[미생물실험]transformation 실험(형질전환 실험)/ color selection

소개글

미생물실험>transformation 실험/ color selection
형질전환실험

목차

1. 제목( Subject )
2. 실험목적(purpose)
3. 재료 및 기구 ( Material and Apparatus )
4. 실험방법 ( Methods )

본문내용

먼저, Lac operon에 대해 간단하게 설명하면 Lac operon은 박테리아에서 시행되는 유전자 발현 조절 기구이다. 조금더 자세하게 설명을 하면 Lac operon은 E. coli가 lactose를 galactose와 glucose로 분해하는데 필요한 효소인 beta-galactosidase를 만드는 유전자이다.
Lactose가 없을 때에는 불필요한 유전자인 beta-galactosidase는 생성되지 않는다. 그 이유는 유전자의 앞쪽에 있는 inhibitor region에서 생성된 inhibitor가 promotor 영역의 operator 부분에 결합해 RNA polymerase의 활동을 방해하여 beta-galactosidase가 생성되지 않도록 하기 때문이다. 그러나 lactose가 배지에 있으면 이 물질이 inhibitor와 결합하여 operator에서 떼어내게 된다. 따라서 RNA polymerase가 작용하여 mRNA를 만들고, beta-galatosidase를 만들면서 lactose를 분해한다. 그 후 lactose가 다 분해되면 inhibitor가 다시 붙어 유전자는 turn off 된다.
따라서 LacZ 부분을 plasmid에 삽입하여 이러한 유전자 조절 기구를 실험에 이용하는데, 이 때 LacZ operon의 동작 여부를 확인하기 위해서 IPTG와 X-Gal을 사용한다. IPTG는 LacZ gene inducer 역할을 하여, Lactose 대신 inhibitor와 결합하지만 분해되지는 않는다.

참고 자료

1. 김선희외 7인(2003), 미생물학실습, 서울, 도서출판 고려의학
2. 김영권외 25명(2007), 미생물학실험, 서울, 고려의학
3. http://cafe.naver.com/gaury.cafe?iframe_url=/ArticleRead.nhn%3Farticleid=21284
4. http://blog.naver.com/pow1987?Redirect=Log&logNo=52881957