생화학 실험 보고서 - 박테리아 형질전환

소개

생화학 실험 보고서입니다.

cloning vector : pUC vector
Transformation을 통해 colony 키운 후 관찰, 형질전환 효율을 고찰하였음.

목차

1. 실험목적
2. 이론
3. 실험 시약 및 기구
4. 실험 방법
5. 실험 결과
6. 고찰
7. 참고 문헌

본문내용

1. 실험목적
cloning에 대해 알아보고, cloning 과정 중 박테리아에 집어넣고자 하는 DNA를 가진 vector를 집어넣는 Transformation을 이해한다.

2. 이론
cloning은 특정 DNA조각을 분리하여 vector라고 불리는 플라스미드 혹은 바이러스 같은 작고 간단한 유전요소로 옮긴 후, 이를 살아있는 생명체에 다시 도입하여 특정 유전자를 순수한 형태로 분리하거나 다양하게 이용하는 기술을 의미한다. 즉, 재조합 DNA를 박테리아에 넣고 그 개체가 빨리 자라도록 해서 필요한 DNA를 가진 박테리아의 수가 증가하게 만든 후, 박테리아로부터 다시 DNA를 뽑아서 양을 증폭시키는 것이다. 이때 재조합 DNA는 숙주생물체 내로 외부 DNA를 인위적으로 삽입하여 재조합된 DNA를 의미하며, 두 개 이상의 원천에서 유래된 DNA를 포함하고 있다.
재조합 DNA 기술은 특정 유전자의 동일한 사본을 여러 개 만드는 클로닝에 이용된다. 재조합 DNA의 도입에 이용되는 모델생물은 세균으로는 대장균이 대표적이다.
클로닝을 위한 DNA 절편은 유전자 라이브러리, cDNA 라이브러리, PCR 산물, DNA의 인공 합성 또는 돌연변이 등 다양한 출처에서 유래한다. 유전체 라이브러리는 세포 안의 DNA를 전부 다 조각으로 잘라서 넣은 DNA 절편의 모음이다. 제한효소로 DNA를 작은 절편으로 절단한 후 각 절편을 벡터에 삽입하는데, 이 벡터를 숙주세포에 집어넣어 재조합 세포의 colony를 만든다.

참고자료

· 미생물학백과사전, 클로닝
· 미생물학백과사전, 재조합 DNA
· 민철기, 강창수, 생물학실험서, 1판, 라이프사이언스, 2004, 151.
· 미생물학백과사전, 콜로니
· 분자세포생물학백과사전, pCU