[생화학실험] 단백질 정성 및 정량

목차

1. Title
2. Name
3. Purpose
4. materials
5. Introduction
6. Method
7. Result
8. Discussion
9. Reference

본문내용

1. Title : 단백질 정성 및 정량

2. Name :

3. Purpose : 정량이란 일반적으로 화학물질의 양적 관계를 알아내는 일로 그 중 Lowry 방법에 대해 자세히 배워보도록 한다.

4. materials
Liver, homogenizer, serum, microtube, 원심분리기, pipette, D.W, PBS, ice, 96-well plate,
-Lowry 시약 A : Na2CO3 (2%), 0.1M NaOH 4℃ 보존
-Lowry 시약 B1 : CuSO4∙H2O 1g (1%) 4℃ 보존
-Lowry 시약 B2 : Potassium Sodium tartrate 2g (2%) 4℃ 보존
-Lowry 시약 C : 10ml의 시약 B2를 비커에 넣고 저으면서, 10ml의 시약 B1을 첨가한다. 계속 저으면서 1L의 시약 A를 첨가한다.
-Folin-Ciocalteau시약
-표준 단백질 BSA(Bovine serum albumin : 1 mg/ml

5. Introduction :
우선 단백질 정량이란 시료 내에 포함된 단백질의 양, 또는 농도를 구하는 과정이다. 단백질은 기본적으로 생화학 실험을 할 시에 기본적으로 이뤄지는 실험이다. 그 이유는 실험 결과를 명확히 하기 위해서인데 예를 들어 wild type cell과 mutant cell 사이의 특정 단백질 양 발현에 차이 여부를 western blot을 이용해 하고자 할 때, 또 enzyme activity를 측정할 경우(enzyme-catalyzed reaction)에 사용한다. Wild type cell과 mutant cell사이의 특정 단백질 양 발현에 차이 여부를 따질 때 사용하는 것은 total protein양을 단백질 정량을 통해 맞추기 위함이다. Total protein양이 동일해야, 특정 protein 양의 상대적인 값을 비교할 수 있기 때문이다. Enzyme activity를 측정하는 경우는 enzyme을 substrate에 처리한 후, 단위 시간당 substrate의 농도 감소를 통하여, enzyme activity를 측정하는 과정이다.

참고자료

· http://www.seumi.com/bbs/board.php?bo_table=nb5&wr_id=144&sca=%C7%D8%BA%CE%BB%FD%B8%AE
· http://ko.wikipedia.org/wiki/%EC%83%9D%ED%99%94%ED%95%99
· http://www.dhp21.com/1-2.htm
· http://cleaning.oranc.co.kr/10.htm
· http://www.gunganghaseyo.com/03/b911.html
· http://asinstrument.co.kr/upload/AN003.pdf
· http://www.koramlabtech.co.kr/public_html/zboard/view.php?id=bu2&page=1&sn1=&divpage=1&sn=off&ss=on&sc=on&select_arrange=headnum&desc=asc&no=8
· http://dmdksos.egloos.com/m/9909737