ miniprep- 원심분리 후 상층액을 제거 하고 얻은 pallet에 3가지 buffer를 첨가한다.(resuspension buffer(세포벽제거), lysis buffer (세포막제거/DNA변성),neutralization (pH복구,chromosomal DNA는 엉기고 플라스미드 DNA는 재생됨)- 원심분리 후 상층액을 column으로 옮긴다. Etoh 첨가해서 원심분리 후 아래 나온 용액 버린다.- Elution buffer 넣어서 column으로부터 DNA를 얻는다.⑤ PCR:특정 DNA부위를 반복 합성하여 시험관 내에서 원하는 DNA분자를2 ^{n}배로 증폭 해서 Miniprep DNA 의 전체 yield 계산한다.- denaturation : DNA변성- annealing : primer 결합- elongation : DNA합성2. 결과① insert 와 vector를 제한효소로 자르고 전기영동한 결과이다.첫 번째는 insert를 제한효소로 자르고 전기영동한 결과로 약 4000과 800bp크기 로 잘린 것을 확인할 수 있다. (아래쪽 800bp DNA는 ligation에 사용한다.)두 번째는 vector를 제한효소로 자르고 전기영동한 결과이다. 제한효소로 자를경우 약7100과 20bp로 잘리게 되는데 20bp는 전기영동시 겔 밖으로 나가서 관찰 되지 않고 7100bp DNA만 관찰된다.② insert 와 vector를 제한효소로 자르고 전기영동한(①) 후,필요한 부분(insert 800bp 와 vector 7100bp)만 잘라 purification을 통해 분리 후 확인한 결과이다.vector가 완전히 잘리지 않은 것과 잘린 것이 섞여있어서 전기영동한 부분에서 두 줄이 나온 것 같다.③ 밴드 intensity를 vector : insert = 2:1 로 가정하고, vector와 insert 농도비율 이 1:3이 되도록 ligation을 setup 한다. (계산결과 vector=3mu l, Insert=2mu l )→ 계산ⅰ) 1kb+ladder(100ng/mu l)를 5mu l loading한 것의 밴드 당 20ng의 DNA가있다고 가정하면, vector의 양 : insert의 양 = 2:1 이라고 가정할 수 있다.ⅱ) 계산법 2를 사용DNA size가 vector : insert = 7100 : 800 = 8.9 : 1농도비율(band intensity/size)은 vector : insert = 1 : 4.5ⅲ) vector 와 insert의 농도 비율이 1:3이 되도록 해야 한다.따라서 vector를 insert의 1.5배 넣어주어야 한다. (vector=3mu l, Insert=2mu l)④ 계산결과를 이용해서 ligation 시키고 transformation한 다음, colony에서 DNA를 얻고 제한효소(XmaⅠ, AgeⅠ)로 잘라 ligation이 되었는지 확인한 결과 이다.colony를 얻어서 XmaⅠ, AgeⅠ으로 DNA를 잘랐는데 self ligation 된 vector는 AgeⅠ제한효소로 잘리지 않아서 밴드가 하나로 나오게 되었다.앞에 실험(②)에서 한 전기영동에서 vector가 완전히 잘리지 않은 것이 보였는 데 그래서 self ligation 된 colony선택 확률이 높아진 것 같다.Thresholdcycle(ΔCt)14.55 (학생1)36.93 (학생2)32.52 (학생3)33.12 (학생4)15.4 (학생5)⑤ 클로닝한 plasimid DNA로 Real time quantitative PCR을 한 결과이다.앞 실험(④)에서 클로닝이 되지 않고 self ligation 된 vector만 나와서PCR이 되지 않았다.PCR을 할 때 primer가 하나는 vector에 다른 하나는 insert에 위치해 있기때문에 클로닝이 안 되었을 경우 PCR이 되지 않는다.⑥ Miniprep DNA 의 전체 yield 계산 (ΔCt=14.55 (고원비)이용)ⅰ) standard curve plottingThresholdcycle,ΔCt(well)N/A (10^9)9.49 (10^8)16.48 (10^7)20.46 (10^6)24.14 (10^5)27.95 (10^4)34.12 (D.W)sample plasmid DNA의 Ct value 가 14.55이다.14.55=-1.976ln(x)+46.787 -->x=12 TIMES 10 ^{6} (8mu l에 들어있는 DNA의 copy number)따라서 농도는1.5 TIMES 10 ^{6} copies/ mu l 이고, sample DNA를10 ^{4}배 묽혔으므로, original miniprep 농도는1.5 TIMES 10 ^{10} copies/ mu l 이다.ⅱ) 아래 식을 이용해서 conc.(g/mu l)를 구한다.{conc.(g/ mu l)} over {size(bp) TIMES 660g/mol BULLET bp} TIMES (6.02 TIMES 10 ^{23} copies/mol)=conc.(copies/ mu l)size=8000bp, conc.(copies/mu l)=1.5 TIMES 10 ^{10} copies/ mu l를 넣어서 계산하면conc.(g/mu l) =131 TIMES 10 ^{-9}g/mu l 이 나온다.Miniprep DNA의 전체 volume은 50mu l이므로총 yield는 131ng/mu lTIMES 50 mu l = 6.5mu g 이 된다.3. 고찰결과 ②에서 전기영동을 했을 때 vector에서 두 줄이 나왔는데 vector가 완전히 잘리지 않은 것과 잘린 것이 섞여있어서 두 줄이 나온 것 같다. 그 이유를 생각해 봤는데 실험을 할 때 제한효소를 넣고 기다리는 시간을 충분하게 주지 못한 것 같았다. 각자 시간을 재면서 했어야 하는데 처음 제한효소를 넣은 사람에 맞춰서 시간을 재면서 실험을 해서 마지막에 제한효소를 넣은 경우 충분한 시간을 주지 못한 것 같다.결과 ④에서 ligation이 되었나 확인하기 위해서 제한효소로 잘라 보았는데 잘리지 않았다. 앞 실험에서 한 전기영동에서 vector가 완전히 잘리지 않은 것이 보였는데 그래서 self ligation 된 colony를 선택하게 된 것 같다. 다른사람 것에 비해 colony가 너무 많아서 self ligation 된 것이 많겠구나 생각했는데 그래서 colony 선택 시에 self ligation 된 것을 선택할 확률이 더 높아진 것 같다.ligation이 되지 않았기 때문에 PCR이 제대로 되지 않았다.PCR을 할 때 vector에 위치하는 forward primer와 insert에 위치하는 reverse primer 이렇게 primer 한 쌍이 필요하다. 그런데 insert가 없고 vector만 있기 때문에 원하는 부분을 증폭시킬 수 없었다.appendix1.재료 및 방법① buffer ( 1M tris-HCl (pH7.5) / 50X TAE) 와세균배양액 ( LB media / LB+Amp plate)을 만든다.② insert와 vector에 각각 제한효소로 자르고 전기영동 후 필요한 부분을 자른다.- insert는 NheⅠ,XmaⅠ로 자르고 vector는 XbaⅠ, XmaⅠ로 자른다.- vector의 경우 추가적으로 phosphatase 처리한다.- 1% agarose gel 만들어서 전기영동한다.③ 제한효소로 자른 DNA조각을 agarose gel로부터 purification을 통해 분리한다- DNA를 포함하는 agarose gel과 gel extraction buffer를 같이 넣고incubation한다.- column에 solution 원심분리하고 아래 나온 용액은 버린다.- column 에 wash buffer 넣고 원심 분리 후 아래 나온 용액은 버린다.- column에 elution buffer 넣고 원심분리 후 나온 DNA를 이용해서 전기영동?

자연과학| 2020.09.16| 9페이지| 2,000원| 조회(266)

분자생물학, 일반생물학, DNA재조합

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미생물 및 분자생물학 실험 보고서_spread plate method,hemocytometer,disinfectants on microorganism & kirby-bauer disk method

미생물 및 분자생물학 실험 보고서1. spread plate method / direct count by hemocytometer2. disinfectants on microorganism & kirby-bauer disk method1. 실험원리1) spread plate method / direct count by hemocytometer식품에 있는 미생물을 수를 세서 변질 또는 오염의 위험이 있는지 아닌지를 판단 할 수 있다. 세균 수를 세는 방법에 여러 가지가 있는데 그 중에서 균을 배양해 서 직접 세는 spread plate method 와, 현미경과 hemocytometer을 이용해서 직접 세는 방법을 이용해서 세균 수를 세었다.2) disinfectants on microorganism & kirby-bauer disk method① 소독제소독제(disinfectants) 는 병원미생물을 사멸시키기 위해 인체의 피부, 점막의 표면이나 기구, 환경의 소독을 목적으로 사용하는 화학물질을 총칭하며 정균작용보다는 살균작용을 나타낸다.② kirby-bauer disk method감염증의 진단과 치료에 있어서 가장 효과적인 항균제의 선택은 매우 중요한데 그 중에 가장 널리 쓰이는 것인 kirby ? bauer 법이다. 각각의 항생물질의양을 달리해서 다른 균에 처리한 후 각각의 항생제가 농도에 따라 균에 미치는 영향을 알아볼 수 있다. 디스크에서 멀리 떨어질수록 항생제 농도가 낮아지므로 디스크에서 멀리 떨어진 곳에도 균이 자라지 않게 되면 적은 양으로도 효과를 볼 수 있는 좋은 항생제이다.2. 실험결과ABCD100배 희석100배 희석100배 희석1) spread plate methodMicrococcus luteus 균액(A)를 희석해서 B, C, D 균액을 만들고 각각을 0.1mL 도말한 후 배양한 결과이다.A, B는 균이 너무 많이 자라서 셀 수 없고C와 D의 균의 개수를 세서 CFU (colony forming unit) 를 계산 했다.(CFU/ml 은 1ml 당 colony를 형성하는 균의 수를 의미한다.)C의 colony는 약1000개 (5등분 후 한 부분만 세서 5를 곱했다.)D의 colony는 36개 이다.- CFU 계산 : colony개수 × 희석배수 × 10 (0.1mL 도말했는데 계산은 1mL 기준이니까 10곱함)- C에서 CFU 계산 : 1000 colony ×10 ^{4} × 10 = 10 ×10 ^{7} CFU/mL- D에서 CFU 계산 : 36 colony ×10 ^{6} × 10 = 36 ×10 ^{7} CFU/mL초기시료 (A)의 1mL 당 10 ×10 ^{7} ~ 36 ×10 ^{7} 의 균이 colony를 형성함을알 수 있다2) direct count by hemocytometer1234균액 D 10mu l 를 counting chamber 에 넣고 현미경으로 관찰한 결과이다.균의 농도를 구하려면 N × D ×10 ^{4} cells/mlN : 균의 개수 ( (1+2+3+4번칸 균의 개수)÷4 )D : 희석도10 ^{4} : ml 당 세균수를 구해야 함으로10 ^{4}을 곱해줌 (가로 × 세로× 높이 = 0.1×0.1×0.01 =10 ^{-4}cm ^{3} )1번칸 : 15개 / 2번칸 : 37개 / 3번칸 : 7개 / 4번칸 : 17개 -------> N = 19균액 D를 이용했으므로 D =10 ^{6}19 ×10 ^{10} cells/ml따라서 균의 농도는 19 ×10 ^{6} ×10 ^{4} =spread plate method에서 구한 것과는 차이가 많이 난다.지름(cm)항생제균항생제지름(cm)21.8거의 없음D1D10D100EA1A10A1002.61.8거의 없음2.61.6거의 없음CL1CL10CL100ER1R10R1002.72.21.31.61.41.1D1D10D100BCA1A10A1001.20.6없음22이지만 완전사라지지 않음1.3CL1CL10CL100BCR1R10R1002.221.13) disinfectants on microorganism & kirby-bauer disk methodE : Escherichia coliA1 : Amoxicillin 20mu g/mlD1 : Doxycycline 20mu g/mlBC : Bacillus cereusA10 : A1 10배 희석D10 : D1 10배 희석A100 : A1 100배 희석D100 : D1 100배 희석CL 1 : Cephalexin 20mu g/mlR1 : Rifampicin 20mu g/mlCL 10 : CL1 10배 희석R10 : R1 10배 희석CL 100 : CL1 100배 희석R100 : R1 100배 희석20mu g/ml 일 때의 항생제를 효과를 비교해 보면 아래와 같다.E. coli 에 대한 항생제 효과는 Rifampicin>Cephalexin=Amoxicillin>Doxycycline 순서이다. 4가지 항생제 모두 E. coli에 어느 정도 효과가 있었다. 그 중 가장 효과가 좋은 항생제는 Rifampicin 으로 농도가 묽어져도 디스크 주변으로 세균이 자라지 않은 것을 확인 할 수 있었다. 나머지 3개는 농도가 묽어졌을 때 효과가 없다.Bacillus cereus 에 대한 항생제 효과는 Rifampicin>Cephalexin>Doxycycline>Amoxicillin 순서이다. Amoxicillin을 제외한 나머지는 이 균에 효과가 있었다. 하지만 농도가 묽어졌을 때 4가지 모두 효과가 거의 없었다.지름(cm)항생제균항생제지름(cm)2.52.31.6D1D10D100BSA1A10A10032.21.7431.6CL1CL10CL100BSR1R10R1002.62.11.62.521.2D1D10D100MA1A10A1003.52.60.832거의 없음CL1CL10CL100MR1R10R1003.32.51.6BS : Bacillus subtilisA1 : Amoxicillin 20mu g/mlD1 : Doxycycline 20mu g/mlM : Micrococcus luteusA10 : A1 10배 희석D10 : D1 10배 희석A100 : A1 100배 희석D100 : D1 100배 희석CL 1 : Cephalexin 20mu g/mlR1 : Rifampicin 20mu g/mlCL 10 : CL1 10배 희석R10 : R1 10배 희석CL 100 : CL1 100배 희석R100 : R1 100배 희석20mu g/ml 일 때의 항생제를 효과를 비교해 보면 아래와 같다.Bacillus subtilis 에 대한 항생제 효과는 Cephalexin>Amoxicillin >Rifampicin>Doxycycline 순서이다. 다른 균에 비해서 특히 Cephalexin에 대해서 효과가 좋았고, 4가지 항생제 모두 농도가 묽어져도 어느 정도 효과를 보였다.전체적으로 항생제 농도가 묽어질수록 항생제 효과가 줄어들었다.Micrococcus luteus 에 대한 항생제 효과는 Amoxicillin>Rifampicin>Cephalexin>Doxycycline 순서이다. 10배 희석했을 때 까지도 어느 정도 효과를 보였는데 100배 희석했을 때 Rifampicin을 제외한 나머지는 거의 효과가 없었다.3. 고찰1) spread plate method / direct count by hemocytometer① spread plate method에서 C와 D에서 구한 CFU/ml 이 차이가 난 이유를여러 가지로 생각해 볼 수 있다.- 균이 너무 작아서 세기가 힘들었고 그래서 C의 경우 일부만 세서 대략적인개수로 계산을 해서 값이 정확하지 않았던 것 같다.- D 배지의 경우 도말 할 때 찢어졌는데 기포가 생겨서 세균인지 기포인지 구분 하기가 쉽지 않았다.- 세균 colony가 뭉쳐있는 경우에 잘 보지 못하고 제대로 세지 못했을 수 있다.- 한 개의 균이 한 개의 colony를 만든다고 가정하고 계산을 했지만 실제로 colony를 만들지 못하는 균이 있을 수도 있다.② spread plate method 와 hemocytometer를 이용해 구한 세균 수에서차이가 난 이유를 여러 가지로 생각해 보았다.- spread plate method 에서는 배양을 해서 개수를 세었기 때문에 살아있는 균만 셀 수 있었지만, hemocytometer을 이용했을 때는 살아있는 것과 죽어 있는 균을 모두 세었기 때문에 hemocytometer에서 구한 세균 수가 더 많았 다.- 현미경으로 세균을 보았을 때 먼지인지 균인지 구분이 잘 가지 않았다.- 개수를 세서 평균을 낸다고 해도 counting chamber에 균이 균일하게 들어가지 않았을 수도 있다.2) disinfectants on microorganism & kirby-bauer disk method

자연과학| 2020.09.16| 7페이지| 1,500원| 조회(342)

Hemocytometer, 일반생물학실험, spread plate metho..

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미생물 및 분자생물학 실험 보고서 _배지만들기, 세균염색

미생물 및 분자생물학 실험 보고서1. preparation of culture media2. simple staining, gram staining1. 실험원리1) 배지만들기배지란 미생물을 생육, 번식시키기 위한 장소로 물, 탄소원, 질소원, 무기염류 등 의 물질로 구성되어있다. 백금이를 이용해서 배지에 균을 도말하고 배양하면 균이 콜로니를 형성한 것을 볼 수 있다. 도말 시작점에서 끝으로 갈수록 균의 농도가 감소해서 콜로니가 떨어져 있게 된다. 콜로니는 세균이 집단을 형성 한 것으로 하나의 콜로니에는 동일한 유전형질을 지닌 세포들이 모여있게 된다.2) 단순염색, 그람염색① 염색원리세균을 관찰할 때 주변과 세균이 쉽게 구별하기 위해서 염색을 하게 된다.세균은 pH 7에서 전체적으로 음전하를 띄고 있기 때문에 메틸렌블루, 사프라 닌, 크리스탈바이올렛과 같은 양이온 염료를 사용하게 되면 세균을 직접 염색 하게 되고 에오신과 같은 음이온 염료를 사용하게 되면 배경을 염색시켜서 세 균이 더 잘 보일 수 있게 한다.② 염색법- 단순염색이란 한 가지의 염색약을 사용하여 염색하고 관찰하는 방법이다.- 그람염색은 그람음성균과 그람양성균의 차이를 이용해서 염색하는 방법이다.그람 양성균은 펩티도글리칸 층이 두꺼워서 탈색제에 의해 첫 번째 염색액이 빠져나가지 못하게 된다. 하지만 그람음성균의 경우 펩티도글리칸 층이 얇아 첫 번째 염색액이 쉽게 빠지게 되고 2번째 염색액으로 염색된다.- 그람 양성균에는 Bacillus속, cocci 속 등이 있고,그람양성균에는 E.coli, Samonella, Helicobacter 등 병원성 균이 속한다.③ 현미경현미경의 경우 명시야 현미경과 암시야 현미경이 있다.명시야 현미경의 경우 밝은 배경에서 물체를 관찰하게 되고 빛은 투명물체를 투과하게 된다.암시야 현미경의 경우 주변은 어둡게 보이고 시료만 밝게 보인다. 이 현미경은 시료로부터 산란된 빛이 렌즈로 들어가게 된다.2.실험결과Escherichia coliBacillus cereust streakquadarant streakradiantstreakcontinuousstreakslant1) 배지만들기평판배지와 사면배지를 만든 뒤 Escherichia coli와 Bacillus cereus를 streaking 한 결과이다. 도말 시작점에서 끝으로 갈수록 균의 농도가 감소해서 콜로니가 떨어져 있어야 하는데 Escherichia coli를 t-streak, quadarant streak 한 것을 제외하고는 단일 콜로니가 나타나지 않았다.Bacillus subtilisMicrococcus luteust streakquadarant streakradiantstreakcontinuousstreakslant평판배지와 사면배지를 만든 뒤 Bacillus subtilis와 Micrococcus luteus를 streaking 한 결과이다. Bacillus subtilis 에서만 일부 단일 콜로니가 관찰되었고 나머지에서는 볼 수 없었다. Micrococcus luteus는 다른 세균과는 다르게 배양 후 색이 노란색이였다.2) 단순염색, 그람염색Escherichia coliBacillus cereusBacillus subtilisMicrococcus luteus① 단순염색메틸렌 블루를 이용해서 4가지의 세균을 염색하고 현미경으로 관찰한 결과이다.메틸렌 블루는 양이온 염료여서 세균을 푸른색으로 염색시켜 주게 된다. 현미경 사진으로 봤을 때 4가지 세균이 잘 염색된 것을 관찰 할 수 있었다.Escherichia coliBacillus cereusBacillus subtilisMicrococcus luteus② 그람염색메틸렌블루로 염색한 세균을 탈색 후 사프라닌으로 2차 염색하고 관찰한 결과이 다. 그람음성균만 사프라닌으로 염색이 되어 붉은색으로 보이고 그람 양성균은 탈색제에 의해 첫 번째 염색액이 빠져나가지 못하게 되어 파란색으로 보이게 된다. 4가지 세균 중 Escherichia coli만 그람음성균이여서 붉은색으로 염색된 것을 관찰할 수 있었다. 나머지 Bacillus cereus, Bacillus subtilis, Micrococcus luteus 는 그람양성균이여서 붉은색으로 염색되지 못하고 메틸렌 블루로 염색된 상태인 파란색으로 관찰되었다.3. 고찰1) 배지 만들기이번 실험에서 단일 콜로니가 관찰되는 배지가 몇 개 밖게 되지 않았는데 단일 콜로니가 생기지 않은 이유를 여러 가지로 생각해 볼 수 있다.- 배양액을 부었을 때 플레이트 내에 물방울이 맺혔는데 그 물방울이 떨어졌을 수도 있다.- 배양액을 부을 때 뚜껑을 살짝만 열고 해야 하는데 다 열고 해서 배지가 오염 되었을 수도 있다.

자연과학| 2020.09.16| 7페이지| 1,500원| 조회(775)

그람염색, 단순염색, 세균염색, 일반생물학실험, 배지만들기

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크린룸 clean room

1. Clean room 이란?1)정의먼지나 세균이 전혀 없는 방. 불과 몇 ㎟밖에 안 되는 크기에 10만 개 이상의 트랜지스터나 저항기를 조립할 수 있는 초(超)고밀도집적회로(VLSI)나 유전자조작과 같이 세포 속의 미소한 유전자를 다루는 극미산업(極微産業)에서는 미세한 먼지나 세균도 커다란 영향을 끼친다. 그래서 방 전체의 공기를 여과하거나 펌프로 흡인해서 청결하게 한다. 그와 같은 방 외에 상자형(箱子型) 실험박스를 넣어서 균이 밖으로 새어 나가지 않도록 엄정하게 관리하는 고도안전실험실도 있다.VLSI 공정에서 먼지는 치명적이다. 더욱이 보통의 인간은 1분간에 수천 개나 되는 먼지의 조각들을 피부·모발·의복 등에서 흩뿌리고 있다. 그러므로 클린룸에는 가능한 한 사람을 출입시키지 않는 것이 좋지만, 실제로는 사람이 들어가서 작업해야 하는 경우가 대부분이므로 무균복(無菌服)을 입는다.

공학/기술| 2019.03.07| 13페이지| 2,500원| 조회(303)

클린룸, CLEAN ROOM, 크린룸 ppt

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키르히호프의 실험법칙-일반물리학실험 예비 레포트

일반물리학실험 예비 레포트(키르히호프의 법칙)1. 실험 목적키르히호프의 법칙을 이해하고 실제 회로에 이를 적용시켜 이론값과 측정값을 비교해 본다.2. 실험 이론① 키르히호프 제 1 법칙 (전류의 법칙)“회로상의 한 접속점에 흘러 들어오는 전류의 합은 흘러 나가는 전류의 합과 같다.” 식으로 표현하면sum _{} ^{} i=0 라고 쓸 수 있다. 한 교차점에서 흘러 들어오는 전류를 +로 놓으면, 흘러 나가는 전류를 -로 표시한다. 즉, ‘유입전류=유출전류‘ 이다.왼쪽 그림에서 유입전류는{} _{}+i _{2} ,+i _{3} , 유출전류는-i _{1} 이므로sum _{} ^{} i=`i _{2} +i _{3} -i _{1} =0 이며i _{1} =`i _{2} +i _{3} 과 같이 쓸 수 있다.② 키르히호프 제 2 법칙(전압의 법칙)“한 폐회로 상에서 전압강하의 총합은 전압상승의 총합과 같다.”이를 식으로 표현하면sum _{} ^{} V=0 라고 쓸 수 있다. 임의의 한 점에서 출발하여 폐회로를 따라가면서 전압상승과 전압강하를 더해나가면 다시 처음 점으로 돌아왔을 때 전압상승과 하강의 합은 0이 된다. 폐회로를 따라가다가 저항을 만났을 때 폐회로를 따라가는 방향과 전류i 의 방향이 일치할 때는 - 전압의 하강으로 간주하고 폐회로를 따라가는 방향과 반대방향이면 +iR 전압의 상승으로 간주한다.3. 실험 준비물브레드보드, 바나나 잭 연결선, 멀티테스터, 탐침, 몇 종의 저항과 전선, 스트리퍼, 전원장치4. 실험 방법1) 브레드보드, 멀티테스터 사용법 / 전압, 전류 측정요령① 실험에 필요한 저항값을 측정하기 위해 각각의 저항을 따로따로 브레드보드에 꽂는다.② 멀티테스터를 저항측정 모드에 놓는다.( 검은색단자는 항상 COM에만 꽂는다.)③ 멀티테스터의 R-H 버튼으로 측정치의 범위를 결정한다.(저항측정을 위해 0.L 킬로옴 모드에 놓는다)④ 저항측정은 저항의 양끝단자에 탐침을 접촉시키고 지시창에 나타난 숫자를 읽은 후 기 재한다.(탐침의 접촉방향은 무관하다.)⑤ 스트리퍼를 이용해 피복을 벗기고 전원연결선을 2개 만들어 브레드보드의 바나나잭을 풀고 전원단자의 아래쪽에 고리형태로 단단히 물린다. + -의 전원연결선을 만들어 브레 드보드의 전원라인에 각각 꽂는다.⑥ 전원장치를 켜기 전에 전원다이얼을 반시계방향으로 완전히 돌린 후 브레드보드의 전원 단자에 바나나잭을 연결한다.⑦ 전원전압을 설정하고 저항에 인가되는 전압을 측정하기 위해 멀티테스터의 회전 손잡이 를 돌려 직류전압모드에 놓고 R-H버튼을 이용해 0.00V모드로 설정한다.저항의 양 끝에 탐침을 접촉시켜 전압을 측정한다.⑧ 두 단락점 사이의 전류를 측정하기 위해서는 멀티테스터의 모드를 직류전류로 맞춘 후 빨간색 탐침을 400mA 단자에 꽂는다.+전원연결부와 저항사이, -전원연결부와 병렬저항사이를 단락시키고 이 사이에 탐침을 접촉시켜 전류를 측정한다.2) 회로구성① 그림과 같이 전원공급장치의+선과 -선을 바나나잭을 이용하여 연결한 후 다시 피복의 앞부분을 벗겨낸 전선으로 연결한다.붉은선은 모두+에 연결된 점이고 푸른선은 모두-에 연결된 점들이다.② 이 두 선상의 어떤 구멍이라도 꼬마전구를 연결하면 불이 들어오게 된다.③ 위와 같이 저항 1개의 직렬회로를 연결한다.④ 독립된 5개의 연결구멍을 한 점으로 생각하고 충분히 띄어서 저항을 연결한다.(5개의 구멍이 연속된 줄은 모두 연결된 하나의 점과 같다.)⑤ 전원선을 남은 4개 구멍중 하나씩에 연결하면 저항 아 1개만 연결된 직렬회로가 완성 된다.

공학/기술| 2019.03.07| 4페이지| 1,000원| 조회(408)

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