Plasmid DNA의 분리와 절단 실험 후 Agarose gel Electrophoresis를 통해 DNA 확인

소개

이번 실험은 플라스미드 DNA를 분리하고 절단해 이를 Agarose 전기영동을 통해 확인하는 실험이었다.
실험은 3주에 걸쳐 진행 되었고, 1주차에는 배지를 만들어 대장균을 접종해 배양하였고, 2주차는 대장균의 플라스미드 DNA를 분리하고 제한효소를 이용해 절단하였고, 3주차에서 Agarose Gel 전기영동을 통해 분리 및 절단이 잘 이루어졌는지 확인하는 실험을 진행하였다.

목차

1. 서론
그림1. gene cloning 간략한 단계
표1. agarose gel 농도에 따른 dna 분리 분위(kb)

2. 실험
2.1 배지의 제조와 대장균 접종
2.2 Plasmid DNA의 분리와 제한효소 절단
2,3 Agarose Gel electrophoresis (아가로스젤 전기영동)

3, 결과
3.1 배지의 제조와 대장균 접종
3.2 Plasmid dna의 분리와 제한효소 절단
3.3 Agarose Gel Electrophoresis
그림 . 100bp plus DNA Ladder
그림 . Agarose Gel Electrophoresis 결과

4., 결론 및 고찰

본문내용

생물공학 및 실습 수업시간에는 전체적으로 유전자 클로닝 (Gene cloning)을 진행한다. 그 중에 이번 보고서는 첫 번째 실험부터 세 번째 실험까지의 내용을 정리했는데, Plasmid DNA 분리 와 절단 실험을 진행하고 Agarose 전기영동을 통해 Plasmid DNA 분리와 절단이 잘 이루어졌는지 확인하는 실험이다.
유전자 클로닝 (Gene cloning)이란 특정한 유전자만을 세포에서 꺼내는 기술, 또는 유전자재조합에 의해 만든 특정 유전자를 벡터(유전자의 운반자)에 결합시켜 대장균 등의 숙주에서 증식하여 균일한 유전자 집단(클론)을 만드는 기술을 말한다. (그림 1)

그림 Gene Cloning 간략한 단계

배지란 세균의 증식, 보존, 수송 등을 위해 사용되는 액체 또는 고형의 재료이다. 미생물 배양에 사용하는 배지에는 에너지 획득, 균체 물질의 합성과 대사산물의 합성에 필요한 모든 원소를 함유해야 한다. 모든 미생물은 물, 탄소원, 질소원, 무기물을 필요로 하며, 균주에 따라서는 특정의 아미노산, 핵산 또는 비타민이 요구된다. 그리고 호기성 미생물의 경우는 산소를 필요로 한다.

참고자료

· Willey, Sherwood, Woolvernton (2008), 일반미생물학 7판, 서울, 라이프사이언스
· 유전자클로닝 (gene cloning), 사이언스올백과사전, http://www.scienceall.com/
· 네이버지식백과, terms.naver.com
· 고정삼 외 5인 (2003), 생물공학, 서울, 유한문화사
· Takeshi Uozumi (2001), 유전공학개론, 서울, 청문사
· 표1. Molecular Cloning – A labolatory manual - , 3rd Edition, 2001