DNA ligation & transformation

소개

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목차

1. introduction
2. Reference
2. method & material
3. result
4. discussion
5. reference

본문내용

Vector를 이용한 DNA ligatoin과 transformation이었다. 외래 DNA를 운반하는 운반체를 벡터(vector)라고 하는데, 벡터로서는 plasmid, phage DNA와 이들 두 개로부터 만들어진 cosmid가 있다. 벡터로서의 최적 조건은 숙주 세포내에서 염색체와는 독입해서 자율증식 할 수 있어야 한다. 벡터를 DNA 재조합 실험에 실용적으로 사용하기 위해서는 다음과 같은 조건들이 갖추어져야 한다. 우선 세포 내에서 자가복제(self-replication) 을 할 수 있어야 하며 항생제를 이용한 선택(selection) 이 가능할 수 있어야 한다. 즉 vector에 존재하는 항생제 내성 유전자를 이용하면 DNA가 세포 내로 주입되었는지 아닌지를 판별할 수 있다. Gene cloning에서는 내가 원하는 유전자가 세포 속으로 들어갔는지가 중요하기 때문에 이런 기능은 필수적이라고 할 수 있다. 이렇게 해서 세포 속으로 DNA가 들어간 세포만을 선별하는 것을 selection이라고 한다. 또한 Multiple cloning site(MCS)를 이용할 수 있어야한다. 그 외에도 증식성이 높고 DNA의 분리 정제가 편리해야 하며 외래 DNA를 삽입하기 위하여 제한 효소에 의한 절단 부위가 존재해야 한다. 숙주세포에의 도입률이 높고 선발이 용이하도록 선발 마커(marker)를 가져야 하고 전달성이 낮아야 한다.

참고자료

· 1. 식물분자생물학 남홍길 1999 아카데미 pp105~109
· 2. 최신생물공학 정재동 1996 경북대학교 출판부 pp256~279
· 3. 분자생물학, Robert F. Weaver, 박상대, 라이프사이언스, 2000, pp.16~18
· 4. 분자생물학, 심웅섭 외 6인 공역, 도서출판 월드사이언스, 1999, pp.150~151
· 5. http://biochemistry.yonsei.ac.kr/biochem_workshop/DNA_ligation.php