단백질 계대배양 및 흡광도 측정

소개

헤모글로빈 단백질을 포함한 E. coli 의 main culture를 수행
00nm OD값 측정을 통해 단백질발현에 적절한 세균의 증식 상태를 확인 한 후 IPTG를 넣어서 lac operon을 이용하여 헤모글로빈 단백질을 발현
실험관련 원리 및 시약조사, 주의사항이 모두 조사되있고 discussion이 한페이지가 넘게 잘되있습니다.

목차

1.title

2.purpose

3.principle

4.reference

5.material

6.methods

7.results

8.discussion

9.conclusion

본문내용

계대배양
세포가 단층으로 자라고 멈추기 때문에 배양접시에서 세포를 떼어내어 새로운 배양접시에서 배양하는 방법으로 세포를 증식시킨다. 이 처럼 계대배양은 주기적으로 세포를 새배지에 이식시킴으로써 균주를 보존하는 방법으로, 계대배양 사이의 기간은 미생물에 따라 다르며, 또 상용된 배지 외부의 환경에 따라 달라질 수 있기 때문에 계대배양 시 적당한 보존배지의 선택 및 저장조건, 계대빈도 등을 고려해야 한다. 우리가 실험하는 계대배양의 경우에는, 조금은 다른 개념. 대를 계속해서 이어간다는 정도의 의미로 작은 플라스크에서 키웠던 것을 커다란 플라스크에 옮겨 계속해서 배양한다는 의미로 사용.
Main culture
미생물을 대량 배양할 때 종균을 시험관 내에 배양한 후 진동 플라스크, 종 배양조로 순차적으로 용적이 큰 배양장치에서 액체 배양, 증식시켜 주배양조 안의 배지에 접종한다. 이 최후 단계의 배양을 말한다.
Lac operon
lactose의 uptake와 catabolism에 필요한 단백질을 code하는 3 종류의 structural gene 보유. Repressor가 lac promoter의 operator에 결합하면 전사는 일어나지 않고, 젖당의 농도가 높아지면 젖당과 결합하여 프로모터로부터 암호화 부위로 전사가 진행된다.

참고자료

· 없음