단백질 분해효소 및 효소의 동역학적 분석

소개

"단백질 분해효소 및 효소의 동역학적 분석"에 대한 내용입니다.

목차

Ⅰ. 단백질 분해 효소
1. 실험목적
2. 이론
3. 실험재료 및 기기
4. 실험방법
5. 실험결과
6. 고찰
7. 참고문헌

Ⅱ. 효소 동영학적 분석
1. 실험목적
2. 이론
3. 실험재료 및 기기
4. 실험방법
5. 실험결과
6. 고찰
7. 참고문헌

본문내용

1. 실험목적
- 단백질 활성에 영향을 미치는 단백질 분해효소와 온도를 이용하여 실제로 단백질활성에 영향을 주는지 확인해본다.

2. 이론
1) 단백질 분해효소(protease)
단백질에 작용하여 펩타이드 결합을 가수분해함으로써 아미노산과 펩타이드 혼합물을 만드는 효소를 통틀어 이르는 말이다. 이러한 단백질 분해효소는 우리 몸속에서 단백질을 아미노산으로 분해하여 단백질이 제대로 몸에 흡수될 수 있게 소화효소 역할을 한다. 단백질분해효소는 pH, 기질 특이성, 활성 잔기,작용기전 등에 의해 분류할 수 있다. 효소의 활성잔기에따라 크게 7가지로 분류할 수 있는데, 세린 단백질 분해효소, 시스테인 단백질 분해효소, 트레오닌 단백질 분해효소,아스파탐산 단백질 분해효소, 글루탐산 단백질 분해효소, 금속 단백질 분해효소 가 있다. 이번실험에서 사용하는 proteinase K는 세린 단백질분해효소로 활성잔기를 세린의 알코올기를 사용한다. 단백질 분해효소의 경우 대게 기질특이성이 높지 않으며 경우에 따라 기질 특이성이 높은 효소도 존재한다.
2) 단백질 분해효소 억제제(Protease inhibitor)
단백질분해효소 억제제는 말그대로 protease를 억제하는 효소이다. 단백질분해효소는 위에서 말했듯 다양한 종류로 존재하며 그에 맞는 억제제가 각각 존재한다. 예를 들어 serin protease를 방해하고 싶다면 serin protease inhibitor를 사용해야한다. 이러한 억제제는 항바이러스제에 널리 사용되고 있으며 우리 몸속에도 널리 분포하고 있다.
3) Protienase K
proteinase K는 세린 단백질분해효소로 소수성, 방향족 아미노산의 c말단에 근접한 에스터결합과 펩타이드결합을 우선적으로 분해한다. 넓은 기질특이성을 갖고 있으며 칼슘에의해 활성화된다. 또한 pH 4~12 범위에서는 안정적이며 온도 60℃까지도 활성이 좋다고 한다.

3. 실험재료 및 기기
<소모성 재료>- GFP, PBS, proteinase K, 100X protease inhibitor, 96 plate well,

참고자료

· 네이버 지식백과, ”단백질분해효소”, 단백질분해효소 (naver.com)
· 네이버 지식백과, “serine protease”, 세린단백질가수분해효소 (naver.com)
· 식물에서 녹색형광 단백질(GFP)의 이용, 정병철
· 네이버 지식백과, “Michaelis–Menten curve” 미카엘리스-멘텐식 (naver.com)
· 네이버 지식백과, “효소반응속도론”, 효소 반응속도론 (naver.com)
· Dean R. et al., 생화학 개념과 응용(2017), 라이프사이언스, p204, 205
· 네이버 지식백과, “alkaline phosphatase”, 알칼리성인산가수분해효소 (naver.com)