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[예방약학실험9] NO assay

"[예방약학실험9] NO assay"에 대한 내용입니다.
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최초등록일 2023.06.21 최종저작일 2023.05
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[예방약학실험9] NO assay
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    목차

    1. Experimental purpose

    2. Material
    A. Reagents
    B. Apparatus

    3. Method
    A. Cell seeding
    B. Standard and sample solution preparation
    C. Nitrite measurement

    4. Result

    5. Discussion
    A. 각자의 standard 값을 보고 standard curve를 그려 샘플들의 NO production (inpercentage) Bar graph를 그려주시오. 또한, 실험 결과를 보고 사용된 추출물이 항염증 효과를 보이는지 판단하시오.
    B. LPS를 처리하면 Raw264.7 cells이 활성화되는데, 이 때의 morphology 변화를 설명하시오.
    C. NO assay를 진행할 때, cell 전체를 사용하지 않고 supernatant만 사용하지 설명하시오.
    D. NO assay를 진행할 때, 왜 빛으로부터 보호받아야 되는지 설명하시오.

    본문내용

    1. Experimental purpose: LPS, RAW264.7와 NO 생성의 연관성, Griess reagent 실험 원리를 이해하고 NO assay를 수행하여 extract A의 항염효과를 밝힌다.

    2. Material
    A. Reagent: RAW 264.7, LPS, extract A, serum-free media, 1mM NaNO₂, Griess reagent
    B. Apparatus: pipette, tip, EP tube, 96 well plate, microplate reader, aluminum foil

    3. Method
    A. Cell seeding: Non treated, LPS only treated, LPS + extract A treated cell을 준비한다.

    참고자료

    · 없음
  • Easy Ai 요약

    이 문서는 LPS와 RAW264.7 세포주를 이용한 NO assay 실험 결과를 보고하고 있습니다. 실험 목적은 LPS에 의한 RAW264.7 세포의 염증 반응을 유발하고, Griess reagent를 이용한 NO 생성량 측정을 통해 추출물 A의 항염증 효과를 확인하는 것이었습니다. 실험 결과, LPS 처리군에서 가장 높은 NO 생성량이 관찰되었으며, LPS와 추출물 A를 함께 처리한 군에서는 NO 생성량이 감소하여 추출물 A의 항염증 효과를 확인할 수 있었습니다. 또한 LPS 처리에 따른 RAW264.7 세포의 형태 변화, 즉 세포 퍼짐(cell spreading), 세포막 주름 형성(membrane ruffling), 세포질 내 소기관 변화 등을 관찰할 수 있었습니다. NO assay 시 상층액만을 사용하는 이유는 NO가 매우 반응성이 높아 세포 내 구성 요소와 반응할 수 있기 때문입니다. 또한 Griess reagent는 빛에 민감하므로 빛을 차단하여 실험을 진행해야 합니다. 이번 실험을 통해 LPS 자극에 의한 RAW264.7 세포의 염증 반응과 추출물 A의 항염증 효과를 확인할 수 있었으며, 향후 천연물 유래 항염증 소재 개발에 도움이 될 것으로 기대됩니다.
  • 자료후기

    Ai 리뷰
    LPS 처리에 따른 RAW264.7 세포의 형태 변화와 NO 생성량 측정, 추출물 A의 항염증 효과 확인 등의 실험 결과를 통해 염증 반응 조절 메커니즘을 이해할 수 있는 유익한 실험 보고서입니다.
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