[충남대] 분자생물, 생화학 실험 보고서1

소개

"분자생물, 생화학 실험 보고서- 대장균을 이용해 관심 단백질의 발현을 유도하는 실험"에 대한 내용입니다. A+ 자료입니다.

목차

Ⅰ. 실험목적과 원리(서론)
Ⅱ. 재료 및 실험방법
Ⅲ. 결과
Ⅳ. 논의, 고찰

본문내용

생명공학 연구에는 미생물 중 대장균(Escherichia coli, E. coli.)을 흔히 이용한다. 대장균은 정온동물의 창자에서 많이 볼 수 있는 박테리아로 단백질 발현에 대해 가장 일반적인 숙주이다. 대장균과 같은 많은 다른 박테리아에서 유전자 발현을 지배하는 조절서열은 잘 알려져 있고 높은 수준으로 클로닝된 단백질의 발현에 이용된다. (강서만 외 5명, 2014) 박테리아는 실험실에서 보관과 배양이 용이하다는 장점이 있어 주로 사용하는 원핵생물 모델이며, 자가복제를 하는 DNA 고리인 Plasmid DNA를 가지고 있다. 이는 DNA vector(운반체)로써 유전자 재조합 기술의 중요한 재료이다. 본 실험에서 사용되는 대장균은 Hi-control™ BL21(E. coli)로 재조합 단백질 생산을 위한 일반적인 실험실 균주이다. 대장균은 아미노산, 뉴클레오티드 전구체, 비타민 및 세포가 합성해야 하는 기타 대사 산물을 세포에게 제공하는 풍부한 배지에서 더 빠르게 자란다. (Curr Protoc Mol Biol, 24년 4월 확인)
여기서 배지(culture medium)란 미생물이나 동식물의 조직을 배양하기 위하여 배양체가 필요로 하는 영양물질을 주성분으로 하고, 다시 특수한 목적을 위한 물질을 넣어 혼합한 것이다. (두산백과, 24년 4월 확인) 배지는 크게 액체배지와 고체배지로 나눌 수 있는데, 두 배지의 차이점은 고체배지에는 한천(Agar)을 넣는다는 것이다. 따라서 고체배지는 젤의 형태로 배양 중 관찰이 용이하고, 산소공급이 원활하다는 장점을 가지고 있다. 액체배지는 양분이용이 용이하고, 독성 물질 분산 희석, 배양 중 영양분의 공급과 교체가 용이하다는 장점이 있어 필요한 용도에 따라서 사용한다.

참고자료

· 강서만 외 5명, 2014, 콕스 분자생물학; 라이프사이언스 p.212 (박테리아에 대한 설명)
· ]https://www.doopedia.co.kr/doopedia/master/master.do?_method=view&MAS_IDX=101013000843542 두산백과, 24년 4월 27일 확인 (배지에 대한 설명)
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· https://www.sigmaaldrich.com/KR/ko/technical-documents/technical-article/cell-culture-and-cell-culture-analysis/mammalian-cell-culture/cell-types-culture, mreck; Cell Types & Culture Characteristics, 24년 4월 28일 확인 (세포생장곡선에 대한 설명)
· Jayaweera Thilanka; Siriwardana Chamindika; Dharmasiri Sunethra; Quint Marcel; Gray William M.; Dharmasiri Nihal, 2014, PLOS ONE, Alternative Splicing of Arabidopsis IBR5 Pre-mRNA Generates Two IBR5 Isoforms with Distinct and Overlapping Functions p.1-2 (IBR5의 기능)
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· Protein Chromatography. 2017; 1485: 15–25. Published online 2016 May 23. doi: 10.1007/978-1-4939-6412-3_2 (겔 여과 크로마토그래피에 대한 설명)
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