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A+ 생화학실험 <10주차. Cloning> 레포트2025.01.201. Molecular Cloning Molecular cloning은 분자 생물학에서 recombinant DNA를 생성하고 숙주 내에서 replication을 수행하는 실험적인 기법입니다. 이 기법의 주된 목적은 target 유전자(insert)를 plasmid DNA(vector)에 넣어 대량의 target 유전자 또는 해당 유전자로 인해 발현되는 단백질을 얻는 것입니다. 일반적으로, 서로 다른 유기체에서 얻은 DNA sequence를 사용하며, 하나의 유기체는 cloning되는 DNA의 source 역할을 하며, 다른 유기체...2025.01.20
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Restriction Enzyme Digestion and Gel Electrophoresis 레포트2025.01.211. Plasmid DNA와 Vector Plasmid DNA는 박테리아 세포 내에 염색체와 별도로 존재하면서 독자적으로 복제, 증식할 수 있는 원형 DNA 분자를 말한다. Plasmid Vector는 원하는 특정 유전자를 운반할 수 있고, 한 세대의 박테리아로부터 다음 세대로 전달되기 때문에, DNA 클로닝을 위한 핵심적인 도구이다. Vector에는 restriction enzyme이 작용하는 multicloning site과, 클로닝이 이루어진 후 많은 박테리아 중에서 vector를 가지고 있는 박테리아만 분리할 수 있도록 하는...2025.01.21
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[A]서강대학교 현대생물학실험2_2차 풀레포트_TA Cloning과 Mini-Prep, Restriction enzyme & Gel electrophoresis2025.01.181. TA Cloning TA Cloning은 PCR을 거친 product의 3'에 존재하는 A overhang과 T vector의 3'의 T overhang의 상보성으로 인해 cloning을 진행하는 기법이다. Lac Z selection을 통해 blue colony와 white colony를 확인하여 insert DNA가 정상적으로 삽입되었는지 확인할 수 있다. Self-ligation을 줄이기 위해 alkaline phosphatase 처리나 T-overhang cloning protocol 수정 등의 방법을 사용할 수 있다....2025.01.18
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분자생물학 및 유전공학의 실험방법2025.05.101. Restriction endonuclease DNA의 specific short sequences를 인식하고 쪼갤 수 있는 enzyme입니다. Cloning vectors는 host cell에 외래 DNA를 삽입하기 위해 사용할 수 있는 DNA로, selectable markers와 replication origins을 가지고 있습니다. 2. Nucleases Nucleases(핵산가수분해효소)는 phospho diester bond의 ester bond를 Hydrolyze하는 enzyme이며, Phosphatases(인산분해...2025.05.10
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포토샵 배우기_지우개툴,도장툴2025.05.111. 지우개 툴(Eraser Tool) 지우개 툴은 이미지를 지우는 도구로, 기본 지우개 도구, 배경 지우개 도구, 자동 지우개 도구 등 3가지 종류가 있다. 기본 지우개 툴은 이미지를 원하는 대로 지울 수 있으며, 배경색 지우개 툴은 이미지가 여러 레이어로 구성된 경우 배경을 투명하게 지울 수 있다. 마술 지우개 툴은 선택한 영역만 지워지는 도구로, 이미지 합성 시 부자연스러운 경계선을 연결할 수 있다. 2. 도장 툴(Clone Stamp Tool) 도장 툴은 특정 영역을 복제하여 다른 영역에 적용할 수 있는 도구이다. 클론 스탬...2025.05.11
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11주차_sequencing BL21 transformation2025.05.141. Sanger sequencing Sanger sequencing은 Frederick Sanger에 의해 1977년 개발된 방법으로, 500bp 이하의 DNA 서열을 결정할 때 99.99%의 매우 높은 정확도를 보인다. 이 방법은 DNA polymerase에 의한 DNA 중합 과정 중 template DNA 서열과 상보적인 염기가 결합된다는 성질을 이용하기 때문에 chain termination method 또는 dideoxynucleotide termination method라고 부르기도 한다. Sanger sequencing...2025.05.14
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생화학 실험 보고서 - 박테리아 형질전환2025.01.271. 박테리아 형질전환 이번 실험에서는 화학적 방법을 사용하여 박테리아 세포에 재조합 DNA를 도입하는 형질전환 실험을 수행하였다. 실험에 사용된 competent cell은 CaCl2와 glycerol 처리를 통해 세포막의 투과성을 높여 DNA 도입을 용이하게 하였다. 또한 heat shock 과정을 거쳐 세포막의 유동성을 증가시켰다. 형질전환 효율은 colony 수를 통해 계산하였으며, 실험 결과와 고찰을 통해 competent cell 농도와 희석 과정이 형질전환 효율에 영향을 미치는 것을 확인하였다. 1. 박테리아 형질전환 ...2025.01.27
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이화여대 생명과학실험 A+ 리포트(SDS-PAGE, Coomassie Blue Staining)2025.01.231. SDS의 역할 및 원리 SDS는 계면활성제의 일종으로 단백질이나 핵산의 구조를 깨뜨려 선형으로 만들어주는 역할을 한다. 아미노산 두 개에 SDS 한 개가 결합하고 SDS분자의 긴 소수성 꼬리가 단백질의 골격을 감싸면서 음전하를 띈 꼬리의 끝부분이 밖으로 향하게 되므로 단백질은 자신이 본래 가지고 있던 전하와 관계없이 -전하를 띄게 된다. 2. PAGE의 원리 PAGE란 acrylamide의 중합반응으로 만들어진 gel을 이용한 전기 영동법을 말한다. acrylamide를 가교제로 중합한 polyacrylamide gel은 가교...2025.01.23