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소개글
A+받았던 실험보고서입니다.Gene Cloning 과정 중 Transformation, Plasmid DNA isolation, Gel electrophoresis 까지 과정을 한꺼번에 쓴 레포트입니다
목차
1. Introduction2. Materials & Method
3. Result
4. Discussion
5. Reference
본문내용
Cloning은 유전 공학의 기초가 되는 기술로, 특정 DNA조각을 분리하여 벡터(vector)라고 불리는 플라스미드 혹은 바이러스 같은 작고 간단한 유전요소로 옮긴 후 이를 살아있는 생명체에 다시 도입하여 특정 유전자를 순수한 형태로 분리하거나 다양하게 이용을 하는 기술이다. 재조합 DNA기술로도 불리는 cloning 실험은 특정 유전자형을 가진 개체를 다량으로 복제하는 것을 목적으로 두고 있다. 이 장점으로 분자 생물학적면에서 원하는 유전자를 다량으로 만들 수 있어 의약품의 생산, 동식물의 세포배양에 이용될 수 있으며, 백신개발, 여러 가지 질병의 조기지단 등 다양한 분야에서 쓰이는 유전공학실험의 기초기술 중 하나라고 할 수 있다.[그림 ] Gene cloning의 기본 과정
유전자 cloning 절차는 크게 2단계에 걸쳐 진행된다. 첫 단계는 클로닝 벡터 내로 DNA조각을 삽입하여 재조합 DNA를 제조하는 과정이고 두 번째 단계는 재조합된 DNA를 복제가 가능한 적절한 숙주세포의 내부로 도입(Transformation)하여 배양함으로써 세포 내의 재조합 DNA를 대량으로 증폭시키는 과정이다. 일반적으로 이 두 과정을 묶어 DNA 재조합 기술 또는 유전자클로닝이라 한다. 우선 재조합 DNA를 제조하기 위해 벡터(vector)를 이용하는데 이때 벡터란 plasmid나 bacteriophage와 같은 DNA로서 세포 형질전환을 통해 특정 유전자나 DNA를 자신에게 삽입시켜 재조합 DNA를 만든 후 이것을 숙주세포로 전달하여 많은 수로 복제 될 수 있도록 하거나 또는 단백질로 발현될 수 있도록 하는 DNA운반체를 말한다. 벡터는 세포 내에서 자가복제가 가능하고 항생제를 이용한 선택(selection)이 가능하다. 또한 제한효소 절단부위가 밀집된 부위인 MCS(multiple cloning site)를 가지고 있으며 cloning vector와 expression vector로 나뉠 수 있다.
참고 자료
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