예비4_Transformation_2조 A+ 예비레포트

목차

1. 실험 목적
2. 바탕 이론
3. 기구 및 시약
4. 실험 방법
5. 참고 문헌

본문내용

1. 실험 목적
재조합된 DNA(eGFP DNA)를 Competent cell에 넣고, 배양된 Colony를 대조군과 비교함으로써 형질전환(Transformation)에 관하여 고찰해본다.

2. 바탕 이론

(1) Plasmid

- Plasmid 란?

Figure 1. Plasmid DNA
Plasmid는 세균의 세포 내에 복제돼 독자적으로 증식할 수 있는 염색체 이외의 DNA 분자를 총칭하는 말로, 환상형 모양을 띠고 있다. Plasmid는 세균의 생존에 필수적이지 않으며, 다른 종의 세포내에도 전달될 수 있다. 이런 성질을 이용해 세균 내 플라스미드를 세포 밖으로 빼내고 제한 효소로 자른 뒤 필요로 하는 유전자를 삽입하여 이를 다시 세균에 넣어 배양하는 유전자 재조합 기술에 사용한다. 분자생물학 기반 실험에서 기본적이고 매우 중요한 실험 재료로 사용되며 특히, 강력한 클로닝 수단으로 사용된다. 용어로는 유전자 재조합의 벡터, Plasmid DNA, 플라스미드 벡터 등, 다양하게 불려지고 있다.

- Plasmid DNA의 특성

Plasmid DNA는 크기가 작고 분리와 조작이 쉬우며, 다른 세포내로 쉽게 도입될 수 있다. 또한 생존에 필수적이지 않고 스스로 복제가 가능하기 때문에 DNA 운반체로 주로 이용된다.
항생제 내성 유전자를 가지고 있는 것이 많아 재조합 DNA를 가진 숙주 세포를 선별할 때 용이하다. 여기서 숙주 세포는 재조합 DNA가 이식되는 살아있는 세포로 주로 대장균이 많이 이용된다. 이는 대장균은 증식 속도가 빨라 짧은 시간에 필요한 물질을 대량으로 생산할 수 있고, 생물학적인 정보가 많이 밝혀져 있어 대장균의 증식 및 유전자 발현을 쉽게 조절할 수 있기 때문이다.

(2) 유전자 재조합 기술

한 생물에서 추출한 특정 DNA를 다른 생물의 DNA에 끼워 넣어 재조합 DNA를 만든 후 , 이를 세균 등에 넣어 유전자를 복제하거나 형질을 달라지게 하는 기술이다. 세포 내의 특정 유전자를 골라내어 조작할 수 있고, 특정 유전자를 대량을 복제하여 유전자에 대한 기초 연구에 이용하거나 형질 전환 생물을 생산할 수 있다.

참고 자료

Neil A. Campbell 외 4명, 2011, “Campbell Biology Concepts & Connections, 7th Edition”, Pearson, p186, p210-212
Lizabeth A. Alllison, 기초 분자생물학, p198~p204
김민주 외 6명, 일반 생물학실험, 동아대학교 출판부, p135~p154