Transformation A+ 실험레포트(결과, 이론)

목차

1. Abstract

2. Experiment
1) 실험 시약 및 장치
2) Penicillin G & Ampicillin 차이점
3) BL21 & DH5α 차이점
4) 실험 방법

3. Result

4. Discussion
1) 형질전환(Transformation)
2) Vector map(MCS, Selection marker, Ori)

본문내용

1. Abstract
세균 사이에 DNA가 전달되는 방법으로 접합(conjugation), 형질전환(transformation), 그리고 형질도입(transduction)이 있다. 이번 실험은 형질전환(transformation)방법을 이용하여 이전 실험에서 재조합된 형광 단백질 유전자가 포함된 DNA(eGFP)를 competent cell안에 넣고, Ampicillin이 포함된 평판 배양접시에서 고체 배지를 이용하여 배양시킨 후 생성된 colony를 대조군과 비교함으로써 형질전환방법에 대해 고찰해보는 실험이었다. Ampicillin은 selection marker로써 사용되었고 이에 따라 대조군(control)으로써 형질전환이 제대로 이루어지지 않은 DNA는 colony를 띄우지 못한 모습을 확인했고 재조합된 DNA로부터 형질전환을 시킨 경우에는 colony를 띄운 모습을 확인할 수 있었다.

<중 략>

※ 실험 방법
① Table 1. 의 조성대로 LB배지를 만든 후 Autoclave로 멸균한다.
(※ 약 121℃, 15psi의 온도와 압력하에서 15분~20분간 처리해준다. 이 과정에서 고온에서도 버틸 수 있는 미생물의 포자까지 사멸된다.)

② 60℃ 이하가 되었을 때 ampicillin(1000X)을 넣고 petridish에 25ml씩 넣고 식힌다. (총 2개)
(※ Ampicillin은 온도에 민감한 항생제이기 때문에 고온상태에서 변성으로 활성을 잃을 수도 있으므로 온도를 충분히 식힌 후 넣어준다.)

참고자료

· Willey, Sherwood, Woolverton / 2016 / "미생물학 제9판“ / (주)라이프사이언스 / 137~172p, p358~371
· Benjamin A. Pierce / 2017 / "유전학의 의해 개념과 원리 제 6판“ / (주)라이프사이언스 / p248~260
· “생물화학공학 이론 및 실험노트” 4. Transformation
· 오계헌 외 4명 / 2010 / “최신 미생물학 실험 제 2판” / 신광문화사 / p210~220
· 유주현, 변유량 / 2007 / “응용미생물학실험” / 도서출판효일 / p211~250