[생명공학실험2] Transformation

목차

1. 실험목적

2. 실험원리

1) Transformation

2) Competent cell

3) Competent cell의 제조
(1) Fresh 또는 frozen 방법을 이용한 competent cell의 제조
(2) Calcium chloride를 이용한 competent cell의 제조
(3) Ultra-competent cell의 제조(Inoue method)

4) Electroporation (전기충격법)

5) Selection for transformed cell
(1) Lac selection
(2) 항생제를 이용한 selection
(3) DNA 형질전환을 확인하는 방법에 이용된 증명 4가지
(4) 형질전환세포와 정상세포와 구별되는 몇 가지 다른 특징

6) 배지 및 항생제 제조

(1) LB 배지 (Luria-Bertani medium) 1 liter
(2) SOC 배지 (Terrific Broth)
(3) 항생제

7) 형질전환을 이용한 활용
(1) 해충 저항성 형질전환 식물
(2) 바이러스 저항성 식물
(3) 제초제 저항성 식물
(4) 백신의 대량 생산
(5) 생분해성 플라스틱 생산 형질전환 식물의 개발

3. 참고문헌

본문내용

형질전환(transformation)이란 플라스미드가 세균안으로 도입되면서 세균이 가지고 있지 않던 유전형질을 획득하는 것이며 이를 세균의 형질전환 (bacterial transformation)이라고 한다. 형질전환은 다른 생물 종의 세포에서도 가능하며 플라tm미드에 의하지 않고도 가능하다. 형질전환이 모든 세포에서 쉽게 일어나는 것은 아니다. 자연계에서 형질 전환은 박테리아가 유전자 정보를 얻는 주된 과정이 아니다. 이것은 실험실에서 몇 가지 종(Bacillus와 Streptococcus종)만이 쉽게 형질 전환 될 수 있다는 사실에서 알 수 있다. 대장균을 포함한 대부분의 박테리아는 일반적인 조건에서 제한된 양의 DNA만을 도입한다. 이러한 종을 효과적으로 형질전환하기 위하여 DNA 도입능력을 강화하는 물리적이거나 화학적인 처리를 거쳐야만 한다. 이러한 처리를 받은 세포를 competent cell이라고 한다.

참고 자료

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• 최신미생물학실험, 홍순우외 12명, 아카데미서적, 1987
• 분자생물학노트, 이대섭, 유전공학실험서 (3판), 생명공학연구소, 1998
• 분자생물학, David Freifelder, 아카데미서적, 1989
• Recombinant DNA ( Watson외 3명, Freeman Publishing, p.73～84)
• http://www.kordic.re.kr/%7Etrend/Content302/biology19.html
• http://biochemistry.yonsei.ac.kr/biochem_molecular/