생물학실험 보고서 (Plasmid DNA 분리, DNA의 전기영동)

소개

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목차

Ⅰ. 서론

Ⅱ. 재료 및 방법
1. 실험재료
2. 실험방법

Ⅲ. 결과

Ⅳ. 논의

본문내용

플라스미드 DNA는 박테리아의 염색체와는 분리된 별도로 복제되는 작은 원형의 DNA 분자로 박테리아에 필수적으로 필요한 유전자는 아니다.(Cambell et al., 2009)
플라스미드 DNA는 최소 1kb에서 최대 500kb까지 크기가 다양하며, 숙주 박테리아에서 나타나는 유용한 특성들의 원인이 되는 유전자이다. 거의 모든 유전자를 운반할 수 있으며 박테리아 내부에서 자신을 독립적으로 복제할 수 있기 때문에 원하는 유전자를 포함하고 있는 DNA 조각을 삽입하여 대량으로 생산하는 기술인 유전자 클로닝 기술의 매우 중요한 도구로 사용된다.(Cambell et al., 2009)
이러한 플라스미드 DNA는 일반적으로 Alkaline lysis method으로 박테리아에서 분리해 내는데, 분리하는 DNA의 양에 따라 표기법이 나뉜다. 가장 적은 양의 DNA를 분리할 땐 mini, 중간정도의 양을 분리해 낼 때는 medi, 비교적 많은 양의 DNA를 분리할 때는 large로 표기한다.
Alkaline lysis method로 플라스미드 DNA를 분리해 냈다면 분리한 DNA가 우리가 구하려던 플라스미드 DNA가 맞는지 확인하는 과정이 필요하다. 이렇게 우리가 원했던 유전자와 일치하는지 알아보기 위하여 하는 실험이 바로 전기영동을 통한 비교이다.
전기영동은 DNA, 단백질과 같이 전하를 띈 비교적 큰 분자를 전기장을 주어 분리하는 기술로 박테리아에서 추출해낸 DNA가 내가 구하려던 DNA가 맞는지, 그리고 실험을 통해 얻게 된 그 DNA의 크기와 양은 얼마나 되는지 알아보기 위한 실험이며, 이러한 것들을 알아내기 위해 플라스미드 DNA와 함께 Size maker, Positive control, Negative control을 같이 전기영동하여 비교해본다.
Size maker는 내가 구한 DNA의 크기와 양을 비교하여 알아보기 위한 지표로 사용되며 Size maker가 전기영동 되어 크기별로 나열된 것을 Ladder라고 부르기도 한다.

참고자료

· 생물학실험서, p70-p79
· Cambell, N. A., J. B. Reeece, L. G. Mitchell, and M. R. Taylor. 2009. BIOLOGY: Concept & Connection. 6th Ed., Benhamin Cummings, p189, p212, p295
· Shin, Y. J., S. H. Kim, B. S. Yoo, S. Y. Hwang, W. S. Kim, G. J. Lee and I. G. Park. 2003. 고급생물. 교육과학기술부, p210
· Son, H. D. and M. J. Bae. 2009. HIGHTOP 생물Ⅰ. 두산동아, p168
· Son, H. D. and M. J. Bae. 2009. HIGHTOP 생물Ⅱ. 두산동아, p172, p174