분리정제 FPLC 결과 레포트

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2009.12.21
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2009.12
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액체에 용해되어있는 혼합물의 각각의 분자량 차이를 이용해서 분리하는 방법 중 대표적인 다공성입자를 충진 한 column을 이용하여 단백질 분리 및 분자량 측정을 할 수 있다.

목차

1. 목적
2. 이론
3. 실험장치 및 방법
4. 결과 및 분석

본문내용

1. 목적

액체에 용해되어있는 혼합물의 각각의 분자량 차이를 이용해서 분리하는 방법 중 대표적인 다공성입자를 충진 한 column을 이용하여 단백질 분리 및 분자량 측정을 할 수 있다.

2. 이론

2-1. GPC(Gel Permeation Column)기법이란?GPC(gel permeation chromatography)는 어떤 긴 컬럼 안에 가교된 고분자 (gel)로 충진 시키고, 이 컬럼안으로 고분자용액을 투과 (permeation)시켜 컬럼 안에서 고분자가 크기에 따라 분리될 수 있도록 고안된 분리법이다. 쉽게 말하면, 분자량이 큰 물질이 먼저 유출되고, 작은 분자량물질이 느리게 나오도록 하여, 고분자가 컬럼내부에서 얼마나 머무는가 하는 시간 (retention time)을 측정하여 고분자의 분자량을 산출할 수 있도록 한 것이다 고분자의 크기별로 분리한다고 해서 SEC (size exclusion chromatography) 라고도 부른다. GPC (Gel Permeation Chromatogrphy)는 고분자의 분자량(M.W)과 분자량 분포(M.W.D)를 결정하는 가장 기본적인 방법으로 용출법에 의한 액상-고상형의 액체 크로마토그라피의 일종으로 이미 분자량을 알고 있는 표준시료(standard sample)와 새로운 시료(unknown sample)의 상대적인 평균 분자량과 분자량의 분포를 결정하는데 사용된다. 저분자 물질과 달리 고분자 물질은 중합 속도의 차이에 의한 사슬 길이의 분포(분자량 분포) 및 중합도(DP)가 존재하게 되는데 고분자의 분자량과 분자량 분포는 고분자 물질의 역학적 성질, 열적 성질 그리고 기계적 성질에 큰 영향을 미치게 되고 최종적으로 가공성의 차이를 나타나게 한다. GPC의 가장 큰 장점은 실험 준비과정이 비교적 간단하고 측정 주기가 짧고 상대적이지만 믿음직한 결과를 얻을 수 있으며 재현성이 가능하다는 것이다

참고 자료

물질전달 및 분리공정. 지인당. 박창호, 김우식, 정인식 공저. 1999,7,30
- p283~306

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