HPLC Column 이론

소개

HPLC Column에 대한 자료입니다.

목차

Column

Pore Size

Pore size와 Molecular weight

Column packing material

Particle shape

Particle size

컬럼의 효율에 영향을 미치는 요인

기존의 C18 컬럼의 기초 이론

End-capping이란

일반적인 Column 보관법

Column 수명 늘리기 위한 방법

본문내용

컬럼이란 무기 세라믹 소재 또는 고분자 합성물질이 충진 되어진 부분
혼합성분들을 각각의 단일성분으로 분리시키는 기능을 하며, 어떤 물리적, 화학적 변화에도 잘 적응 할 수 있어야 함
일반적으로 컬럼 안에 있는 물질들을 충진제( packing material ) 라 함.

Pore Size

보통 60-10,000Å 까지 있으며, 분석용 컬럼의 대부분은 150Å 이하임
분자량이 큰 물질을 분석할 경우 pore size는 커야됨
단백질과 같은 고분자를 분석할 경우 300Å 의 컬럼을 많이 사용함

Pore size와 Molecular weight

시료의 분자량이 충진 물질의 기공 크기보다 1/3 이상인 경우 기공 속에서의 시료 이동이 어렵게 되어 컬럼은 낮은 효율을 나타냄
분석용으로 가장 많이 사용되고 있으며 적합한 기공크기는 60 ~ 130Å 정도임

Column packing material

일반적으로 컬럼 안에 있는 물질들을 충진제(packing material)라 하며, 충진제의 기본 물질로 주로 실리카(silica), 알루미나(alumina), 합성 고분자(organic polymer)등이 많이 사용됨

Particle shape

구형(Spherical) :
일반 HPLC용 컬럼의 충진제로 많이 활용이 되고 있음
(a)
(b)
불규칙형(Irregular) :
과거에는 분석용으로 많이 활용 되었으나 좋지 않은 안정성 등으로 인하여 분석에서는 점차 사용이 줄어드는 추세

Particle size

3μm
3μm의 입자는 좋은 분리 효율을 가지고 있지만, 반면에 고압 및 짧은 수명을 가지고 있음
5μm
5μm의 입자는 3μm 보다는 떨어지고 10μm 보다는 좋은 분리 효율과 낮은 압력으로 가장 범용으로 사용이 되는 크기임
(a)
(b)

컬럼의 효율에 영향을 미치는 요인

컬럼에 충전된 물질이 같은 C18이라도 충전 물질의 표면성질에 따라 여러 가지 이름으로 불린다.
충전물질의 표면성질을 결정하는 요소에는 충전제로 사용하는 Silica의 종류, Pore Size, 표면적, 결합 상태, Carbon Loading % 등이 있다.

참고자료

· 없음