기기분석실험 HPLC

목차

1. 실험목적
2. 실험재료 및 실험방법
3. 이론
4. 결과 및 고찰

본문내용

1. 실험목적 :
HPLC를 이용햐여 약물을 정량할 수 있다.
HPLC 사용법을 익힐 수 있다.

2.실험재료 및 실험방법
실험재료 : HPLC, metformin 스탠다드 용액, 이동상(D.W : MeOH = 70 : 30), C18(고정상)
실험방법
1) 이동상 D.W와 MeOH를 70 : 30으로 섞어 제조한다.
2) 이동상과 고정상을 확인한다.
3) HPLC 전원을 켠다.
[Mobile phase] D.W. : MeOH= 70 : 30
[Column] C18 Column (5um, 4.6 mm * 150 mm)
[Stop time] 6 min
[Flow rate] 1mL/min
[Injection volume] 20uL
[Wavelength] 232 nm 로 프로그램으로 설정해 준다.
4) 이동상의 기포를 제거해 준다.
5) 시료를 주입한다.
6) 기기 안정화 시킨다.
7) Blank 측정한 뒤 standard와 Sample을 넣어서 측정한 뒤 분석한다.
8) 성분 분석과, 양을 분석한다.

3.이론
1) HPLC 구성
(1) 탈기장치 : 유량과 압력에 영향을 줄 수 있는 이동상 중의, 용존산소, 질소, 기포
등을 없애기 위해 사용하는 장치
> 장비에 연결된 튜빙이 얇기 때문에 정확한 결과 값을 얻는데 영향을 끼쳐 기포를
없애는 것이 매우 중요함.
(2) 펌프 : 이동상을 주입부, 컬럼, 검출기까지 운송하기 위한 고압 펌프
> 일정한 유속이나 압력을 유지하는 요소이며 정확한 결과값, 높은 재현성 도출에
가장 필요한 부분이다.
(3) 시료주입기 : 전개재(이동상)에 시료를 더해 컬럼으로 보내주는 역할을 한다.
(4) 칼럼 : 시료의 분리가 일어나는 부분이다.

참고 자료

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