생화학실험 첫번째. DNA추출 방법

소개

건국대학교 생화학실험 A+ 자료
DNA 추출 실험

목차

1.실험일자
2.실험제목
3.실험목적
4.실험이론
5.실험재료
6.실험과정
7.실험결과
8.고찰

본문내용

우선 위의 그림은 동물세포와 식물세포의 구조이다. 이러한 식물세포와 동물세포의 구조는 DNA추출 실험을 할 때, 실험방법의 차이를 가져온다. 왜냐하면 식물 세포는 동물 세포에는 존재하지 않는 세포벽을 가지고 있기 때문이다. 그래서 식물 세포를 추출할 때는 세포벽을 없애기 위해 갈아주는 과정이 포함된다.
식물의 유전체 DNA는 서던 블롯 분석, 유전체 도서관 제작 및 PCR(genomic PCR)등에 필수적으로 사용된다. 지금까지 식물체에서 DNA를 분리하는 여러 방법들이 개발되었는데, 식물체에서 DNA를 분리하는 과정은 기본적으로 1)식물체 분쇄, 2)세포 용해(cell lysis), 3)용해된 세포에서의 DNA 추출 등의 단계로 이루어진다.
우리 실험에서는 주위에서 간단히 구할 수 있는 식물체를 이용해서 식물의 유전체 DNA를 3시간 정도의 실험 시간 내에 추출하는 방법을 알고자 하였다. 이 방법은 Dellaporta 등과 Murray와 Thompson에 의해 개발된 식물 DNA 추출방법을 개량한 것으로서, 간단한 시약 및 용액으로 비교적 빠른 시간 내에 DNA를 분리할 수 있다. 이 방법으로 얻어진 DNA는 여러 종류의 다당류나 페놀 복합체와 같은 불순물을 완전히 제거하기는 어려우나, PCR과 기타 효소처리를 하기에 충분한 정도의 순도를 가진다. 그러나 유전체 도서관 제작과 같은 고순도의 DNA를 필요로 할 때는 CTAB buffer나 Protenase K buffer를 사용한 방법 혹은 상업용으로 개발된 여러 종류의 식물 추출용 kit를 사용하는 것이 바람직하다.
5.실험재료 : 식물, Liquid Nitrogen, spatula, 2ml tube, DNAzol, Chloroform, Centrifuge, voltex, mixer, ethanol, Distilled water, TE buffer, 96 well plate, micropipette, spectrometer, 저울, 막자사발, spatula

6.실험과정 :
저울을 이용하여 식물 0.1g을 잰다.

참고자료

· 일반생물학실험 /한양대학교 출판부/한양대학교 분자생명과학부
· 생명과학실험 / 동아대학교 / 김민주 등
· 생물학 실험서 / 예스북 /전북대학교 자연과학대학
· 일반생물학실험/ 지코사이언스
· 식물세포의 DNA 추출