HPLC기본이론

소개

HPLC기본이론 PPT자료입니다.

목차

Chromatography의 정의
Chromatography의 분류
Chromatography의 분리기전 및 특징 흡착 chromatography 분배 chromatography 이온교환 chromatography 크기배제 chromatography
분리의 Parameters

본문내용

크로마토그래피의 정의
복잡한 혼합물을 구성하고 있는 유사한 성분을 분리할 수 있는 방법.
시료 성분이 분리관의 고정상과 이동상의 흡착, 분배, 이온교환, 분자크기 배제 작용등의 상호작용에 의해 각각 단일성분으로 분리되는 것을 말한다.
고정상 컬럼내 충전된 물질
이동상 시료 성분을 주입구에서 검출기까지 이동시켜주는 역할과 시료 성분들간의 분리 정도에도 영향을 줌
Retention Time (min)
Detector Response
c
b
a
크로마토그래피의 분류
크로마토그래피의 분류
크로마토그래피의 분류
GC와 LC의 선택
이동상의 극성
분 자 량
GC
LC
500
2000
2x107
*
크로마토그래피의 분류
GC와 LC의 비교
시료의 휘발성
시료의 안성정이 중요 -열 분자량<500 고정상의 선택성 이용 고감도의 검출기 시료의 회수가 어려움
시료의 용해도
시료의 안정성에 덜 민감
분자량의 제한이 없다
고정상과 이동상의 선택성 이용
검출기의 감도가 일반적으로 GC에 비해서 낮음
시료의 회수가 쉽다.
GC LC
24:00귀가
21:00
19:00
술이 너무좋아
술은 즐기는 정도
술은 싫다
상호작용
18:00출발
크로마토그래피의 분리기전
HPLC의 분리 방법
흡착 크로마토그래피 극성 물질을 정지상으로 사용하여 그 극성 표면에서의 용질의 친화력의 크기에 따른 분리
분배크로마토그래피 이동상 액체와 정지상 액체 사이에서의 용해도의 크기에 따라 분리
이온교환 크로마토그래피 고정상에 부착된 이온기와 용질이온과의 이온평형과정을 통해 분리
크기배제 크로마토그래피 분자크기에 의한 크기배제
Adsorption(흡착) 크로마토그래피
고정상의 고체 흡착제 표면과 시료간의 친화력 크기에 따라 분리가 이루어진다.
고정상 Silica Gel(SiOH) - 많은 양의 시료를 분석할 수 있다. - 시료와 반응하는 경향이 적다. - 쉽게 구할 수 있다. Alumina(Al2O3) - silica gel과 달리 약 염기성 - 일반적으로 사용되지 않음.
이동상 극성에 따라 선택(유기용매사용)
분리 가능한 시료 약한 극성의 시료 분리.
흡착제로 많이 사용하는 실리카는 그의 실란올 작용기가 활성자리 역할을 한다 용질들과 의 상호작용인 쌍극자 유도쌍극자 상호작용, 쌍극자 쌍극자 상호작용, 수소결합이 있어야 흡착이 일어난다. 흡착이 이 이루어 지려면 용질 분자의 구조는 비공유 전자를 가진 한 개 이상의 원자(주기율포에서 15~17족)가 있거나 이중결합이 있어야 한다.

참고자료

· 없음