단백질 정량

소개

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목차

1. 단백질 정량법
① 분광법 (Spectroscopy)
② 단백질 정량법
2. Reference

본문내용

1. 단백질 정량법
① 분광법 (Spectroscopy)
분자의 구조와 성질을 규명하기 위해 분자내의 에너지와 빛에너지사이의 상호작용을 이용하는 방법
※ 원리
- 분자는 외부로부터 분자에 빛 에너지를 쪼이면 회전, 진동, 전자에너지의 분자에너지에 해당하는 일정한 에너지의 파장만을 흡수 하게 된다.
- 분자의 화학결합 상태나 구조적인 특성에 따라 흡수되는 정도가 달라져 서로 다른 흡수스펙트럼을 나타내게 된다.
이러한 성질을 이용하여 정성 및 정량분석을 한다
※ Beer-Lambert Law
특정 파장의 빛이 시료에 흡수되는 정도인 흡광도(absorbance)와 시료와의 관계를 나타낸 공식
A = ε·c·l
A: absorbance(흡광도)
ε : molar absorption coefficient (몰 흡광 계수)
c : molar concentration (몰농도)
l : light pathlengh
ε는 분자의 고유 값이고 l은 1cm이므로 A∝ c

※ Spectrophotometer(분광광도기)란
: 특정 파장의 빛이 화학물질에 의해 흡수되는 정도를 측정하는 기기

② 단백질 정량법
일반적으로 단백질을 정량하는 데는 3가지의spectroscopic 방법이 이용된다

(1) 단백질의 UV흡수에 따른 측정법

1) 원리
- 방향족 아미노산인 페닐알라닌, 타이로신, 트립토판에 의한 UV의 흡수를 측정한다.
- 275-280 nm주변에서 일반적으로 최대의 흡광을 보인다

2) 측정범위
- 20ug~ 3mg

참고자료

· ① 주현규외 5인, 1995, 분석법, 학문사, 205∼225p
· ② 채수규, 강갑석, 마상조, 박광원, 오문헌, 오성훈, 2002, 표준분석학, 지구문화사, 283∼288p
· ③ 로버트A 윌리스, 1993, 생물학-생명의 과학, 을유문화사, 81∼90P