생물학 실험 (DNA Cloning)

소개

서울대학교 생물학 실험에서 A+를 받은 레포트입니다.
MODULE 3 현대분자생물학 관련 레포트(DNA Cloning)로, 3주간의 실험내용이 담겨있습니다.

목차

1. 서론
2. 재료 및 방법
3. 결과
4. 토의

본문내용

DNA Cloning
초록
특정 유전자를 연구하기 위해서는 전체 유전자 중 원하는 유전자만을 분리해서 쉽게 취할 수 있어야 하고, 이를 위해서 동일한 DNA를 대량으로 만들 수 있는 방법, 즉 DNA 클로닝(DNA Cloning)이 개발되었다. 본 실험에서는 DNA Cloning의 전반적인 과정 중 대장균을 형질전환하는 과정과, 형질전환된 colony의 Plasmid DNA를 추출하여 확인하는 과정을 진행하였다. DNA Cloning을 직접 실험해 보면서, cloning 과정의 각 단계를 이해하며 그 의미를 파악할 수 있었다. 또한 cloning에 사용되는 plasmid에 대해서 살펴보고, plasmid를 prep하고 전기영동을 통해서 agarose gel 상에서 관찰되는 다양한 형태의 plasmid를 직접 확인할 수 있었다.

1.서론
자연적으로 발견된 DNA 분자들은 매우 길고, 많은 유전자들을 가지고 있다. 또한 유전자는 염색체 DNA의 일부분만을 차지하고 있으며, 그 나머지는 비암호화 염기서열이다. 따라서 분자생물학자들은 특정 유전자를 연구하는 과정에서 이러한 문제점에 직면한다. 특정 유전자를 연구하려면, 전체 유전자 중 원하는 유전자만을 분리해서 쉽게 취할 수 있어야 하기 때문이다. 따라서 과학자들은 특정 유전자를 분리하여 연구하기 위하여, 동일한 DNA를 대량으로 만들 수 있는 방법, 즉 DNA 클로닝(DNA Cloning)을 개발하였다.[1] DNA 절편을 클로닝 하기 위한 방법들은 공통된 특징을 갖고 있는데, 그 중 하나는 박테리아를 이용한다는 것이다. 이번 실험에서는 가장 흔하게 이용되는 E.coli를 사용하였는데, 박테리아의 반복적인 세포분열은 세포 내에 있는 재조합 플라스미드를 대량 복제하게 되고 따라서 클론화된 외부의 유전자를 대량 생성하는 결과를 낳는다. 어떤 유전자를 대량으로 복제하는 것을 유전자 클로닝이라 하고, 클론된 유전자는 특정 유전자의 대량 생성과 단백질 생산의 두 가지 면에서 유용하다. 실험실에서 유전자나 DNA 절편을 클로닝하기 위해서는, 먼저 플라스미드를 박테리아에서 분리한 후 외부의 DNA를 플라스미드에 삽입해야 한다.

참고자료

· Jane B. Reece, Lisa A. Urry, Michael L. Cain, Steven A. Wasserman, 『캠벨 생명과학』, 바이오사이언스, 2012, 396-399
· 김경훈, 김근철, 김준철 외 2명 저, 『일반생물학 실험』, 강원대학교출판부, 2014, 279-303