Fast protein liquid chromatography (FPLC의 원리와 실험방법)

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2017.04.03
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2016.12
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소개글

FPLC의 원리, 시스템 개요도, HPLC와의 차이점 등이 자세히 서술되어있으며 실험방법에 대해서도 상세히 담겨있으니 많은 도움이 될 것입니다.

목차

1. 실험 목적

2. 실험 원리 및 이론
2. 1. HPLC (High performance liquid chromatography)
2. 1. 1. HPLC 용 겔 조건
2. 2. FPLC (Fast protein liquid chromatography)
2. 2. 1. 장치
2. 2. 2. 칼럼
2. 3. 이온교환 크로마토그래피
2. 3. 1. 이온교환크로마토그래피 원리
2. 3. 2. HPLC 또는 FPLC의 시스템 개요도
2. 4. HPLC와 FPLC의 차이점

3. 실험방법
3. 1. 실험기기 및 시약
3. 2. 실험과정

참고문헌

본문내용

1. 실험 목적
FPLC의 원리를 이해하고 이를 이용하여 단백질을 분리해내는 실험을 진행한다.

2. 실험 원리 및 이론
2. 1. HPLC (High performance liquid chromatography) 최신분석화학 제 5판 (자유아카데미)-P492 22-3 고성능 액체크로마토그래피
효소 단백질 정제법 (저-안용근)-P399 HPLC

고성능 액체 크로마토그래피는 높은 압력으로 마이크로 크기 입자로 충전된 칼럼을 통해 용리시키는 정교한 분석법이다. 크로마토그래피는 예로부터 단백질, 펩티드, 핵산, 당, 지질 등의 정제와 구조결정, 물질분석, 확인 등에 널리 사용되어 왔다. 그 중에서도 HPLC는 비약적으로 발전을 거듭하여 생화학 분야에서 시대의 총아가 되었다.
HPLC는 처음에는 high pressure liquid chromatography의 약어로서 사용되었으나, 고분리력, 효율화, 분리시간의 단축, 높은 재현성을 고려하여 현재는 high performance liquid chromatography의 약어로 사용되고 있다.
단백질의 분리기술은 생명과학의 연구나 제제 기술 등과 관련된 유전공학을 지탱하는 중요한 기초기술의 하나로, HPLC는 단백질 분리에 이차원 전기이동과 함께 현재 가장 널리 사용되고 있다. 이차원 전기이동은 장기나 세포의 단백질 전체를 개관하고, 변동을 해석하는 목적에 적합하다. 그러나 전기이동은 시간이 걸리고 분리, 분취가 쉽지 않다. 그 점에서는 HPLC가 뛰어나다.
새로운 충전제의 개발, 화학 변형, 성형, 분구 등의 기술에 따라, 다른 한편으로는 분리법 자체의 해석 방법의 발전에 따라 단백질에 관한 연구는 발전을 거듭하여 지금까지 개별적, 경험적으로 이루어지던 단백질 분리를 더 계통적, 이론적인 것으로 변화시키고 있다.
단백질의 크로마토그래피 지지체로서는 셀룰로오스 분말이 처음 사용되었다. 그 후 많은 이온교환크로마토그래피용 유도체가 만들어졌다.

참고 자료

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